山东部分地区禽传染性支气管炎流行病学调查

为了解近年来山东省流行的禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)S1基因遗传特性,试验于2020-2023年从山东14个地市的肉鸡养殖场及蛋鸡养殖场共收集462份病料(包含组织器官、泄殖腔拭子和咽拭子),采用RT-qPCR和RT-PCR对病料进行IBV检测。结果显示:山东省2020-2023年肉鸡和蛋鸡养殖场IBV阳性检出率为27%(125/462),并在3年试验期间IBV感染率呈现逐年上升趋势,在初春、秋末及冬季感染率较高,以济南(49%)、泰安(33%)和东营(28.9%)地区IBV阳性检出率最高,肉鸡的IBV感染率略高于蛋鸡。试验成功分离37株IBV分离株,其S1基因核苷酸同源性为74.8%~99.8%,分属GⅠ-22、GⅠ-13、GⅠ-7、GⅠ-1、GⅠ-28(LZ05型)和GⅠ-19(QX型)6种基因型,其中QX型为分离株优势基因型(83.7%,31/37)。31株QX型IBV分离株S1基因在第68、116、208、261、333和369位的碱基突变、替换最为频繁。研究提示:山东部分地区IBV感染率呈现逐年上升趋势,多发于寒冷季节且肉鸡发病较为严重,流行毒株仍以QX基因型为主,并且LZ05型首次在鲁中地区被检出。

山东省部分地区猪伪狂犬病病毒分离鉴定及TK基因遗传变异分析

为了解当前山东省猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)流行特点,本研究对2018年来自山东省不同地区的10份伪狂犬疑似病料进行PRV的分离鉴定,并对分离株的TK基因进行了序列测定及遗传变异分析。结果表明,共分离到7株PRV,其TK基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为99.1%~99.8%和98.7%~99.4%,与参考毒株TK基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.8%~99.9%和97.2%~99.7%,而且7株分离株与国内报道的PRV变异株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均高于欧美毒株。对TK基因的核苷酸序列分析发现,与欧美参考株相比,分离株和国内变异株在其碱基第644-645位由AC突变为GT,导致其氨基酸第215位由苏氨酸(T)突变为缬氨酸(V)。TK基因的遗传进化树分析结果表明,本研究中7株分离株分别与国内之前报道的JS-2012、HeN1、TJ以及ZMD2012等变异株位于两个相对独立的分支上,亲缘关系较近,而都与NIA3、Becker等欧美毒株以及疫苗株Kaplan(Bartha-K61株)的遗传距离较远。结果表明,本研究所得7株分离株均应属于PRV变异毒株。

2017～2018年山东省H9N2亚型禽流感病毒HA基因的遗传进化分析

为了解山东省H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的变异情况,采用RT-PCR技术对24株山东分离株的HA基因进行扩增、测序和遗传进化分析。结果显示:分离株HA基因在遗传进化树中均属于欧亚分支的Y280-like分支,与A/DK/HK/Y280/97的HA基因核苷酸序列相似性为89.1%～90.5%。HA裂解位点均只有一个碱性氨基酸(R),符合低致病性AIV的特征。所有毒株234位受体结合位点均为L(亮氨酸),呈现出典型的人流感病毒受体结合特性。另外,分离株均缺失218～220位糖基化位点且新增313～315位糖基化位点。研究表明,分离毒株HA基因在分子水平上发生了变异,要积极应对低致病性禽流感防控面临的新挑战。

山东济宁地区百日鸡群沙门菌的鉴定及耐药特性研究

为评估山东地方品种百日鸡沙门菌的耐药基因、耐药表型特点以及不同血清型沙门菌间的克隆关系等,本研究对采自山东济宁禽场90枚18胚龄百日鸡死胚进行细菌的分离鉴定,并采用血清诊断试剂盒测定分离菌的血清型;采用PCR方法进行多位点序列分型(MLST)、耐药基因和Ⅰ类整合子的检测;利用K-B法测定其耐药表型。结果显示,90枚死胚共分离出46株沙门菌(鸡白痢沙门菌25株、肠炎沙门菌21株),其中12枚鸡胚存在两种沙门菌的共感染;46株沙门菌共分为3种ST型:ST11(21/46,45.65%)、ST92(20/46,43.48%)和ST2151(5/46,10.87%);分离菌形成两个克隆群CC1和CC2,亲缘关系较近,其中ST11型与人源流行株ST1558和ST1747型亲缘关系较近;对红霉素耐药的菌株达到100%(46/46),对氨苄西林耐药的菌株占89.13%(41/46),其中多重耐药菌株占93.5%(43/46),但对多粘菌素、复方新诺明、美福仙均敏感,且来自于同一死胚的鸡白痢沙门菌比肠炎沙门菌耐药谱更广;从分离菌中检测到β-内酰胺类、喹诺酮类和磺胺类耐药基因,其中磺胺类耐药基因sul3的检出率最高为100%(46/46),Ⅰ类整合子的检出率为8.69%(6/46);菌株质粒中检出了β-内酰胺类和磺胺类耐药基因bla_(PSE)(97.83%,45/46)、bla_(CTX-M)(95.65%,44/46)和sul2(97.83%,45/46)。分离菌除喹诺酮类耐药基因qnrD与其耐氧氟沙星表型存在显著相关性外,其他分离菌携带耐药基因与其耐药表型相关性不大;接合试验显示,接合子接合成功率为89.13%(41/46),接合子耐药表型全部发生改变:73.17%(30/41)的接合子耐药谱变窄,20.39%(10/41)的接合子丢失部分耐药表型并获得新的耐药表型,2.4%(1/41)的接合子耐药谱变宽;接合子共检出4种耐药基因bla_(TEM)(100%,41/41)、blaCTX-M(80.49%,33/41)、sul1(58.54%,24/41)和sul3(73.17%,30/41),分离菌位于质粒上的耐药基因blaCTX-M、bla_(TEM)、sul1、sul3由供体菌水平传递到了受体菌。本研究对百日鸡群沙门菌病的净化具有一定的参考意义。

山东省某规模化猪场猪胸膜肺炎综合诊断

本研究对泰安某规模化猪场育肥猪的病死猪进行了病理剖检观察、病理组织学检查和病原检测。结果发现,病猪心包扩张,腔内充满浆液纤维素性渗出物,肺胸膜表面有纤维素渗出,肺膈叶暗红色实变,病理组织学观察发现肺呈卡他性纤维素性出血性肺炎病变,肺组织内可见蓝染球杆菌。PCR检测仅猪胸膜肺炎放线杆菌呈阳性,通过细菌分离和16S rDNA测序进一步证实该菌为猪胸膜肺炎放线杆菌,遗传进化分析显示其与目前我国猪场中流行的猪胸膜肺炎放线杆菌株的遗传关系较近,未见明显变异。

黄河三角洲盐碱地区德系长毛兔生态养殖技术研究

黄河三角洲盐碱地区土壤和饲草资源丰富,适合发展草食动物养殖。德系长毛兔是有重要经济价值,饲喂经济效益高。本文根据黄河三角洲植被和饲草资源特点,从长毛兔选育、兔场建设、不同发育阶段长毛兔饲养管理、疫病防控等方面,总结分析黄河三角洲盐碱地区德系长毛兔的科学饲养方法,以促进当地粮改饲进程;同时长毛兔养殖过程产生的排泄物还田,形成有机肥,用于盐碱地土壤改良,实现种养结合,形成绿色开发、种植-养殖循环发展模式,促进土地和饲草资源的高效生态利用,使之成为山东省黄河三角洲盐碱地区新旧动能转换示范区,有重要的经济效益和社会效益。

预制菜食品微生物潜在风险点分布及其原因探究

病原微生物污染是引发预制菜食品质量安全问题的重要因素,从原料到消费终端,每个环节都有可能出现微生物的污染。所以,探究预制菜每个环节的微生物风险点是非常必要的。本文针对预制菜原料生产、加工环节、仓储运输、消费环节潜在的微生物污染因素,进行系统分析总结,分析形成微生物污染的原因,讨论相关检测方法,以期为预制菜食品安全可持续发展提供参考。

免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用

根据近几年各地大型鸡场不同类型病鸡的实验室鉴别诊断结果,结合国内外的研究进展,本文对不同免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用做了全面的分析和探索。现有资料表明,不同的免疫抑制性病毒的亚临床感染在规模化畜禽群体中是非常普遍的,但往往只有在同一个体发生二重或多重感染时,在它们的相互作用下对个体和群体造成的免疫抑制和其它病理反应才比较明显。在此基础上,本文提出了"条件致病性病毒"的概念,并对其含义和内涵作了讨论。这一观念的引入,可能有助于理解和解释高密度饲养鸡群中疫病的复杂性及其控制的艰难性。鸡群中的免疫抑制性病毒的多重感染造成一部分个体处于"不完全免疫状态",使许多已经多次强化免疫的鸡场中仍有部分个体成为A类病病毒侵袭的对象并成为新的传染源,也容易造成在"免疫选择压"作用下病毒的抗原变异。此外,同一个个体的多重病毒感染,为病毒间通过基因重组产生新病毒创造了条件。

浅谈生物安全背景下影响猪群免疫防控效果的因素

自2018年我国暴发非洲猪瘟(ASF)疫情以来,给我国养猪业造成了巨大损失。人们对动物健康的重要性及其与生物安全的关系的认识有所增加。本文结合提高生物安全意识、生猪价格波动以及养殖成本变化等方面,总结了影响猪群免疫防控效果的因素,以期为养殖从业者提供一定的参考。

新农科背景下畜牧兽医人才培养融入思政元素的实践探究——以山东农业大学动物科技学院动物解剖学课程教学为例

课程思政是高校人才培养和教育教学的重要内容,目标就是要培养德才兼备的社会主义建设者和接班人。作为高等农业院校动物科学、动物医学等专业的首门主干专业基础课程,动物解剖学与专业其他课程有着密切的联系,是学好其他专业课程必不可少的基础。文章旨在开展思政教育融入动物解剖学课程教学研究,积极发挥教师教书育人的主体责任,牢记“为党育人,为国育才”使命,引导教师捕捉解剖学知识与思政内容的结合点,提升高校教师课程思政意识和能力,促进课程与思政同向同行,厚植学生“兴农报国”情怀,不断提高教学水平和学生的思想道德水平,以适应新农科建设背景下高水平畜牧兽医人才培养的需要。

B亚群禽白血病病毒SDAU09C2株的TCID_(50)与p27抗原之间的相关性研究

为了研究B亚群禽白血病病毒(ALV-B)的半数细胞培养物感染量(TCID50)与p27抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)的S/P值之间的相关性,本试验将ALV-B SDAU09C2株接种鸡胚成纤维细胞(CEF细胞),换维持液后连续10d取样,检测10d的TCID50值与p27抗原的S/P值之间的相关性;同时,将该毒株在DF-1细胞系上传代至20代,取其中的第1、5、10、15和20代分别进行TCID50滴度的测定和p27抗原检测。结果表明,在CEF细胞上接种的ALV-B SDAU09C2株连续10d的TCID50值与p27抗原之间存在显著的正相关(r=0.94002;P<0.0001);在DF-1细胞系上传的不同代数之间也呈显著正相关(r=0.96449;P=0.0080)。由此可推测ALV-B的TCID50与p27抗原呈显著正相关,可以用ELISA法测得的p27抗原的S/P值来估测病毒的TCID50值。

山东部分地区新型鹅星状病毒ORF2基因克隆及遗传进化分析

为了解新型鹅星状病毒(NGAstV)在山东部分地区的流行和变异情况,试验采用临床剖检、组织病理学观察和PCR方法对近期来自山东部分地区的32份病鹅样品进行NGAstV检测,并扩增ORF2基因进行遗传进化分析。结果表明:发病雏鹅心脏、肝脏、肾脏等组织有明显尿酸盐沉积,肾小管上皮细胞变性、坏死,脾脏部分淋巴细胞坏死,淋巴细胞数量减少。PCR检测发现被检样品中共有8份NGAstV阳性,阳性率为25%,扩增并测定其ORF2基因序列后进行遗传进化分析,显示获得的8份毒株与近年来鹅场流行的NGAstV遗传关系最近,氨基酸同源性在98.6%~99.6%之间。说明目前山东部分地区有NGAstv的流行但流行毒株尚未发生明显变异。

黄河三角洲盐碱地区饲草成分与优质肉羊生产技术

黄河三角洲盐碱地区域土地和饲草资源丰富,非常适合发展肉羊产业.然而,该区域土地、饲草资源利用率和肉羊养殖规模化水平不高,造成资源不同程度的浪费.本文根据黄河三角洲地区土地和饲草资源特点,对肉羊品种引进、场地选择与羊场建设、日粮配给、

黄河三角洲盐碱地区饲草高效利用与沂蒙黑山羊养殖技术

沂蒙黑山羊为山东省优质山羊品种,其耐粗饲、抗逆性强,适宜放牧或放牧为主、舍饲为辅相结合的养殖模式,非常适合在黄河三角洲盐碱地区养殖,实现区域丰富的饲草资源高效利用。本文从羊种选育、日粮配合、饲养管理、卫生与疫病防控等方面,总结盐碱地区域养羊生产管理规范,合理利用盐碱地饲草资源,促进三角洲区域资源绿色开发和生态高效利用,具有重要的经济效益和社会效益。

兔干扰素研究进展

干扰素因其抗病毒、抗肿瘤、抗寄生虫活性及免疫调节作用被广泛关注和研究。兔干扰素的研究与其他动物干扰素的研究相比较为落后。文章综述了兔干扰素的分类、原核表达、真核表达、抗病毒活性的研究进展,并结合兔干扰素的相关研究进展进行了展望。

鸭坦布苏病毒山东流行株的分离鉴定及其基因组序列分析

为了解山东省鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)的流行与变异情况,对2018年下半年至2019年上半年泰安、济宁和淄博等地送检的临床病鸭样品进行了DTMUV病原学检测,并对阳性病料进行病毒分离鉴定及分离株的全基因组序列分析。结果显示:从102份样品中,共检测到8份DTMUV阳性,阳性率检出率为7.8%,从阳性病料中分离到3株DTMUV分离株;3个分离株基因全长均为10993 bp,彼此间的氨基酸同源性为99.2%~99.3%,与24个参考毒株的同源性为95.8%~99.9%,均属于中国株I型;与参考毒株相比,分离株的核衣壳蛋白C、囊膜蛋白E和非结构蛋白NS1的同源性相对较低,分别为86.1%~99.2%,95.0%~99.4%和92.3%~99.7%,同时存在数量不等的氨基酸突变位点,但关键的蛋白结构和潜在的糖基化位点无差异。结果表明,DTMUV在山东部分地区仍有流行,但流行毒株基因结构及致病特性与经典毒株相比无明显变化,但应持续关注和深入研究。

鸡IL-18cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

运用RT PCR方法,从经脂多糖(LPS)诱导的鸡马立克氏病成淋巴细胞样细胞系 MDCC MSB1 总 RNA中扩增得到了鸡白细胞介素18(Chicken interleukin 18,ChIL 18)成熟蛋白基因的 cDNA,并将其克隆到 pMD18 T载体上。DNA序列测定表明,克隆得到的ChIL 18 cDNA与国外报道的完全一致,包括终止密码子在内其编码区的长度为510bp,编码169个氨基酸残基的蛋白质。将ChIL 18 成熟肽段编码区定向克隆到原核表达载体 pGEX 6P 1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,构建成原核表达质粒 pGEX ChIL18。该质粒的 BL21(DE3)LysS转化菌在 IPTG的诱导下可高效表达GST ChIL18基因融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的32%。

鸡白细胞介素18成熟蛋白全长基因的克隆与序列测定

根据已发表的鸡白细胞介素 18(IL- 18)成熟蛋白的 c DNA序列 ,设计 1对特异性引物 ,应用 RT- PCR从脂多糖(L PS)刺激 10 h活化的 MDCC- MSB1细胞中克隆到编码鸡 IL - 18成熟活性蛋白的完整基因片段 ,其大小为 5 10 bp。经序列测定证实 ,所获得的 c DNA基因序列与文献报道的结果完全一致 ,从而为进一步研究鸡 IL- 18的基因表达、生物学活性以及应用奠定了基础。

禽白血病/肉瘤病毒肿瘤基因及其与致肿瘤机制的关系

根据致瘤机制的差异,禽白血病/肉瘤病毒可以分为两大类,其差异主要在于所表达肿瘤基因的不同。慢性转化型病毒通过插入启动机制间接激活细胞原癌基因,肿瘤形成速度缓慢;急性转化型病毒则是直接转录表达病毒自身基因组中的病毒肿瘤基因,从而诱导肿瘤的快速形成。作者拟对禽白血病/肉瘤病毒肿瘤基因及其与致肿瘤机制的关系进行综述。

猪支原体肺炎弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果评估

为研究猪支原体肺炎(MPS)弱毒活疫苗与灭活疫苗联合免疫的免疫效果,本研究选取40头10日龄猪肺炎支原体(Mph)阴性仔猪,随机平均分为4组。A组肌肉注射灭活疫苗;B组喷鼻弱毒活疫苗;C组肌注灭活疫苗同时喷鼻弱毒活疫苗;D组为空白对照。疫苗免疫后每天观察猪群的整体状态,于免疫后3 d、30 d、90 d、180 d,分别采集鼻腔棉拭子和血液样品,进行应激相关指标以及相关疾病的抗体检测,并于免疫后180 d进行MPS病原检测。仔猪屠宰时称重,采集其完整肺脏,计算其平均增重并进行肺脏病变评分。结果显示:C组猪生长状况最好,猪群支原体感染率低、抗体水平高、平均增重高并且肺脏病变程度低,表明采用MPS灭活疫苗和弱毒活疫苗联合的免疫效果更好,并且未引起严重的应激反应。本研究对MPS疫苗的合理应用提供了实验依据。