人乳头瘤病毒疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)是宫颈癌的主要致病因子,宫颈癌已成为继乳腺癌之后引起女性死亡的第二大癌症,在一些发展中国家宫颈癌已居女性癌症死亡率首位。另外,HPV还与很多其他癌症及皮肤、黏膜疣等常见疾病有关。因此,研究和开发预防和治疗宫颈癌及HPV相关疾病的疫苗十分必要,综述了HPV预防性疫苗和治疗性疫苗的研究进展,以期为HPV疫苗的研究提供参考。

轮状病毒细胞免疫机制的研究进展

轮状病毒(RV)是婴幼儿腹泻的主要病原,随着对RV感染免疫研究的不断深入,细胞免疫在其发病和疫苗研究中的作用越来越受到重视。T淋巴细胞参与了RV感染的免疫及保护,CD4+T细胞与CD8+T细胞对于RV感染清除均起到非常关键的作用,而且对于不同的RV表位随着时间的变化及组织的不同T细胞的应答也不同。细胞毒性T细胞则通过杀伤RV感染的细胞以清除病毒感染。此外IL-6I、L-2I、L-12、TNF-α和IFN-γ等细胞因子在轮状病毒感染时均有升高,在轮状病毒免疫调节中发挥作用。

线虫抗凝肽的研究进展

线虫抗凝肽(NAP)是自犬钩口线虫成虫分离得到的一系列具有抗凝作用的小分子多肽类 物质,含有约75-85个氨基酸,拥有22％的共同序列。NAP抗凝作用强,药效持久,成本低,临床 应用前景好,现已进入Ⅲ期临床试验评估阶段。就其研究进展做一综述。

昆虫细胞偏爱密码子优化的HPV16L1基因在昆虫和哺乳动物细胞中的表达

目的获得有效表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的重组杆状病毒和腺病毒,为研究HPV的免疫保护机制提供材料。方法按照昆虫细胞密码子偏爱优化并合成HPV16L1基因,利用Bac-to-Bac昆虫表达系统获得表达HPV16L1基因的重组杆状病毒,利用AdEasy腺病毒载体系统获得表达HPV16L1基因的重组腺病毒载体。通过间接免疫荧光和Western blot对HPV16L1基因表达进行鉴定,利用负染电子显微镜观察病毒样颗粒(VLP)的形成。结果获得了稳定表达HPV16L1蛋白的重组杆状病毒和重组腺病毒载体,在Sf9细胞和293细胞中可有效表达能被抗HPV16L1单克隆抗体识别的L1蛋白,分子质量单位为56ku,在Sf9细胞中可观察到VLP的形成。结论按照昆虫细胞密码子偏爱进行优化的HPV16L1基因,在昆虫细胞和哺乳动物细胞内均可有效表达。

重组线虫抗凝肽在毕赤酵母中的表达

目的:获得具有抗凝活性的重组线虫抗凝肽(NAP)蛋白,为新型抗凝药物的开发奠定基础。方法:将pPIC3．5K-rNAP质粒转化毕赤酵母菌株GS115,筛选出阳性菌株后,用甲醇诱导表达。收集酵母培养上清,用SDS-PAGE和Western blot分析表达产物,通过测定PT(血浆凝血酶原时间)、INR(血浆凝血酶原国际标准化比率)和APTT(活化部分凝血活酶时间)来验证其生物学活性。结果:获得了稳定表达NAP的重组酵母菌株。重组NAP被分泌表达,其分子量比预计分子量(8．7kDa)稍大,约为10kDa左右,可能与糖基化有关。体外活性检测证实其有较强的抗凝活性。结论:在毕赤酵母中成功表达了具有生物学活性的重组线虫抗凝肽,可用于新型抗凝药物的开发。