人多能干细胞诱导类肾的实验研究

目的:体外诱导人多能干细胞(human pluripotent stem cell,hPSC)来源的类肾体,探讨类肾的结构成熟度、血管化和非肾系分化现象。方法:通过肾上皮分化试剂盒诱导hPSC成类肾,用免疫荧光观察类肾元结构中特异性标志物CDH1、LTL和PODX的表达,透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)观察肾小球和肾小管微观结构;第15天类肾移植到SCID小鼠肾包膜下,4周后处死动物,取移植物行组织形态学观察,免疫荧光法观察移植物中人抗核抗原(human nuclear antigen,HNA)、CDH1、PODX和MECA-32的表达。结果:肾脏特异性标志物CDH1、LTL和PODX呈阳性表达,电镜观察到不成熟的足细胞和肾小管结构;移植后的类肾体积增大,观察到肉眼可见的血管,HE染色移植物内可见红细胞和类软骨组织,HNA、CDH1、PODX和MECA-32呈阳性表达。结论:hPSC可体外诱导结构不成熟的类肾,在体内环境下,类肾可完成血管化并持续生长,但存在大量非肾系结构。