IL-18基因转导乳腺癌细胞肿瘤原性的改变及抗瘤作用的研究

目的:建立转人白细胞介素-18(IL-18)基因的乳腺癌细胞株Bcap37细胞,并探讨IL-18基因转导后Bcap37细胞肿瘤原性的改变和抗瘤作用。方法:将携带人IL-18的质粒pcDNA3.1-IL-18转导入人乳腺癌细胞系Bcap37细胞中,通过药物G418进行筛选,采用RT-PCR和ELISA法对IL-18基因的表达进行检测;裸鼠致瘤实验观察肿瘤原性的改变;观察灭活后Bcap37-IL-18细胞的抗瘤作用。结果:IL-18基因成功转导入Bcap37细胞中并能顺利表达;RT-PCR电泳结果显示IL-18基因在mRNA水平有表达;ELISA结果显示,106个转导细胞在24 h内分泌IL-18的含量是(126.3±4.5)pg;空载体转染的细胞未检测到IL-18;裸鼠致瘤实验表明,接种Bcap37-IL-18细胞的裸鼠肿瘤的生长速度明显低于Bcap37组和Bcap37-pCDNA3.1组;抗瘤实验结果显示,放射灭活的Bcap37-pcDNA3.1细胞和Bcap37-IL-18细胞免疫接种裸鼠后,再接种Bcap37细胞于裸鼠左侧背部皮下。肿瘤长出的时间Bcap37-IL-18细胞免疫接种组比Bcap37-pCDNA3.1细胞免疫接种组明显延长,且肿瘤的体积Bcap37-IL-18细胞免疫接种组比Bcap37-pCDNA3.1细胞免疫接种组小。结论:IL-18基因能成功的整合到Bcap37细胞基因组中,且在转导的肿瘤细胞中持续表达;IL-18基因转染降低了Bcap37细胞的肿瘤原性;IL-18基因修饰的Bcap37细胞具有明显的抗肿瘤作用。

G-CSF在人实体肿瘤细胞株中的表达及其对细胞增殖的影响

目的:探讨G-CSF在人实体肿瘤细胞株中的表达及外源性rhG-CSF对肿瘤细胞增殖的影响及机制。方法:人G-CSF ELISA试剂盒检测肿瘤细胞G-CSF的分泌水平,细胞计数法和MTT法检测rhG-CSF对肿瘤细胞增殖的影响,流式细胞仪分析rhG-CSF对KB细胞周期和细胞凋亡的影响,免疫细胞化学检测G-CSF受体在肿瘤细胞中的表达。结果:T-24细胞分泌大量G-CSF;rhG-CSF呈剂量依赖性促KB细胞增殖,并在质量浓度为100 ng/mL达最大值,与对照相比,差异有统计学意义(P<0.05);KB细胞表达G-CSF受体,rhG-CSF拮抗KB细胞的G0/G1期阻滞,降低KB细胞凋亡率。结论:T-24细胞表达G-CSF;rhG-CSF通过作用于KB细胞表面的G-CSF受体拮抗G0/G1期阻滞、抑制凋亡而发挥促增殖作用。

骨髓增生异常综合征患者细胞免疫功能及可溶性肿瘤坏死因子受体的研究

目的:研究骨髓增生异常综合征(MDS)外周血T细胞亚群分布及血清、骨髓可溶性肿瘤坏死因子受体1和2(sTNF-R1和sTNF-R2)的水平及其意义。方法:用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞CD3、CD4和CD8的表达,ELISA法检测血清和骨髓sTNF-R1和sTNF-R2的水平。结果:低危组(RA+RAS)的CD3+细胞(70．04±4．25)％明显升高,MDS患者CD4+细胞减低,低危组为(30．77±6．58)％;高危组(RAEB+RAEB-T)为(25．32±7．93)％,MDS患者CD4／CD8比例亦减低,低危组为0．89±0．24;高危组为0．91±0．52,而MDS患者CD8+细胞明显升高,低危组为(34．96±5．43)％;高危组为(29．67±7．38)％。MDS 2种sTNF-R水平均明显升高,低危组sTNF-R1血清为(1 586．13±573．24)ng／L,骨髓为(2 103．42±259．27)ng／L;sTNF-R2血清为(1 445．73±498．22)ng／L,骨髓为(1 961．50±614．53)ng／L;高危组sTNF-R1血清为(2 621．20±546．65)ng／L,骨髓为(3 146．03±412．14)ng／L;sTNF-R2血清为(1 972．34±558．31)ng／L,骨髓为(3 087．12±569．42)ng／L。血清sTNF-R2水平与CD8+细胞呈正相关,与CD4／CD8呈负相关。结论:细胞免疫异常及免疫分子表达异常增高,在MDS发病中起重要作用。

白细胞介素-18基因修饰大肠癌细胞肿瘤疫苗的制备及抗肿瘤作用研究

目的:制备人白细胞介素-18(hIL-18)基因的修饰的大肠癌基因工程肿瘤疫苗,观察其抗肿瘤作用。方法:应用MTT法观察X线照射后对SW480细胞生长的影响,治疗15d后,采用ELISA法检测实验鼠血清IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-4、IL-10;将SW480细胞和SW480-IL-18细胞应用放射线灭活后接种于裸鼠左侧背部皮下,再接种SW480细胞于裸鼠右侧背部皮下,观察灭活后SW480-IL-18细胞的抗瘤效应。结果:经过高能X线照射后,SW480-IL-18细胞生长停滞,96h细胞全部死亡。未照射的106个SW48-IL-18细胞在24h内分泌IL-18的含量是182.7PG;照射组可是60.39pg。空载体转染的SW480细胞和未转染的SW480细胞上清液中未检测到IL-18。SW480-IL-18组较SW480组和pcDNA3.1/SW480组,能明显刺激T细胞增殖(P=0.01);而SW480组和pcDNA3.1/SW480组,对T细胞的刺激作用微(P=0.27)。灭活SW480-IL-18细胞能有效地激活裸小鼠体内NK细胞活性。SW480-IL-18细胞治疗后,治疗组较其他对照组肿瘤生长明显受到抑制(P<0.05)。治疗组小鼠存活期显著延长,有33.4%小鼠长期存活,高于对照组。结论:IL-18基因修饰的SW480细胞具有明显的抗肿瘤作用,为大肠癌基因工程肿瘤疫苗的研制提供了实验基础。

恶性肿瘤骨转移疼痛的治疗现状

恶性肿瘤骨转移在临床上十分常见,它可以导致许多严重的并发症（尤其是骨痛）,从而降低肿瘤患者的生活质量,甚至威胁患者的生命.本文简要的介绍应用化疗、止痛药、双膦酸盐类药物、内分泌治疗、分子靶向治疗、神经阻滞及毁损治疗、放射治疗、放射性核素治疗、中医治疗和手术等方法治疗骨转移性疼痛的现状,为临床应用这些治疗手段提供参考.

蟾酥注射液诱导肿瘤细胞凋亡和对bcl－2基因表达影响的研究

目的观察蟾酥注射液体外诱导的肿瘤细胞凋亡，探讨其对凋亡相关基因bcl-2蛋白和mRNA表迭的影响。方法采用Giemsa染色、透射电镜技术、AI计数、DNA片段化电泳、DNA片段化定量和流式细胞术对蟾酥注射液诱导的肿瘤细胞凋亡进行观察。同时采用流式细胞术和逆转录PCR检测蟾酥注射液作用后肿瘤细胞凋亡相关基因bcl-2蛋白和mRNA表达水平的变化。结果2．25×10^-1mg／L蟾酥注射液处理48h的HL-60，K562，U937细胞出现典型的凋亡细胞形态特征和生化特征改变。2．25×10^-1mg／L蟾酥注射液处理不同时间的HL-60、K562、U937细胞的凋亡指数．DNA片段化率、凋亡细胞率均高于对照组（P均〈0．05）。2．25×10^-1mg／L蟾酥注射液处理的HL-60细胞bcl-2蛋白表达阳性率高于对照组（P〈0．05），并且随着时间延长bcl-2蛋白表达有减少趋势。2．25×10^-1mg／L蟾酥注射液处理的HL-60细胞bcl-2基因mRNA相对表达量随着时间延长，有下降趋势。结论蟾酥注射液体外诱导肿瘤细胞HL-60，K56，U937发生细胞凋亡。诱导细胞凋亡可能是蟾酥注射液抗肿瘤的机制之一。蟾酥注射液在诱导肿瘤细胞凋亡时影响bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平，提示bcl-2基因表达的改变可能是蟾酥注射液诱导细胞凋亡的机制。

诺维本联合化疗治疗晚期恶性肿瘤病人的护理研究

32例晚期恶性肿瘤患者应用诺维本 (NVB)加顺铂 (DDP)联合化疗方案进行治疗。在治疗过程中 ,我们采取一系列有效的护理预防措施 ,使化疗药物的毒副作用明显降低 ,静脉炎的发生率仅为 11.3% ,骨髓抑制期间无一例并发症发生 。

肿瘤抑制基因p15与肺癌

p15基因为定位于染色体9p21的抑癌因子,通过抑制细胞周期蛋白(Cyclin)和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)复合物的形成与激活,阻止细胞由G_1期进入S期,从而减少细胞的异常生长及变异,阻止肿瘤的发生和发展。p15基因缺失与肺癌发生发展密切相关。肿瘤抑制基因p15可能成为比p53更有力的的肺癌基因治疗靶基因。

非小细胞肺癌驱动基因突变的CT影像特征研究进展

肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因,非小细胞肺癌约占肺癌的85%,晚期非小细胞肺癌传统化疗效果不佳,针对特定驱动基因突变的分子靶向药物在临床治疗上取得巨大突破,改写了肺癌临床治疗实践。肺癌CT影像特征与驱动基因突变的关联分析一直是肿瘤影像研究领域的热点,尤其是近年影像组学研究方法的进步给研究者提供了新的手段和视角。本文对不同驱动基因突变(人表皮生长因子受体1、渐变性淋巴瘤激酶、人表皮生长因子受体2等)和野生型非小细胞肺癌人群的CT影像特征(肿瘤位置、直径、形态、肿瘤密度、胸膜播散、淋巴结转移等)和影像组学特征(CT衰减能量、肿瘤主方向、归一化灰阶不均匀特征、最大二维直径列等)进行总结分析,并对CT影像特征在不同驱动基因突变中的鉴别作用进行分析。

食管癌三维适形放疗疗效和靶区勾画与局部复发关系的探讨

目的:通过分析三维适形放疗的临床结果,初步探讨食管癌靶体积勾画的合理性。方法:共46例行三维适形放疗的食管癌患者进入研究。将靶体积分为大体肿瘤体积(GTV)、临床靶体积(CTV)和计划靶体积(PTV)。处方剂量PTV60~70Gy。采用Kaplan-Meier计算局部区域无进展生存率和总生存率。对比疗前和疗后CT,判断肿瘤复发或未控位于野内、野外或边缘。复发的部位在90%剂量曲线内定义为野内复发,在90%和50%剂量曲线内定义为边缘复发,50%剂量曲线外定义为野外复发。结果:1和2年局部区域无进展生存率分别为67.4%和49.9%,总生存率分别为和76.1%和58.7%。野内、边缘、野外复发或未控分别为50.0%、18.7%和31.3%。结论:该靶体积划定方法是比较合理的,但仍需进一步研究。

耐药相关基因表达对Ⅲ期非小细胞肺癌新辅助化疗的临床预测价值探讨

背景与目的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrugresistance-associatedprotein,MRP)、肺耐药蛋白(lungresistanceprotein,LRP)在多药耐药中发挥重要的作用,联合检测它们在评价非小细胞肺癌新辅助化疗中的价值国内外尚未见报道。本研究旨在探讨联合检测P-gp、MRP、LRP对Ⅲ期非小细胞肺癌新辅助化疗敏感性的预测价值。方法应用免疫组化技术检测31例行新辅助化疗的患者化疗前标本及化疗后手术标本。结果化疗前P-gp、MRP、LRP表达的阳性率分别为29.0%(9/31)、45.2%(14/31)及38.7%(12/31),化疗后分别为61.3%(19/31)、51.6%(16/31)及41.9%(13/31)。化疗前MRP和LRP同时阳性者32.3%(10/31),MRP与LRP具相关性(r=0.61,P<0.001)。化疗前P-gp、MRP、LRP表达阳性者化疗有效率分别为44.4%(4/9)、28.6%(4/14)及16.7%(2/12),MRP与LRP同时阳性者有效率为10.0%(1/10)。化疗有效的患者中位生存期为31个月,无效的为15个月,同期直接手术的患者为18个月。结论肿瘤中MRP与LRP共表达者化疗耐药的可能性很大,化疗有效率较低,新辅助化疗意义不大。

复方水蛭素的药效学研究

目的:探讨复方水蛭素抗肿瘤的作用机理。方法:①对W256肿瘤的影响:于大白鼠左前腋下接种W256瘤种细胞液(0.3 ml/只),次日开始用药。阴性对照组给予生理盐水;阳性对照组给予5-FU;中药组分别给予不同剂量的复方水蛭素;②对胃癌靶细胞(NKM)的影响:将药物稀释成1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640的浓度,接种于多孔培养板内的人胚胎肺细胞(HEL)和肿瘤靶细胞(NKM)上,37℃、CO2培养,观察细胞病变,计算抑瘤指数;③对超氧化物歧化酶(SOD)和脂质过氧化物(MDA)的影响:取小鼠44只,随机分成四组,给药方法同W256肿瘤实验组,连续用药30 d,次日摘取小鼠眼球取血,用微量快速检测法测定SOD和MDA的含量。结果:复方水蛭素对W256肿瘤具有明显的抑制作用(P<0.01),该药浓度在1∶80(最大抑瘤浓度)时抑制肿瘤靶细胞的效应最大,1∶640(最小抑瘤浓度)时,抑制肿瘤靶细胞的效应最小。同时,复方水蛭素还能明显提高小鼠血中SOD的活性和降低MDA代谢产物的含量(P<0.05)。结论:复方水蛭素具有明显的体内外抗肿瘤作用。

E-cadherin、β-catenin、γ-catenin基因在胃癌组织中表达与侵袭转移的相关性

目的探讨上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)、连接素-β(β-catenin)及连接素-γ(γ-catenin)基因在胃癌组织中表达与侵袭转移的关系。方法采用免疫组织化学SP方法对60例胃癌、20例癌前病变(包括10例肠化生胃粘膜和10例异型增生胃粘膜)及20例正常组织进行E-cadherin、β-catenin、γ-catenin基因表达情况的检测。结果正常胃粘膜及肠化生胃粘膜组织中E-cadherin、β-catenin、γ-catenin的细胞膜均呈清晰的棕褐色染色;胃异型增生组织中,E-cadherin及β-catenin在同1例细胞膜表达基本丢失,γ-catenin表达未见异常,即在异型增生胃粘膜三者异常表达率为10%(1/10),在胃癌原发灶为80%(48/60),与胃癌Ming分型、TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。E-cadherin、β-catenin、γ-catenin基因异常表达率分别为61.67%、55.00%、58.33%。结论E-cadherin、β-catenin、γ-catenin基因异常表达导致细胞间粘附性下降,影响了细胞接触性生长抑制等信号的传导,从而参与细胞的恶性转化,与胃癌的生长类型、侵袭转移密切相关,是判断胃癌生物学行为的良好指标。

卡培他滨单药治疗蒽环类和紫杉醇类耐药的晚期乳腺癌25例

为了观察卡培他滨单药治疗蒽环类和紫杉醇类耐药晚期乳腺癌的临床疗效和毒副作用，对以蒽环类及紫杉醇类为基础的化疗方案耐药的晚期乳腺癌25例，应用卡培他滨2500ms／（m^2·d），口服14d，21d为1个周期，观察临床疗效和毒副反应。结果：共化疗112个周期，肿瘤缓解率24％（6／25），临床受益率56％（14／25），中位肿瘤进展时间3、9个月（1～17个月），中位生存期10个月（2．5～〉24个月）。Ⅲ、Ⅳ度毒副反应有：Ⅲ度手足综合征3例（12％），Ⅲ度白细胞下降2例（8％），Ⅲ度腹泻1例（4％），Ⅳ度恶心、呕吐1侧（4％）。初步研究结果提示，卡培他滨单药化疗蒽环类和紫杉醇类耐药的晚期乳腺癌，疗效确切、毒副反应轻、应用方便。

环氧合酶-2抑制剂对人肝癌细胞株的体外研究

目的:观察环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂Celecoxib对人肝癌细胞株增殖和凋亡的影响以及COX-2、Survivin和MDR1/P-gp表达水平的变化,探讨COX-2抑制剂治疗肝癌的作用机制。方法:MTT法检测细胞增殖状态;免疫组化法测定细胞中PCNA和COX-2表达;透射电镜及流式细胞仪观察Celecoxib诱导肝癌细胞凋亡的作用、对细胞周期的影响以及P-gp表达的变化;进一步用RT-PCR检测Survivin和COX-2mRNA在药物处理前后表达的变化。结果:人肝癌细胞系Hep-G2和BEL-7402中COX-2均有显著表达,Celecoxib呈时间和剂量依赖性抑制肝癌细胞增殖,促进其凋亡;细胞周期分布改变,G0/G1期细胞比例增加;肝癌细胞凋亡过程中,COX-2和Survivin基因的表达显著下调,P-gp表达减弱。结论:COX-2抑制剂Celecoxib可能通过下调COX-2、Survivin和P-gp表达,改变细胞周期分布,抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。

爱维治治疗急性放射性皮肤损伤的临床观察

目的:观察爱维治治疗急性放射性皮肤损伤的临床疗效。方法:分析46例2～4级急性放射性皮肤损伤患者的治疗情况,分为治疗组和对照组。治疗组27例用爱维治治疗;对照组19例用龙胆紫治疗。结果:皮肤损伤的治愈率治疗组为100%、对照组为63%。结论:爱维治治疗急性放射性皮肤损伤疗效满意。

环氧合酶-2对人肝癌细胞增殖和凋亡的调节作用

目的:观察环氧合酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)在肝癌细胞中表达,探讨COX-2抑制剂celecoxib对肝癌细胞增殖和凋亡的作用．方法:免疫细胞化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法研究COX-2在肝癌细胞株中表达;MTT法观察COX-2抑制剂对肝癌细胞增殖的影响;透射电镜及流式细胞仪观察 celecoxib诱导肝癌细胞凋亡的作用、对细胞周期的影响及MDR1／P-gp表达的变化;用RTPCR 方法检测Survivin mRNA药物处理后表达的变化．结果:celecoxib对肝癌细胞抑制增殖、诱导凋亡呈时间和剂量依赖性．celecoxib作用HepG2 48 h抑制率为70．98％±0．67％(200 μmol／L)、 47．93％±1．08％(100 μmol／L);Bel-7402为 57．29％±0．67％(200 μmol／L)、43．84％± 0．86％(100 μmol／L);同样浓度但作用20 h, HepG2为45．51％±1．35％(200 μmol／L), 14.35％±1．55％(100 μmol／L);Bel-7402则为34．35％±0．63％(200 μmol／L),15．35％± 0．88％(100 μmol／L),不同浓度以及不同作用时间相比均有显著差异(P<0．01);100 μmol／L celecoxib作用24,48,72,96 h的肝癌细胞凋亡率分别为12．2％±2．44％,4．0％±1．67％,20．4％±4．38％,57．9％±5．74％(HepG2)和3．0％± 1．05％,18．5％±3．51％,29.3％±3．25％,48．4％±4．77％(Bel-7402),与对照组相比有显著差异(P<0．01);细胞周期分布改变,G0／G1期细胞比例增加,24,48,72 h分别为:44．17％±1．01％,59．60％±0．61％,62．7％±1．22％ (HepG2)和47．80％±0．41％,58．60％±0．46％, 78．40％±1．95％(Bel-7402),与对照组比较有显著差异(P<0．01);对照组PCNA蛋白表达呈强阳性(+++),经药物处理后表达减弱,并随时间延长而显著;HepG2中COX-2蛋白表达明显弱于Bel-7402,药物处理后表达也不同．Survivin在肝癌细胞株中呈高表达状态, celecoxib作用48 h mRNA表达降至零,而72 h 后表达水平又有上升;两株肝癌细胞中经 celecoxib处理后,MDR1／P-gp表达有降低的趋势(Bel-7402),或是基本上不受影响(HepG2)．结论:COX-2抑制剂celecoxib体外对肝癌细胞有较强的细胞毒作用且以剂量、时间依赖方式抑制细胞增殖,并诱导凋亡,使细胞周期阻滞于G1／S期．COX-2与P-gp,Survivin表达密切相关．

利多卡因和地塞米松联合应用对诺维本所致静脉炎的疗效观察

诺维本（ＮＶＢ）是一种抗癌新药。文献报道，以ＮＶＢ为主的联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌有效率高达４０％，但局部注射静脉炎的发生率为４０．１％［１］。我科自１９９８年１月至７月，利用利多卡因和地塞米松静脉推注预防ＮＶＢ所致的静脉炎，取得了明显的临床疗效，...