调控肝细胞生长因子受体c-Met表达对结肠癌细胞生物学潜能的影响

目的 探讨调控肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met表达对结肠癌细胞生物学潜能的影响。方法 使用HCT116结肠癌细胞,采用质粒转染技术建立c-Met瞬时转染的人结肠癌细胞系,设该组细胞系为实验组(pcDNA-HGF组),同时设立阴性对照组(pcDNA-control组)和空白对照组(control组),应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测c-Met表达情况,采用MTT法评价转染后细胞的活性和增殖能力,通过单克隆实验、细胞周期和凋亡测定、细胞划痕实验等检测转染后的结肠癌细胞生物学功能的变化。结果 pcDNA-HGF组、pcDNA-control组和control组中HGF的表达量分别为30.07±2.85、1.97±0.25和1.01±0.21,F=298.311,P<0.001;3组c-Met的表达量分别为19.35±1.70、1.81±0.76和0.99±0.22,F=275.804,P<0.001。蛋白质印迹法结果显示,pcDNA-HGF组中HGF和c-Met蛋白的表达水平高于pcDNA-control组和control组。质粒转染HCT116细胞后,pcDNA-HGF组、pcDNA-control组和control组的细胞增殖活性分别为0.94±0.17、0.36±0.04和0.40±0.05,F=39.450,P<0.001。质粒转染12 h后,pcDNA-HGF组、pcDNA-control组和control组G/M期细胞比例分别为(59.29±2.52)%、(49.89±1.31)%和(49.27±1.53)%,F=27.298,P=0.001;24 h后3组G/M期细胞比例分别为(48.27±1.95)%、(34.05±4.00)%和(30.62±1.46)%,F=35.934,P<0.001。pcDNA-HGF组、pcDNA-control组和control组细胞凋亡率分别为(2.77±0.72)%、(3.13±0.95)%和(2.60±0.56)%,F=0.386,P=0.696;经促细胞凋亡药物甲基磺酸甲酯盐(MMS)处理后,3组细胞凋亡率分别为(37.53±2.65)%、(31.83±4.07)%和(33.30±3.05)%,F=2.398,P=0.172。转染48 h后,pcDNA-HGF组的细胞迁移活性增强。结论 调控c-Met的表达对结肠癌细胞的增殖侵袭过程产生影响,其高表达促进了结肠癌的进展,调控这一信号通路的表达具有重要意义。