腺病毒载体介导的p53基因可增强乳腺癌细胞系MDA—MB-468对表皮生长因子受体抑制剂的敏感性

目的观察腺病毒载体介导的p53基因（Ad—p53）能否增加三阴性乳腺癌细胞系MDA—MB-468对表皮生长因子受体（EGFR）抑制剂吉非替尼的敏感性。方法以Ad-p53和（或）吉非替尼处理MDA—MB-468细胞系，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot法检测p53和EGFR蛋白的表达以及P13K／Akt通路和凋亡通路相关蛋白的表达。建立裸鼠移植瘤模型，观察Ad—p53联合吉非替尼对裸鼠移植瘤的治疗作用，免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织中p53的表达。结果MTY法检测结果显示，Ad—p53感染MDA—MB-468细胞后，MDA—MB-468细胞对吉非替尼的敏感性增加，半数抑制浓度为4．5μmol／L。流式细胞术检测结果显示，对照组、Ad-p53组、吉非替尼组和联合组MDA—MB-468细胞的凋亡率分别为8．5％、17．4％、20．5％和32．6％，Ad—p53联合吉非替尼能够明显增加细胞凋亡（P〈0．05）。Westernblot法检测结果显示，Ad-053联合吉非替尼后，MDA—MB-468细胞中P—Akt蛋白的表达明显下调（P〈0．01），caspase-9和活化caspase-3蛋白的活性增加（均P〈0．01）。裸鼠体内实验的结果显示，Ad—p53组、吉非替尼组和联合组的肿瘤生长抑制率分别为35．7％、28．7％和74．4％，Ad-p53和吉非替尼对MDA—MB-468细胞裸鼠移植瘤的生长均具有抑制作用，且二者联合可明显抑制肿瘤生长（均P〈0．05）。免疫组化检测结果显示，对照组、Ad-p53组、吉非替尼组和联合组裸鼠移植瘤肿瘤组织中p53蛋白的阳性率分别为45．2％、80．1％、50．7％和90．6％，Ad-p53组和联合组裸鼠移植瘤中p53蛋白的表达明显增加（P〈0．01）。结论Ad-p53可能通过下调P13K／Akt通路相关蛋白的表达增加MDA-MB-468细胞对吉非替尼的敏感性；Ad—p53联合吉非替尼可能通过启动easpase级联反应促进MDA—MB-468细胞凋亡。