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新型强化融合蛋白Ec-LDM-TF体外抗乳腺癌细胞活性研究
被引量:
2
1
作者
张玉萍
万海涛
+1 位作者
梁华
刘文娟
《中华肿瘤防治杂志》
CAS
北大核心
2019年第18期1348-1354,1360,共8页
目的乳腺癌在我国发病率呈上升趋势,严重危害女性身体健康。本研究探讨新型融合蛋白Ec-LDM-TF的抗乳腺癌活性及其作用机制。方法采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)和细胞免疫荧光法检测Ec-LDM-TF与人...
目的乳腺癌在我国发病率呈上升趋势,严重危害女性身体健康。本研究探讨新型融合蛋白Ec-LDM-TF的抗乳腺癌活性及其作用机制。方法采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)和细胞免疫荧光法检测Ec-LDM-TF与人乳腺癌肿瘤细胞MCF-7和SK-BR-3表面表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的亲和活性;采用噻唑蓝(MTT)法测定Ec-LDM-TF对人纤维肉瘤细胞HT1180、人皮肤癌细胞A431、人乳腺癌细胞SK-BR-3和MCF-7的体外杀伤活性;流式细胞术检测Ec-LDM-TF作用后肿瘤细胞的凋亡和细胞周期变化;蛋白质印迹法检测Ec-LDM-TF对细胞凋亡通路中相关蛋白的影响。结果 Ec-LDM-TF可与高表达EGFR的MCF-7和SK-BR-3细胞表面结合。Ec-LDM-TF对人乳腺癌细胞MCF-7和SK-BR-3,以及人纤维素肉瘤细胞HT1080均有杀伤效果,其中对细胞SK-BR-3的杀伤效果最强,其IC50为13.93×10-12 mol/L。流式细胞术检测结果显示,MCF-7细胞在Ec-LDM-TF孵育24h后,晚期凋亡的细胞0.5、1nmol/L Ec-LDM-TF占比分别为(4.653±1.128)%和(21.233±0.900)%,与对照组的(1.86±1.3)%相比,差异有统计学意义,均P<0.05;而SK-BR-3细胞晚期凋亡的细胞为0.5、1nmol/L Ec-LDM-TF占比分别为(5.125±1.318)%和(33.055±2.312)%,与对照组(2.418±1.376)%相比,差异有统计学意义,均P<0.05。提示Ec-LDM-TF促使MCF-7和SK-BR-3细胞产生凋亡。在24h后SK-BR-3细胞Ec-LDM-TF给药组1nmol/L时G2期为(76.84±1.29)%,与对照组(5.52±0.95)%相比,差异有统计学意义,t=44.62,P<0.001;Ec-LDM-TF促使SK-BR-3肿瘤细胞G2/M期阻滞。蛋白质印迹法检测结果显示,在Ec-LDM-TF作用下,SK-BR-3细胞内Cl-Caspase-3和Cl-PARP均出现裂解带,Bax表达上调,Bcl-2表达下调。结论本研究制备的具有EGFR靶向的新型融合蛋白Ec-LDM-TF对人乳腺癌细胞具有杀伤活性,其作用机制为促使细胞凋亡。
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关键词
力达霉素
烯二炔融合蛋白
乳腺癌
细胞凋亡
细胞周期阻滞
原文传递
题名
新型强化融合蛋白Ec-LDM-TF体外抗乳腺癌细胞活性研究
被引量:
2
1
作者
张玉萍
万海涛
梁华
刘文娟
机构
青岛市中心
医院
放疗二科
青岛市中心
医院
内一科
山东省
肿瘤
防治
研究院
(
山东省
肿瘤
医院
基础
实验室
)
出处
《中华肿瘤防治杂志》
CAS
北大核心
2019年第18期1348-1354,1360,共8页
基金
国家自然科学基金(81502691)
文摘
目的乳腺癌在我国发病率呈上升趋势,严重危害女性身体健康。本研究探讨新型融合蛋白Ec-LDM-TF的抗乳腺癌活性及其作用机制。方法采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)和细胞免疫荧光法检测Ec-LDM-TF与人乳腺癌肿瘤细胞MCF-7和SK-BR-3表面表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的亲和活性;采用噻唑蓝(MTT)法测定Ec-LDM-TF对人纤维肉瘤细胞HT1180、人皮肤癌细胞A431、人乳腺癌细胞SK-BR-3和MCF-7的体外杀伤活性;流式细胞术检测Ec-LDM-TF作用后肿瘤细胞的凋亡和细胞周期变化;蛋白质印迹法检测Ec-LDM-TF对细胞凋亡通路中相关蛋白的影响。结果 Ec-LDM-TF可与高表达EGFR的MCF-7和SK-BR-3细胞表面结合。Ec-LDM-TF对人乳腺癌细胞MCF-7和SK-BR-3,以及人纤维素肉瘤细胞HT1080均有杀伤效果,其中对细胞SK-BR-3的杀伤效果最强,其IC50为13.93×10-12 mol/L。流式细胞术检测结果显示,MCF-7细胞在Ec-LDM-TF孵育24h后,晚期凋亡的细胞0.5、1nmol/L Ec-LDM-TF占比分别为(4.653±1.128)%和(21.233±0.900)%,与对照组的(1.86±1.3)%相比,差异有统计学意义,均P<0.05;而SK-BR-3细胞晚期凋亡的细胞为0.5、1nmol/L Ec-LDM-TF占比分别为(5.125±1.318)%和(33.055±2.312)%,与对照组(2.418±1.376)%相比,差异有统计学意义,均P<0.05。提示Ec-LDM-TF促使MCF-7和SK-BR-3细胞产生凋亡。在24h后SK-BR-3细胞Ec-LDM-TF给药组1nmol/L时G2期为(76.84±1.29)%,与对照组(5.52±0.95)%相比,差异有统计学意义,t=44.62,P<0.001;Ec-LDM-TF促使SK-BR-3肿瘤细胞G2/M期阻滞。蛋白质印迹法检测结果显示,在Ec-LDM-TF作用下,SK-BR-3细胞内Cl-Caspase-3和Cl-PARP均出现裂解带,Bax表达上调,Bcl-2表达下调。结论本研究制备的具有EGFR靶向的新型融合蛋白Ec-LDM-TF对人乳腺癌细胞具有杀伤活性,其作用机制为促使细胞凋亡。
关键词
力达霉素
烯二炔融合蛋白
乳腺癌
细胞凋亡
细胞周期阻滞
Keywords
lidamycin
energized fusion protein
breast cancer
cell apoptosis
cell cycle arrest
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新型强化融合蛋白Ec-LDM-TF体外抗乳腺癌细胞活性研究
张玉萍
万海涛
梁华
刘文娟
《中华肿瘤防治杂志》
CAS
北大核心
2019
2
原文传递
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