丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注时NF-κB活化和PUMA表达的影响

目的观察丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注(IR)时核因子(NF)-κB活化和P53正向凋亡调控因子(PUMA)、Bcl-2和Caspase-3基因表达的影响,并探讨其脑保护的机制。方法 90只雄性大鼠建立局灶性脑IR模型,随机分为IR组、丙泊酚组(P组)和假手术组(C组)。缺血前腹腔注射丙泊酚100mg/kg,各组再灌注时间为2、3、6、12、24、72h。蛋白质印迹法检测不同时间点的NF-κB、PUMA、Bcl-2和Caspase-3表达,凝胶电泳迁移率(EMSA)检测12、24h的NF-κB和PUMA活性;检测不同时间点Caspase-3活性;DNALader观察细胞凋亡。结果与C组比较,IR组缺血侧大脑皮层于再灌注2～24hNF-κB、PUMA表达逐渐升高,72h开始下降,Bcl-2在灌注6h内表达降低,以后逐渐升高,而Caspase-3在灌注2～24h内逐渐升高,72h开始下降。与IR组比较,P组在灌注后的各个时间点NF-κB、PUMA表达明显减少,而Bcl-2表达逐渐升高,Caspase-3逐渐降低。IR组Caspase-3的活性在24h最高,72h开始降低。在P组,Caspase-3蛋白活性升高不显著。DNALader发现,IR组6、12、24、72h见明显的DNA片段,而在P组未见明显的DNA片段。结论丙泊酚抑制NF-κB活化引起的PUMA上调,后者下调Caspase-3和上调Bcl-2,从而抑制神经组织细胞凋亡。