山东省动物粪便中非O157产志贺毒素大肠埃希菌菌株特征及耐药性分析

目的分析山东省动物粪便中非0157产志贺毒素大肠埃希菌（STEC）的菌株特征及耐药状况。方法于2015--2016年，采用方便抽样方法在山东省微山县、莱州市共采集1022份新鲜动物粪便标本，共分离到24株非0157STEC。通过血清凝集实验进行血清分型，采用微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验，后采用双纸片协同试验进行超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测。采用PCR方法检测耐药基因。采用PFGE进行分子分型并采用多位点序列分型（MLST）确定等位基因谱及菌株序列型。使用CLC Sequence Viewer及Conting Express生物信息软件分析不同sT序列群及菌株问的进化关系。结果24株非0157型STEC菌株中23株来自猪粪，1株来自牛粪；毒力基因均为stx2型；对磺胺异噁唑耐药的菌株较多，为22株，对复方磺胺异噁唑和萘啶酸耐药的菌株均为18株，对氯霉素耐药菌株为13株，对四环素耐药菌株为19株。存在多重耐药现象，耐药谱为：磺胺异嗯唑．四环素一复方磺胺异嗯唑．萘啶酸一氯霉素，对头孢吡肟和亚胺培南均为敏感。ESBLs确证实验表明，有4株非0157型STEC产ESBLs。PCR检测7种耐药基因，4种四环素类耐药基因（tetA、tetB、tetC、tetD）均有检出，ESBLs类耐药基因（blaSHV-1、blaCTX-M、bla TEM）均为阴性。24株菌分成15个PFGE型别，其聚类结果比较分散，无优势PFGE型别。MLST型别有11种，其中ST540、ST5133型别的菌株最多，各为4株菌，聚类为1个MLST基因组。结论山东省部分地区在动物粪便中检出的非0157STEC血清型比较分散，对常见的抗生素耐药率比较高，具有明显的分子多态性，应重点加强对这类菌株的监测和管理。