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Chk1和Chk2高表达人胃癌BGC823细胞的建立与鉴定 被引量:3
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作者 王莉 曾颖 +4 位作者 夏红 刘芳 苏波 凌晖 苏琦 《中南医学科学杂志》 CAS 2018年第5期468-472,477,共6页
细胞周期检测点Chkl和Chk2在参与G2/M期起着重要作用,本研究构建Chk1/2的真核表达载体和建立高表达Chk1/2基因人胃癌BGC823细胞,进一步证明Chk1/2高表达对BGC823细胞G2/M期的影响。根据NCBI Gen Bank Chk1/2基因全序列,在cDNA两端各设... 细胞周期检测点Chkl和Chk2在参与G2/M期起着重要作用,本研究构建Chk1/2的真核表达载体和建立高表达Chk1/2基因人胃癌BGC823细胞,进一步证明Chk1/2高表达对BGC823细胞G2/M期的影响。根据NCBI Gen Bank Chk1/2基因全序列,在cDNA两端各设计一条对应引物,并引入各自的酶切位点。从人胃癌细胞中提取mRNA作为模板合成Chk1/2 cDNA第一链,并扩增目的基因全表达序列片断,双酶切后定向克隆至pcDNA3.1真核表达载体,经氨苄青霉素筛选阳性重组质粒,菌液PCR及测序对重组质粒进行鉴定。用脂质体将重组质粒转染BGC823细胞,经G418筛选后,RT-PCR及Western blot检测表达产物。结果显示,菌落特异性PCR表明克隆的基因片断分别为1.4 kb和1.6 kb,经测序与NCBIBLAST分析证实为Chk1和Chk2基因。稳定转染空载体pcDNA3.1的细胞克隆株和稳定转染重组质粒的BGC823细胞,经RT-PCR及Western blot鉴定,Chk1/2在BGC823细胞中的表达较对照组与空载体组明显增加(P<0.05)。流式细胞术检测显示,Chk1转染组G2/M细胞较对照组与空载体组明显增加(P<0.05),而Chk2转染组G2/M细胞无明显差异(P>0.05)。上述结果表明,成功构建pcDNA3.1/Chk1与pcDNA3.1/Chk2真核表达载体和Chk1与Chk2高表达的BGC823细胞,Chk1高表达可阻滞BGC823细胞于G2/M。 展开更多
关键词 Chk1/2基因 真核表达载体 转染 人胃癌BGC823细胞
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剖宫产术后配合规范化护理的临床观察
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作者 崔英 王淑世 孙俊 《浙江临床医学》 2011年第7期834-835,共2页
近年来剖宫产手术应用越来越广泛,也被广大产妇认同和接受。但是剖腹生产较自然分娩创伤大,恢复慢,所以更需要配合良好的护理。本科应用规范化护理来解决产妇剖宫产术后存在的问题,效果满意,现将临床观察结果报告如下。
关键词 规范化护理 剖宫产手术 临床观察 术后配合 剖宫产术后 分娩创伤 应用 产妇
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大黄(庶虫)虫丸治疗子宫肌瘤46例临床观察
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作者 王淑世 崔英 张华 《国际中医中药杂志》 2011年第7期640-641,共2页
子宫肌瘤为女性生殖器较常见的良性肿瘤。临床主要表现为月经量多、经期延长、周期紊乱、痛经、子宫增大,严重时可导致子宫出血及贫血等。临床多采用中药保守治疗。大黄廑虫丸具有活血破瘀,通经消痞之功效,用于子宫肌瘤的治疗,取得... 子宫肌瘤为女性生殖器较常见的良性肿瘤。临床主要表现为月经量多、经期延长、周期紊乱、痛经、子宫增大,严重时可导致子宫出血及贫血等。临床多采用中药保守治疗。大黄廑虫丸具有活血破瘀,通经消痞之功效,用于子宫肌瘤的治疗,取得满意疗效,现报告如下。 展开更多
关键词 中药保守治疗 临床观察 子宫肌瘤 大黄 女性生殖器 良性肿瘤 月经量多 主要表现
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