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枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化 被引量:8
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作者 刘文龙 刘胜利 +2 位作者 王兴吉 王克芬 王帅 《化学与生物工程》 CAS 2019年第1期47-52,共6页
选用玉米粉、豆饼粉、KH_2PO_4及Na_2HPO_4为基础配方,通过单因素实验对枯草芽孢杆菌发酵产中性蛋白酶的发酵培养基、培养条件、发酵条件进行优化。确定了优化的发酵培养基为:20g·L^(-1)甘油,30g·L^(-1)豆饼粉,2mmol·L^(... 选用玉米粉、豆饼粉、KH_2PO_4及Na_2HPO_4为基础配方,通过单因素实验对枯草芽孢杆菌发酵产中性蛋白酶的发酵培养基、培养条件、发酵条件进行优化。确定了优化的发酵培养基为:20g·L^(-1)甘油,30g·L^(-1)豆饼粉,2mmol·L^(-1)氯化钙,0.3g·L^(-1 )KH_2PO_4,4g·L^(-1 )Na_2HPO_4;优化的培养条件为:培养温度30℃,接种量5%。调控发酵培养基pH值7.0控制发酵,发酵24h酶活达到7 344U·mL^(-1)。进行流加甘油实验,培养温度30℃,发酵过程控制pH值7.0,调整转速和通风量控制溶氧30%~35%,接种量5%,经过30h发酵,酶活达到10 654U·mL^(-1),较未补料提高了45%。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 中性蛋白酶 液体发酵 酶活
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谷氨酰胺转氨酶发酵工艺优化及其酶学性质 被引量:2
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作者 王兴吉 刘文龙 +1 位作者 郭庆亮 张杰 《安徽农业科学》 CAS 2017年第32期161-164,共4页
[目的]研究茂源链霉菌LD195产TGase的最佳发酵工艺条件,并探讨TGase的酶学特性。[方法]采用L9(34)正交试验对产谷氨酰胺转氨酶的茂源链霉菌菌株培养基和培养条件进行优化。[结果]最佳无机盐配方为Na2HPO42.0 g/L,Mg SO4·7H2O 1.5 g... [目的]研究茂源链霉菌LD195产TGase的最佳发酵工艺条件,并探讨TGase的酶学特性。[方法]采用L9(34)正交试验对产谷氨酰胺转氨酶的茂源链霉菌菌株培养基和培养条件进行优化。[结果]最佳无机盐配方为Na2HPO42.0 g/L,Mg SO4·7H2O 1.5 g/L,KH2PO42.5 g/L,Ca Cl23.0 g/L,最佳培养条件为培养温度30℃,装液量25 m L,摇床转速200 r/min,接种量10%。该谷氨酰胺转氨酶的最适反应温度为50℃,在40~60℃条件下保温30 min酶活基本没有损失;最适反应pH为6.0,在pH为5.0~7.0条件下保存30 min仍具有85%以上酶活;同时Fe3+、Cu2+、Zn2+会强烈抑制酶的活性。[结论]茂源链霉菌LD195产TGase具有良好的耐酸性和耐热性,在商业化生产中具有广阔前景。 展开更多
关键词 培养基 茂源链霉菌 谷氨酰胺转氨酶 酶学性质
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灰色链霉菌LD1810产胰蛋白酶发酵条件的优化 被引量:2
3
作者 王兴吉 王克芬 +1 位作者 刘文龙 郭庆亮 《安徽农业科学》 CAS 2019年第2期7-9,51,共4页
胰蛋白酶(Trypsin)作用于碱性氨基酸精氨酸及赖氨酸羧基所组成的肽键,被广泛用于食品、医药和皮革等工业领域。该文研究高产诱变灰色链霉菌LD1810产胰蛋白酶(SGT)的最优发酵培养基,探讨SGT的最佳发酵条件,为SGT的商业化生产提供技术参... 胰蛋白酶(Trypsin)作用于碱性氨基酸精氨酸及赖氨酸羧基所组成的肽键,被广泛用于食品、医药和皮革等工业领域。该文研究高产诱变灰色链霉菌LD1810产胰蛋白酶(SGT)的最优发酵培养基,探讨SGT的最佳发酵条件,为SGT的商业化生产提供技术参考。通过单因素试验和L_9(3~4)正交试验确定发酵培养基的最佳组分:葡萄糖20 g/L,大豆粉40 g/L,KH_2PO_4 2.5 g/L,CaCl_2 1 g/L。最适发酵条件为发酵温度28℃,初始pH 8.0,300 mL三角瓶的装液量100 mL,摇床转速240 r/min。 展开更多
关键词 灰色链霉菌 胰蛋白酶 培养基 发酵条件
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产碱性β-甘露聚糖酶重组毕赤酵母发酵条件优化及酶学特性研究 被引量:1
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作者 钱娟娟 曹世源 +2 位作者 王克芬 王兴吉 刘文龙 《中国饲料添加剂》 2019年第5期11-14,20,共5页
本研究通过对本公司一株表达β-甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌LD023,对其发酵条件和酶学特性进行研究,根据研究结果,其发酵诱导阶段最适pH为5.5、最适移种量为10%、最适碳源为甘油、最适诱导阶段前菌体湿重为220g/L,而该酶的最适反应pH范... 本研究通过对本公司一株表达β-甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌LD023,对其发酵条件和酶学特性进行研究,根据研究结果,其发酵诱导阶段最适pH为5.5、最适移种量为10%、最适碳源为甘油、最适诱导阶段前菌体湿重为220g/L,而该酶的最适反应pH范围为9.5~10.5、最适反应温度范围为45~50℃,并且具有良好的热稳定性。 展开更多
关键词 毕赤酵母 Β-甘露聚糖酶 耐碱 发酵优化
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一株产角蛋白酶菌株诱变筛选及发酵条件优化
5
作者 刘文龙 王兴吉 +1 位作者 张志来 王克芬 《中国饲料添加剂》 2018年第10期17-21,共5页
对实验室保藏产角蛋白酶菌A2进行NTG(亚硝基胍)诱变,从中筛选出一株酶活提高144%的突变菌株A2-453,对该突变株的发酵条件进行优化。从产酶时间、添加外源碳、氮源来研究其酶活变化,经优化后得到最佳的发酵条件是:发酵60h时酶活... 对实验室保藏产角蛋白酶菌A2进行NTG(亚硝基胍)诱变,从中筛选出一株酶活提高144%的突变菌株A2-453,对该突变株的发酵条件进行优化。从产酶时间、添加外源碳、氮源来研究其酶活变化,经优化后得到最佳的发酵条件是:发酵60h时酶活单位最高:最佳外源碳源是葡萄糖,最佳外源氮源是豆饼粉。经最优条件进行发酵,酶活单位提高42%。 展开更多
关键词 角蛋白酶 亚硝基胍 诱变 酶活 碳源 氮源
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产碱性脂肪酶重组毕赤酵母发酵条件优化及酶学特性研究
6
作者 王兴吉 曹世源 +3 位作者 钱娟娟 王克芬 张杰 刘文龙 《中国饲料添加剂》 2020年第9期11-14,共4页
本研究通过对本公司一株表达碱性脂肪酶的毕赤酵母工程菌LD039,对其发酵条件和酶学特性进行研究,根据研究结果,其发酵最适pH为5.0、最适移种量为12%、最适诱导阶段前菌体湿重为220g/L,而该酶的最适反应pH范围为10.5-11.5、最适反应pH为1... 本研究通过对本公司一株表达碱性脂肪酶的毕赤酵母工程菌LD039,对其发酵条件和酶学特性进行研究,根据研究结果,其发酵最适pH为5.0、最适移种量为12%、最适诱导阶段前菌体湿重为220g/L,而该酶的最适反应pH范围为10.5-11.5、最适反应pH为11.0,最适反应温度范围为35-45℃、最适反应温度为40℃,并且具有良好的耐碱性. 展开更多
关键词 毕赤酵母 脂肪酶 耐碱 发酵优化
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高产耐热β-木糖苷酶重组毕赤酵母发酵条件优化及酶学特性研究
7
作者 刘文龙 曹世源 +3 位作者 钱娟娟 王兴吉 王克芬 刘胜利 《中国饲料添加剂》 2021年第9期13-16,共4页
本研究的研究对象为本公司一株表达耐热性β-木糖苷酶的毕赤酵母工程菌LD108,然后对该菌株的发酵条件和酶学特性进行研究,根据研究结果,其发酵最适pH为6.5、最适移种量为11%、最适诱导阶段前菌体湿重为240g/L,而该酶的最适反应pH范围为5... 本研究的研究对象为本公司一株表达耐热性β-木糖苷酶的毕赤酵母工程菌LD108,然后对该菌株的发酵条件和酶学特性进行研究,根据研究结果,其发酵最适pH为6.5、最适移种量为11%、最适诱导阶段前菌体湿重为240g/L,而该酶的最适反应pH范围为5.5-6.5、最适反应pH为6.0,最适反应温度范围为70-80℃、最适反应温度为75℃,并且具有良好的耐热性。 展开更多
关键词 毕赤酵母 Β-木糖苷酶 耐热 发酵优化
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芽孢杆菌产碱性蛋白酶的研究进展 被引量:8
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作者 王兴吉 佟新伟 +1 位作者 王克芬 刘文龙 《食品与发酵科技》 CAS 2019年第1期62-65,共4页
本文主要综述了微生物碱性蛋白酶在国内外的应用研究和现状,综述了碱性蛋白酶的结构与功能,产碱性蛋白酶的菌株以及相应碱性蛋白酶的应用及存在的问题,并对碱性蛋白酶应用前景进行了展望。
关键词 碱性蛋白酶 代谢产物 基因工程 酶工程
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亚硝基胍与紫外线复合诱变选育高产乳糖酶菌株的研究 被引量:4
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作者 刘文龙 王兴吉 +1 位作者 曹世源 盛花开 《食品与发酵科技》 CAS 2017年第4期73-76,共4页
以本公司菌种保藏室的产乳糖酶米曲霉菌株AJ2010作为出发菌株,经过亚硝基胍与紫外线复合诱变,选育出一株高产的乳糖酶菌株ZW-003,连续传代培养后产乳糖酶活力性能稳定。根据试验结果,其活力较出发菌株提高62.1%。结论:通过紫外线和亚硝... 以本公司菌种保藏室的产乳糖酶米曲霉菌株AJ2010作为出发菌株,经过亚硝基胍与紫外线复合诱变,选育出一株高产的乳糖酶菌株ZW-003,连续传代培养后产乳糖酶活力性能稳定。根据试验结果,其活力较出发菌株提高62.1%。结论:通过紫外线和亚硝基胍复合诱变获得一株遗传稳定性良好的高产乳糖酶菌株ZW-003。 展开更多
关键词 亚硝基胍 紫外线 米曲霉 乳糖酶
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ARTP与紫外线复合诱变选育高产酸性蛋白酶菌株的研究 被引量:4
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作者 刘文龙 钱娟娟 +2 位作者 王兴吉 曹世源 王克芬 《食品与发酵科技》 CAS 2018年第6期5-8,共4页
以本公司菌种保藏室的产酸性蛋白酶黑曲霉菌株LD-015作为出发菌株,经过ARTP与紫外线复合诱变,选育出一株高产的酸性蛋白酶菌株BA-08,连续传代培养后产酸性蛋白酶活力性能稳定。其活力较出发菌株提高83.71%。通过紫外线和ARTP复合诱变可... 以本公司菌种保藏室的产酸性蛋白酶黑曲霉菌株LD-015作为出发菌株,经过ARTP与紫外线复合诱变,选育出一株高产的酸性蛋白酶菌株BA-08,连续传代培养后产酸性蛋白酶活力性能稳定。其活力较出发菌株提高83.71%。通过紫外线和ARTP复合诱变可获得遗传稳定性良好的高产酸性蛋白酶菌株。 展开更多
关键词 ARTP 紫外线 黑曲霉 酸性蛋白酶
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产碱性纤维素酶菌株WS-135的筛选及酶学性质研究 被引量:2
11
作者 钱娟娟 王克芬 +3 位作者 刘胜利 王帅 王兴吉 刘文龙 《食品与发酵科技》 CAS 2020年第5期60-63,71,共5页
对实验室保藏菌种短小芽孢杆菌WS-135进行紫外诱变,筛选出产酶高的菌株A-5,酶活力为22.1U·mL^-1,较未诱变菌株提高2.37倍。以紫外诱变筛选菌株为出发菌株,进行硫酸二乙酯诱变,筛选得到一株酶活为28.9U·mL^-1的菌株B-7,较未诱... 对实验室保藏菌种短小芽孢杆菌WS-135进行紫外诱变,筛选出产酶高的菌株A-5,酶活力为22.1U·mL^-1,较未诱变菌株提高2.37倍。以紫外诱变筛选菌株为出发菌株,进行硫酸二乙酯诱变,筛选得到一株酶活为28.9U·mL^-1的菌株B-7,较未诱变菌株提高1.3倍。B-7菌株连续传代8次,酶活力保持稳定。研究其酶学特性,结果表明温度为35℃时酶的活性最好,在pH为7-10时,有较好的酶活性;在40℃,pH 9.0、10.0条件下酶活稳定,在常温下保藏8个月后,仍有80%的酶活力,表明该酶稳定性较好。 展开更多
关键词 碱性纤维素酶 诱变 酶学性质 稳定性
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耐热植酸酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学特性 被引量:1
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作者 王兴吉 刘文龙 +1 位作者 盛花开 王克芬 《中国饲料添加剂》 2018年第11期14-17,共4页
植酸酶能催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸盐,在食品、医药、饲料等方面有广泛应用。本研究通过PCR获得来源于地衣芽孢杆菌的耐热植酸酶基因P1,并在毕赤酵母中成功表达,得到重组菌BP-1。BP-1在BMMY表达培养基中植酸酶酶活459U/mL... 植酸酶能催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸盐,在食品、医药、饲料等方面有广泛应用。本研究通过PCR获得来源于地衣芽孢杆菌的耐热植酸酶基因P1,并在毕赤酵母中成功表达,得到重组菌BP-1。BP-1在BMMY表达培养基中植酸酶酶活459U/mL.该酶的最适作用pH5.0,最适作用温度为70%,且具有良好的耐热性和耐酸碱性,在80℃条件下保温70min,酶活仍剩余84%,80—95℃保温20min,酶活损失小于20%,在pH4.0—8.5条件下处理30min.酶活仍剩余80%以上。 展开更多
关键词 毕赤酵母 植酸酶 耐热 耐酸碱
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碱性脂肪酶在洗涤剂中复配的作用研究
13
作者 王克芬 王兴吉 +2 位作者 葛志豪 佟新伟 刘文龙 《中国饲料添加剂》 2021年第1期16-19,共4页
研究碱性脂肪酶与常见洗涤剂中主要有效作用成分(表面活性剂、助剂和碱性蛋白酶)复配后,新酶系的酶活力与去污白度的影响。结果表明碱性脂肪酶与其均有较好的相容性,为碱性脂肪酶在洗涤剂中的具体应用提供了一定理论基础。
关键词 碱性脂肪酶 表面活性剂 洗涤助剂 碱性蛋白酶
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水解毛桃果酒中花色素苷的β-葡萄糖苷酶酶学特性 被引量:6
14
作者 王兴吉 王克芬 +1 位作者 闫宜江 刘文龙 《食品科技》 CAS 北大核心 2019年第2期270-273,共4页
花色素苷广泛存在于植物细胞中,是植物花和果实的主要呈色物质。毛桃果酒酿造过程中添加β-葡萄糖苷酶处理后,花色素苷被分解,提升了果酒品质和风味。选取果酒中花色素苷含量最大的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为样品,对β-葡萄糖苷酶水解... 花色素苷广泛存在于植物细胞中,是植物花和果实的主要呈色物质。毛桃果酒酿造过程中添加β-葡萄糖苷酶处理后,花色素苷被分解,提升了果酒品质和风味。选取果酒中花色素苷含量最大的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷作为样品,对β-葡萄糖苷酶水解花色素苷的特性进行了研究。结果显示:β-葡萄糖苷酶水解花色素苷的最佳条件为35℃、pH4.0、最佳添加酶量为30 U/mL,Na^+及Fe^(3+)能促进反应进行,适当乙醇浓度对酶活有促进作用,β-葡萄糖苷酶水解花色素苷的米氏常数Km和Vmax分别为1.175 mg/L和0.221 mg/h·L。 展开更多
关键词 毛桃酒 Β-葡萄糖苷酶 酶学特性 花色素苷
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