戊型肝炎病毒与血液安全研究进展

戊型肝炎是戊型肝炎病毒(HEV)引起的一种传染病。戊型肝炎主要是HEV经粪—口传播引起的病毒性肝炎,然而近年来陆续报道了一些通过输血传播的病例。欧洲国家中,普通人群和献血者中HFEV的血清学流行率表明低估了HEV经输血传播的危险性。文章针对HEV的发现、基因型及其分布、HEV感染在献血者中的流行情况、HEV的血源性传播、HEV对机体的影响和HEV感染的预防等几方面进行阐述。

ABO抗体缺失致血型鉴定困难1例

ABO抗体是人类最重要的天然抗体,是一些类似A或B抗原的非特异抗细菌物质和免疫系统自我调节的产物[1]。在临床常规ABO血型鉴定过程中,正、反定型不符造成血型鉴定困难的案例时有报道,ABO抗体减弱或缺失为原因之一。近期对1例血标本进行血型鉴定时,发现正、反定型不符,最终证实是由ABO抗体缺失所致,现报道如下。

红细胞多凝集现象1例

多凝集红细胞是指红细胞膜发生异常后,红细胞除与自身血清、新生儿血清不发生凝集外,可与几乎所有成年人的血清发生凝集反应,在血型鉴定和交叉配血试验中常引起正反定型不符和次侧凝集的现象.近期在交叉配血过程中发现1例红细胞多凝集现象,现报告如下.

血清学与分子生物学技术鉴定产生抗-Dib抗体的Di(a+b-)血型1例

目的通过血清学实验和分子生物学技术鉴定出1例产生抗-Dib抗体的Di(a+b-)稀有血型.方法采用血清学方法对患者进行血型鉴定、直抗试验和不规则抗体筛查及鉴定试验,采用DNA测序方法鉴定患者的Diego血型基因.结果患者体内存在抗高频抗原抗体,分子水平确定其为Di(a+b-)稀有血型,因此其抗体为抗-Dib抗体.结论分子生物学鉴定血型基因有助于抗高频抗原抗体的鉴定.

三例Bx02亚型的血清学及分子生物学研究

目的对血清学定型为B亚型的血样标本进行基因检测，探讨其分子基础。方法应用PCR序列特异性引物（sequence specificprimer，SSP）对常规方法定型困难的3例样本进行ABO基因分型，并对其AB0血型基因第6、7外显子扩增后进行直接测序及单倍型测序，分析后确定其基因型。结果3例样本血型血清学结果均表现为B亚型，红细胞与抗-B弱凝集，血清中存在抗-B；基因分型显示均为B／O1；直接测序和单倍型测序显示均含有O等位基因，其B等位基因在第7外显子存在905A〉G突变，证实为Bx02等位基因。结论测序检测证实3例血清学定型困难的样本均为Bx表现型，样本1、2的基因型为Bx02／O101，样本3的基因型为Bx02／O102。

α-1,3半乳糖基转移酶基因c.1055G＞A突变导致ABO亚型ABw07的分子生物学研究

目的 探讨1例ABO血型系统ABw07亚型的分子生物学机制.方法 选择2014年3月12日于青岛市中心血站献血的1例ABO正反定型不符的疑难血型无偿献血者为研究对象.采用试管法对其进行血型血清学检测;采用PCR-序列特异性引物(SSP)法对其ABO基因进行分型,并且对其ABO基因第6、7外显子扩增后,进行直接测序及克隆测序,确定其ABO基因型.结果 ①本例献血者血型血清学检测结果显示,正定型为AB型,反定型为A型.②本例献血者ABO基因第6、7外显子的直接测序结果显示,ABO基因第261位脱氧核糖核苷酸无缺失,存在c.297A＞G、c.467C＞T、c.526C＞G、c.657C＞T、c.703G＞A、c.796C＞A、c.803G＞C、c.930G＞A及c.1055G＞A杂合突变.③单克隆测序结果显示,本例献血者的ABO基因存在c.1055G＞A突变,导致密码子由CGG突变为CAG,所编码的第352位氨基酸精氨酸突变为谷氨酰胺(p.Arg352Gln),ABO基因型为A102/Bw07.结论 α-1,3半乳糖基转移酶基因(B基因)c.1055G＞A(p.Arg352Gln)突变可能导致产生ABw07亚型,该亚型血型个体的血清中存在抗-B.

h^328（nt328G〉A）突变致类孟买血型的血清学及分子生物学分析

目的对1例类孟买型个体进行血清学方法鉴定，并探讨其分子机制。方法采用血型血清学方法确定先证者的红细胞血型，用PCR扩增ABO基因第6、7外显子、FUT1和FU心基因全编码区域，并分别对PCR扩增产物进行测序分析。结果血清学实验结果表明先证者为类孟买血型Ah-分泌型。测序结果显示ABO基因型为A102／O01；FUT1基因的328位点由G突变为A，导致110位丙氨酸（Ala）被苏氨酸（Thr）置换。结论FUT基因编码区nt328（G〉A）错义突变可能是本例类孟买型的分子生物学基础。

ABO血型基因及亚型真核表达载体的构建及鉴定

目的构建人ABO血型A101、B101及其CisAB01、Ae105、B（A）04和Bw03亚型真核表达载体，为研究ABO血型基因及砸型基因的功能奠定基础。方法从已知ABO基因分型的标本中（A101，B101）提取总RNA，将其逆转录合成cDNA，经特异性引物扩增目的基因片段，将其定向连接到pcDNA3．1（＋）真核表达载体；采用定点突变PCR的方法构建CisAB01、Ael05、B（A）04和Bw03亚型真核表达载体，通过测序鉴定其序列正确。将ABO血型A101、B101及其CisAB01、Ael05、B（A）04和Bw03亚型真核表达载体分别转染Hela细胞系，通过免疫荧光和Western印迹检测各ABO基因在细胞中的表达。结果测序结果显示扩增到的A101及B101cDNA以正确序列和方式插入载体，CisAB01、Ael05、B（A）04和Bw03亚型真核表达载体的测序结果显示相应位点均成功突变；免疫荧光和Western印迹结果显示A101、B101及其CisAB0l、Ael05、B（A）04和Bw03亚型在Hela细胞中均有表达。结论成功构建了ABO血型基因及亚型基因真核表达载体，体外转染Hela细胞成功表达糖基转移酶，为后续研究奠定了基础。

ABO血型亚型的血清学及分子生物学分析

目的探讨2例ABO血型亚型个体ABO血型亚型的血清学和分子生物学机制。方法选择分别于2015年10月21日和2015年11月12日，送青岛市中心血站输血研究所进行ABO血型鉴定的2例疑难血型全血标本为研究对象。采用血清学正反定型试验和吸收放散试验方法，对2例标本进行ABO血型鉴定；采用PCR-序列特异性引物（SSP）法对标本进行ABO基因分型检测，并对其ABO基因第6、7外显子的核苷酸序列进行直接测序，对ABO基因第6、7外显子及第6内含子进行单倍型测序。结果①1例标本的血清学鉴定为Ael型；直接测序结果显示，其ABO基因第7外显子存在c.940A〉G杂合突变；单倍型测序结果显示，ABO基因型为Ax13/O02；②另1例标本的血清学鉴定结果为Bel型；直接测序结果显示，其ABO基因第7外显子存在c.784G〉A杂合突变；单倍型测序结果显示，其ABO基因型为Bw17/O01。结论血清学分型和基因测序分型相结合的方法，是对疑难血型个体ABO血型亚型进行分型较为可靠的方法。

498例新生儿溶血病血清学检测结果分析

新生儿溶血病（hemolytic disease of the fetus and newborn,HDN）是指母婴血型不合引起的新生儿同种免疫性溶血,引起胎儿在宫内或出生后大量红细胞破坏,出现溶血性贫血、黄疸及其他多种临床表现的疾病.临床主要表现为胎儿水肿、黄疸、贫血、肝、脾肿大、胆红素脑病等.ABO血型不合的溶血病情较轻,可发生在第一胎婴儿,而Rh血型不合的溶血病情较重,一般不发生在第一胎婴儿.在我国,ABO血型不合者占多数,Rh血型不合者较少,其他MN、Kell血型系统等不合罕见.ABO-HDN约占HDN发病率的85％,其诊断依据主要借助于实验室检查,通过检测新生儿血液中有无来自于母体的针对性抗A或抗B免疫抗体来确诊[1].Rh-HDN约占HDN发病率的14％,其诊断主要通过检测新生儿血液中有无来自母体的针对性的抗D、抗E等免疫抗体来确诊[2].本研究对2010年5月至2013年12月来自青岛地区多家医院送检的HDN患儿全血标本进行血清学实验分析,旨在为临床早期诊断、治疗HDN提供实验依据.

抗-E合并抗-Jk^b致新生儿溶血病1例及文献复习

目的总结抗-E合并抗-Jk^b致新生儿溶血病（HDN）的临床诊疗经验。方法选择2015年4月3日于青岛市妇女儿童医院收治的1例抗E合并抗-Jk^b致HDN的患儿作为研究对象。患儿因“出生后全身黄疸进行性加重”从外院转至本院，初步诊断为Rh血型不合HDN。经相关实验室检查结果证实患儿存在不规则抗体抗-E和抗一-Jk^b后，及时给予换血及输血治疗，监测总胆红素（TBIL）、间接胆红素（IBIL）水平等指标，观察患儿转归，探讨治疗效果，并且进行相关文献复习。结果患儿入本院治疗时TBII。水平为303．5μmol／L、IBIL水平为291．6μmol／L；对症治疗3h后（换血治疗前），TBIL和IBIL水平分别升高至333．5μmol／L、316．5μmol／L；换血治疗后TBIL和IBIL水平明显降低，分别为219．6μmol／L、203．4μmo1／L。该患儿住院治疗10d后，各项实验室指标均恢复至正常水平，于2015年4月12日出院。结论加强基层医院对Rh血型和孕妇免疫性血清抗体筛查的认识，在准确诊断为重症HDN后采取换血治疗，可以有效的预防和治疗HDN。

白细胞介素-27及其受体的结构与生物学作用

IL-27是由p28和EBI3组成的异二聚体,主要由抗原提呈细胞产生;IL-27R由WSX-1/TCCR和gp130组成。IL-27具有多种生物学作用,能促进T细胞尤其初始CD4T细胞增殖,向Th1细胞方向分化产生IFN-γ,具有诱导Th1反应促炎性作用和减轻炎性反应双重作用,同时在抗肿瘤免疫方面也发挥重要作用。