内质网滞留型抗明胶酶胞内抗体的基因表达及对肿瘤细胞侵袭和增殖的抑制作用

目的 :明胶酶 (包括MMP 2和MMP 9)在恶性肿瘤转移扩散中发挥着重要的作用 ,探讨运用胞内抗体技术通过胞内抗体与明胶酶结合 ,阻断明胶酶向细胞表面的分泌 ,对恶性肿瘤细胞侵袭转移抑制的效果。方法 :构建可在真核细胞内质网表达抗明胶酶抗体基因的真核表达载体PcDNA3.1.ER .scFv ,瞬时和稳定基因转染 ,Westernblot检测基因表达 ,免疫沉淀实验检测胞内抗体与靶蛋白结合情况 ,明胶酶谱检测明胶酶的分泌 ,用相关方法观察细胞体外运动、侵袭和增殖。结果 :ER .scFv抗体基因在PG细胞内表达 ,能与靶蛋白MMP 9特异性结合 ,对PG细胞明胶酶分泌具有显著的抑制作用。ER .scFv胞内抗体对PG细胞体外Matrigel侵袭有抑制作用 ,抑制率为 76 .3% (P <0 .0 5 ) ,对PG细胞的体外迁徙没有影响。在体外增殖实验中 ,稳定表达ER .scFv的PG细胞在Matrigel的增殖受到明显抑制。结论 :内质网滞留型胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌这一关键通路中抑制肿瘤细胞明胶酶的活性 ,进而抑制与明胶酶直接相关的侵袭和增殖 。

应用几丁聚糖治疗急性腹膜炎和预防肠粘连的实验研究

目的 研究几丁聚糖对大鼠急性腹膜炎的治疗和术后肠粘连的预防作用。方法 4个月龄大鼠 2 0 0只制成急性腹膜炎和肠粘连动物模型。用 1 %的几丁聚糖作腹腔灌注 ,以生理盐水、 1 %醋酸和甲硝唑分别作对照 ,观察大鼠的死亡率、两周后存活动物的肠粘连程度和血清可溶性白细胞介素 - 2受体水平。结果 几丁聚糖显著降低大鼠的死亡率和粘连等级 (P <0 0 5)。在不同时间血清可溶性白细胞介素 - 2受体显著低于各对照组 (P <0 0 5)。结论 1