胰岛素抵抗基础和临床研究

1.建立呈胰岛素抵抗的HepG2细胞模型:将HepG2细胞置于10-7mol/L胰岛素培液中24小时,使HepG2细胞胰岛素受体充分下调,检测并比较下调和未下调的HepG2细胞、糖、脂类代谢水平发现:下调HepG2细胞(DR-HepG2)胰岛素受体减少了56%,将DR-HepG2细胞置于不同浓度胰岛素培液中,胰岛素受体数仍明显减少,当培液中胰岛素的浓度为10-7mol/L时,DR-HepG2细胞胰岛素受体数减少到17%,其14C-葡萄糖、14C-醋酸盐掺合量明显低于未下调的HepG2细胞(NDR-HepG2).将DR-HepG2细胞置于不含胰岛素DMEM培液中48小时,再用不同浓度的胰岛素刺激24小时,DR-HepG2细胞14C-葡萄糖、14C-醋酸盐掺合量仍明显低于NDR-HepG2细胞.结果提示:将HepG2细胞置于10-7M胰岛素环境中24小时,该细胞对胰岛素的作用产生抵抗,且可维持48小时.

黄芩甙对糖尿病患者周围神经传导速度和尿微量白蛋白排泄的影响

目的:为观察中药黄芩甙对糖尿病患者周围神经传导速度和尿微量白蛋白排泄的影响及临床意义。方法:将病程5年以上的74例糖尿病患者,随机分为黄芩甙治疗组和对照组,对照组常规治疗,黄芩甙治疗组在常规口服降糖药或胰岛素治疗的基础上,每日加服黄芩甙胶囊3g,连续观察治疗6个月。结果:黄芩甙治疗组,治疗后醛糖还原酶(AR)活性显著降低,尿微量白蛋白排泄率较对照组明显减少,神经传导速度趋于稳定和部分改善,而对照组未见明显改善。结论:黄芩甙具有明显抑制AR活性作用,并可有效的改善糖尿病患者周围神经传导速度,减少尿蛋白,对糖尿病肾病及神经病变具有改善和延缓作用。

内皮细胞型一氧化氮合酶基因多态性与糖尿病肾病的相关性研究

目的 探讨内皮细胞型一氧化氮合酶 (eNOS)基因第 7外显子 894G→T点突变 ,及其第4内含子的 1个 2 7bp的插入 /缺失 (a/b)多态性 ,与 2型糖尿病肾病 (DN)之间的关系。方法 894G→T点突变采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术 ,2 7bp的a/b多态性采用聚合酶链反应结合 4 %琼脂糖凝胶电泳分离技术。比较各组间的等位基因频率与基因型频率。结果 (1)早期糖尿病肾病组 (DN+ 组 )T等位基因及TG基因型频率显著高于糖尿病非肾病患者 (DN-组 ,P <0 0 5 )。 (2 )DN+ 组a等位基因及ab基因型频率显著高于DN-组 (P <0 0 5 )。 (3)DN+ 组的TGab基因型频率亦显著高于DN-组 (P <0 0 5 )。 (4)糖基化血红蛋白 (GHbA1c)、收缩压 (SBP)、总胆固醇(TC)、eNOS基因第 7外显子 894G→T基因点突变及第 4内含子a/b多态性均属糖尿病肾病的独立危险因素。结论 糖尿病患者eNOS基因第 7外显子T等位基因及第 4内含子a等位基因与DN+ 的发生密切相关 ,两种等位基因同时存在者 ,DN+

T2DM酮症患者血清脂联素水平变化及其与血脂的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)酮症患者血清脂联素(APN)水平的变化,以及其与血脂等因素的相关性。方法选择T2DM酮症患者(酮症组)52例,无酮症患者(非酮症组)58例;另选健康个体54例为正常对照(NC)组。分别测身高、体重、空腹血清APN、血糖、HbA1c、血脂。结果两组患者血清APN水平明显低于NC组(P<0.01)。酮症组APN水平明显低于非酮症组(P<0.01)。血清APN水平与HbA1c、TC、TG呈负相关,与HDL-C呈正相关,酮症组患者酮症纠正后APN水平与非酮症患者相比,差异无统计学意义。结论糖尿病酮症期间APN水平明显降低,酮症纠正后恢复。

胰岛素抵抗状态下HepG2细胞纤维蛋白溶解酶原激活物抑制物-1基因的表达

目的 观察胰岛素、胰岛素原对HepG2细胞纤维蛋白溶解酶原激活物抑制物 1(PAI 1)基因表达的影响。方法 将HepG2细胞置于 10 -7mol/L胰岛素培液中 2 4小时使胰岛素受体下调 ,将HepG2细胞诱导成为胰岛素抵抗的HepG2细胞 ,然后分别用胰岛素、胰岛素原 (10 -9mol/L)持续刺激HepG2细胞 2 4小时 ,检测培养液中PAI 1的活性、含量及胞浆中PAI 1mRNA水平。 结果(1)基础状态下胰岛素抵抗和非胰岛素抵抗的HepG2细胞PAI 1活性、含量及mRNA水平差异无显著性。 (2 ) 10 -9mol/L胰岛素或 10 -9mol/L胰岛素原刺激 2 4小时 ,胰岛素抵抗的HepG2 (IR HepG2 )细胞PAI 1活性、含量及mRNA水平明显高于非胰岛素抵抗的HepG2 (NIR HepG2 )细胞。 (3) 10 -9mol/L胰岛素和胰岛素原同时刺激 2 4小时 ,胰岛素抵抗的HepG2细胞PAI 1活性、含量明显高于二者之一单独刺激。 (4) 10 -4 mol/L二甲双胍可明显抑制HepG2细胞PAI 1mRNA的过度表达。 结论胰岛素抵抗状态下免疫反应性胰岛素水平升高 ,胰岛素抵抗的HepG2细胞PAI 1合成对胰岛素刺激的反应性增强是导致PAI 1活性升高的主要原因。 10 -4 mol/L二甲双胍可在mRNA水平抑制PAI 1的合成。