HPLC双波长法测定米力农注射液有关物质

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定米力农注射液有关物质,有效控制不同生产企业的产品质量。方法采用Shiseido C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,流动相为水-甲醇-硼酸钠缓冲液(725:250:25),流速1.0 ml/min,检测波长为284 nm(5-羟甲基糠醛)和254 nm(米力农杂质I、米力农杂质Ⅱ、其他杂质)。结果米力农与各杂质峰均能有效分离,米力农、5-羟甲基糠醛、米力农杂质I、米力农杂质Ⅱ分别在0.2~5μg/ml(r=0.9999)、2~50μg/ml(r=0.9996)、0.2~5μg/ml(r=1.0000)、0.2~5μg/ml(r=0.9999)浓度范围内线性关系良好,5-羟甲基糠醛、米力农杂质I、米力农杂质Ⅱ的回收率分别为99.9%(RSD=0.49%,n=9)、102.0%(RSD=0.48%,n=9)和95.8%(RSD=1.47%,n=9);定量限分别为5 ng/ml,1ng/ml,0.025μg/ml,0.05μg/ml。结论建立的方法灵敏准确,可有效地对米力农注射液的有关物质进行定量测定。