山东省禽源产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的分子流行病学分析

【目的】分析山东省禽源产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠杆菌的耐药情况、耐药机制、毒力基因、多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)、亲缘性和Inc型质粒,为禽临床合理使用抗菌药物防治此类细菌病提供参考。【方法】复苏2021年4月-2021年7月分离自山东省禽泄殖腔拭子样本中的38株产ESBLs大肠杆菌,采用微量肉汤稀释法测定其对16种抗菌药物的敏感性,通过全基因组测序检测其携带的耐药基因、毒力基因、MLST、Inc型质粒,使用Parsnp构建菌株系统发育树。【结果】药敏试验结果显示,所有菌株对氨苄西林、头孢噻呋和头孢他啶耐药,对磺胺异噁唑(97.4%)、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(94.7%)、四环素(89.5%)、氟苯尼考(86.8%)、大观霉素(84.2%)耐药严重。全基因组分析结果显示,38株产ESBLs大肠杆菌的blaCTX-M型中blaCTX-M-55基因携带率为34.2%,blaNDM型中blaNDM-5和blaNDM-4基因携带率分别为21.1%和10.5%,其携带大量介导临床中常用抗菌药物的耐药基因和黏附类、侵袭类、血清抗性、铁转运类毒力基因。MLST结果显示,ST10(13.2%)为产ESBLs大肠杆菌最流行的ST型,其次是ST616(10.5%)和ST746(10.5%)。系统发育树分析表明,ST10、ST616和ST746分别属于同一起源。Inc型质粒结果显示,IncFIB(AP001918)携带率最高(68.4%),其次为IncHI2(42.1%)。【结论】山东省禽源产ESBLs大肠杆菌耐药状况严峻,blaCTX-M基因是导致大肠杆菌对超广谱β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要原因,且该类菌株携带大量毒力基因,亟需对其加强监测。

山东省蛋鸡产蛋期安全用药情况的调研分析

基于对山东省鸡蛋兽药残留情况的调研,对蛋鸡产蛋期用药情况进行了现状分析,具体分析了蛋鸡产蛋期发病原因、用药和残留现状,探讨了影响蛋品质量安全的风险因素和问题,并针对性的提出了产蛋期安全用药的意见建议。为科学、正确、合理的使用兽药,规范蛋鸡养殖环节用药行为,降低鸡蛋中兽药残留风险,提供了有力的数据支撑和技术指导。

山东省畜禽屠宰行业现状及政策动向

本文在对山东省的畜禽屠宰企业的数量及生产状况进行分析的基础上,经过调研提出屠宰行业存在的问题,总结了有关屠宰行业的法律法规,点明了全省屠宰行业重点管理工作内容,以期为畜禽屠宰企业的规范发展提供参考。

高效液相色谱-串联质谱法测定配合饲料中土霉素、四环素、金霉素、多西环素的不确定度评估

试验旨在采用高效液相色谱-串联质谱法测定配合饲料中土霉素、四环素、金霉素、多西环素的含量,并进行不确定度的来源分析和评定。根据农业农村部第282号公告《饲料中土霉素、四环素、金霉素、多西环素的测定》,通过对样品称量、样品提取、标准溶液配制、仪器检测及标准曲线建立等主要因素进行考察,并建立数学模型,计算不同因素对药物检测时不确定度的影响。结果表明:标准溶液配制、标准曲线建立对检测不确定度的贡献较大,而样品称量对不确定度的影响较小,进一步得出合成不确定度和扩展不确定度。配合饲料中土霉素、四环素、金霉素、多西环素检测值分别为51.98、52.35、52.95、51.93μg·kg^(-1)时,其扩展不确定度分别为9.66、6.78、8.88、8.91μg·kg^(-1)(P=95%, k=2)。

高效液相色谱法同时测定兽药复方酮康唑软膏中的酮康唑和甲硝唑的含量

建立了同时测定兽药复方酮康唑软膏中酮康唑、甲硝唑含量的高效液相色谱(HPLC)法。采用C_(18)色谱柱,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,检测波长239 nm。结果表明,酮康唑和甲硝唑2种成分线性关系良好(r>0.999)。在3个不同浓度水平下酮康唑和甲硝唑平均加样回收率分别为97.8%和100.0%,溶液稳定性和方法重复性的RSD均小于1%。应用该方法对三个不同厂家的样品中两种成分的含量进行了测定,结果与《兽药质量标准》(2017年版)方法一致。本方法简便,可靠,专属性强,重现性好,为兽药复方酮康唑软膏的质量控制提供了技术支撑。

超高效液相色谱法测定原料药中泰地罗新的含量

本实验建立超高效液相色谱法(UPLC)测定泰地罗新原料药中泰地罗新及其异构体的含量。采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为0.05 mol/L磷酸氢二钾缓冲液(磷酸调pH值至8.2)-乙腈(45∶55),检测波长289 nm,流速0.5 mL/min,柱温:40℃,进样量:1μL。通过光谱图、保留时间和峰面积参数对泰地罗新进行定性、定量检测。泰地罗新在0.2-2.4 mg/mL的范围内呈良好的线性关系(R 2=0.9992);方法检测限为0.2 mg/mL,定量限为0.6 mg/mL;精密度、重复性、稳定性完全满足检测需求。该方法快速、准确、分离度好,可快速检测泰地罗新原料药中泰地罗新及其异构体的含量。

饲料生产许可现场审核常见问题与对策浅析

饲料是畜牧水产养殖重要的投入品,其数量和质量直接关系到养殖业的稳定发展及食品安全。目前,我国饲料生产行业在快速良性发展的同时,也存在诸如散、乱、差、非法添加违禁物质等现象,迫切需要严格行业准入门槛。本文对饲料生产企业材料申报、现场审核方面的常见问题进行阐述浅析,以《饲料质量安全管理规范》为依托,阐明解决对策,以期对企业申报及现场审核提供参考与借鉴。

饲料原料鸡油标准技术参数和检验方法的探讨

[目的]规范饲料原料鸡油的企业标准。[方法]通过查阅并参考动物油脂中食用猪油、食用动物油脂、工业用猪油的相关国家标准,对饲料原料鸡油的技术参数和检验方法进行探讨。[结果]可将水分及挥发物、丙二醛、酸价、总脂肪酸、过氧化值、不皂化物、不溶性杂质7个参数作为饲料原料鸡油企业标准的技术参数。测定方法建议引用GB 5009.236-2016《动植物油脂水分及挥发物的测定》方法、GB5009.181-2016《食品中丙二醛的测定》方法的第二法分光光度法、GB5009.229-2016 《食品中酸价的测定》方法的第三法热乙醇指示剂滴定法、GB/T21514-2008《饲料中脂肪酸含量的测定》、GB 5009.227-2016 《食品中过氧化值的测定》第一法滴定法、GB/T5535.1-2008/ISO3596:2000《动物油脂不皂化物测定》第1部分:乙醚提取法、GB/T 15688-2008《动植物油脂不溶性杂质含量的测定》。[结论]对饲料原料鸡油企业标准的技术参数和检验方法进行合理的设置,可为企业标准的制定提供科学的依据。

HPLC法同时测定三味拳参口服液中苦参碱和氧化苦参碱的含量

试验旨在建立利用高效液相色谱法(HPLC)同时测定三味拳参口服液中苦参碱和氧化苦参碱的含量。试验对比了3种氨基色谱柱(安捷伦ZORBAX NH_(2)、资生堂CAPCELL PAK NH_(2)、Waters SPHERSORB NH_(2))的检测效果。从分离效果角度考虑,优先使用安捷伦ZORBAX NH_(2),但其运行时间长;从节约时间和流动相等试剂角度考虑,推荐优先使用资生堂CAPCELL PAK NH_(2)色谱柱,次选Waters SPHERSORB NH_(2)色谱柱。三味拳参口服液经无水乙醇提取后,采用氨基色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,柱温35℃,检测波长220 nm。采用二极管阵列检测器进行分析,外标法进行定量测定。结果表明,在30~300 mg/L的范围内,苦参碱和氧化苦参碱线性关系良好(R>0.999 0),平均加样回收率为97.64%,变异系数为1.63%。系统适应性试验和色谱柱耐受性良好,完全能够满足检测的需求。研究表明,试验建立的方法具有操作简便、重复性好、稳定性高、准确性强等优点,可以用于三味拳参口服液中苦参碱和氧化苦参碱含量的准确检测。

挤压膨化生产小龙虾饲料加工工艺研究

本试验采用挤压膨化技术,以膨化度、密度、稳定性和糊化度为主要指标,研究小龙虾饲料挤压膨化加工工艺条件。结果表明:影响小龙虾饲料挤压膨化工艺的主要因素是挤压膨化温度,其次是螺杆转速,物料含水量影响最小。最佳工艺条件为物料含水量26%、螺杆转速200 r/min、挤压膨化温度105℃,在该工艺条件下生产的产品结构光滑质密,膨化度为1.42、密度为1.18 g/cm^(3)、稳定性为88.7%、糊化度为92.5%。

超高效液相色谱法测定原料药中加米霉素的含量

建立超高效液相色谱-光电二极管阵列法(UPLC-PDA)测定加米霉素原料中主成分加米霉素的含量,采用反相超高效液相色谱法对加米霉素进行色谱分离和快速定量测定。ACQUITY UPLCTMCSH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为分离柱,柱温:35℃;氨水(0.1:30)-乙腈为流动相(30∶70)进行等度洗脱;流速:0.45 mL/min;进样量:1μL;检测波长208 nm。通过光谱图、保留时间和峰面积参数对加米霉素进行定性、定量检测。加米霉素在80~1600μg/mL的范围内线性关系良好(R2=0.9996);方法检测限为40μg/mL,定量限为80μg/mL,系统适应性试验色谱柱耐受性良好,添加回收率99.80%,完全满足检测需求。研究建立的UPLC方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于加米霉素原料中主成分加米霉素含量的检测。

饲料中铬的测定前处理方法的探讨

按照现行有效的饲料中铬的测定方法GB/T13088-2006《饲料中铬的测定》方法1原子吸收光谱法测定饲料中的硌含量,发现有的样品因溶解不安全导致结果偏低。为了使饲料试样中的硌完全溶解出来,采用减少称样量、加大硝酸浓度及用量的方法进行试验,结果表明,该方法大大提高检测结果的准确性。

病死畜禽无害化处理设备的高效智能升级初探

随着我国畜禽养殖业的迅猛发展,规模化养殖发展迅速,已成为我国重要的支柱产业。山东省作为畜禽养殖业大省,养殖规模和实现产值均居全国首位。但是伴随着畜禽养殖规模的不断扩大,饲养量越来越多,受饲养管理水平低、饲料营养不均衡以及疫病防治技术等因素的影响,畜禽死淘率也相对较高。据统计,因疾病引起的死亡率,家禽为12%~20%、猪8%~12%、牛为2%~5%。

不同发酵条件对饲料固态发酵效果的影响

[目的]为研究不同发酵环境下饲料固态发酵效果的影响,优化发酵饲料固态发酵工艺。[方法]试验在室温10℃以下(平均室温5℃)分为温水启动发酵和冷水启动发酵2个组别,每个组别各2个重复;同时以常规标准发酵方法(在发酵房温度恒温30℃发酵7 d后转入室温)作为对照组。分别检测料温、水分、pH、乳酸、乙醇、活菌数及感官观察等。[结果]发酵15 d时,对照组的水分绝对增长值明显高于其他3组,温水发酵的提高2.06百分点;对照组的pH已降到5.48,温水发酵包内的pH为5.92,其他3组的均在6.1以上;对照组的乳酸含量为9.48 g/kg,其他3组的均低于2.5 g/kg。[结论]在低温情况下,温水启动发酵明显优于冷水启动发酵;无论是温水启动发酵还是冷水启动发酵,即使延长发酵时间,也无法达到设定出库标准。

碱溶液和纤维测定仪对粗纤维含量检测的影响研究

本实验采用滤袋法对不同厂家的玉米皮样品进行粗纤维含量检测,研究不同碱溶液和同种碱溶液的不同配制方法以及两种常见纤维测定仪对粗纤维检测结果的影响。结果表明:使用标定后的NaOH溶液和KOH溶液检测的数值接近,结果差异不显著(P>0.05)。同种碱溶液的浓度是否进行标定,对结果有一定影响,部分样品使用标定浓度NaOH溶液的检测数据较未标定浓度NaOH溶液检测数据分别提高9.5%、14.9%、15.7%(P<0.01)。部分样品使用标定浓度KOH溶液的检测数据较未标定浓度KOH溶液检测数据分别降低4.3%、4.5%(P<0.05)。纤维测定仪R和纤维测定仪A测得的样品粗纤维含量接近,结果差异不显著(P>0.05)。

丝兰提取物对断奶仔猪生长性能、养分消化率和粪便微生物的影响

试验旨在研究饲粮中添加丝兰提取物对断奶仔猪生长性能、养分消化率和粪便中微生物的影响,为丝兰提取物在猪饲料和养殖生产中的应用提供数据参考和应用依据。试验选取21日龄、体重为(7.00±0.20)kg的三元杂交断奶仔猪24头,随机分为2组,每组12头猪,试验组(YUCCA组)和对照组(CONT组)在同一猪舍内单栏饲养,CONT组饲喂基础日粮,YUCCA组在基础日粮的基础上添加丝兰提取物产品150 g·t^(-1),试验周期共28 d。结果表明:与CONT组相比,YUCCA组断奶仔猪的平均日增重(ADG)提高了8.81%,平均日采食量(ADFI)提高了5.59%,料重比(F/G)降低了4.52%,差异均显著(P<0.05);养分消化率方面,YUCCA组仔猪的总能比CONT组提高了1.79%,干物质提高了1.79%,粗蛋白和粗脂肪分别提高了2.82%和3.62%;CONT组与YUCCA组共享848个OTUs,而CONT组独有155个OTUs,YUCCA组独有214个OTUs,YUCCA组的OTUs更多;YUCCA组断奶仔猪肠道中微生物菌群种类更多更均匀。说明日粮中添加丝兰提取物显著提高了断奶仔猪的生长性能和养分消化率,同时提高了粪便中微生物的丰度和均匀度,为丝兰提取物在仔猪中的应用提供了数据支撑。

超高效液相色谱-二极管阵列检测器法确证银黄提取物注射液中非法添加物

目的确证1批银黄提取物注射液中的非法添加物。方法采用超高效液相色谱法,二极管阵列检测器,ACQUITYUPLC^(TM)T_(3)色谱柱(2.1mm×100mm,1.8μm)为分离柱,柱温:40℃;以乙腈(0.1%磷酸)-水(0.1%磷酸)进行梯度洗脱;流速:0.35 mL/min;进样量:1μL;波长扫描范围190~400 nm,检测波长为276 nm。结果土霉素、双氯芬酸钠的检出限分别是22.4、7.3 mg/mL,色谱保留时间分别为3.7 min、8.3 min左右,多次进样各自的保留时间相差不超过±0.1 min;土霉素在269 nm处有紫外最大吸收,双氯芬酸钠在276 nm处有紫外最大吸收;分离度远大于1.5,满足要求,纯度角和纯度阈值均满足要求,系统适应性良好;对比色谱图保留时间和光谱图的峰形结果,最终确证该批样品中非法添加物为土霉素和双氯芬酸钠。结论本确证方法精准快捷、经济环保,能监管本批次标称为银黄提取物注射液的质量。

香菇多糖的免疫调节机制及其在畜禽养殖生产中的应用研究进展

香菇多糖(Lentinan,LNT),是在香菇子实体中分离提取的活性成分,具有免疫增强效果,具有抗肿瘤、抗病毒和抗细菌等生物学功能,本文综述了香菇多糖的结构、理化性质和免疫调节机理,以及在畜禽养殖生产中的应用研究等方面,以期为香菇多糖在畜禽养殖生产中的开发应用提供新思路。

利用微生物巢处理畜禽粪水资源化利用的技术及工艺

微生物巢畜禽粪水处理技术是以养殖场高浓度粪水为处理对象,在养殖场外建设发酵池,在池内铺设垫料,按比例添加微生物菌剂,制成消纳粪水的微生物反应堆,喷淋粪水,利用翻抛机翻抛好氧发酵,反应堆失活后可作为制作生物有机肥的础料,实现了粪水的零排放和资源化循环利用。本文就该技术的工艺流程、菌种、垫料选择以及运行管理等方面进行了全面总结和概述。

UPLC-PDA法测定龙胆泻肝散中3种主要成分的含量

本试验采用UPLC-PDA法对黄芩苷、栀子苷和龙胆苦苷进行色谱分离和快速定量测定,以ACQUITY UPLCTM CSHC18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为分离柱,柱温35℃;以甲醇-水(0.1%磷酸)进行梯度洗脱;流速:0.35 mL/min;进样量:1μL;检测波长为254 nm;通过保留时间、光谱图和峰面积等参数对3种主要成分进行定性鉴别和定量检测,建立超高效液相色谱(UPLC-PDA)测定龙胆泻肝散中主成分黄芩苷、龙胆苦苷和栀子苷的含量。试验结果显示:每1 mL含龙胆苦苷8μg、栀子苷5μg和黄芩苷10μg的对照品溶液信噪比≥3为检出限,每1 mL含龙胆苦苷16μg、栀子苷10μg和黄芩苷20μg的对照品溶液信噪比≥10为定量限,完全满足检测需求。该方法前处理简单,目标物理论塔板数高,色谱分离度好,分析速度较快,节省时间,适用于龙胆泻肝散中3种主成分的定性鉴别和含量检测。