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2002
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理学
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蜜蜂NADPH-细胞色素P450还原酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学特性分析
1
作者
武雪龙
杨晓慧
+1 位作者
汪俊卿
王瑞明
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期28-35,共8页
10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)是蜂王浆中的主要脂肪酸成分,具有抗菌、抗癌、延缓衰老等多种生理活性,但目前关于10-HDA生物合成的分子机制还不清楚。通过克隆蜜蜂NADPH-细胞色素P450还原酶(EC 1.6.2.4,NADPH-cytochrome P450 reductase,CP...
10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)是蜂王浆中的主要脂肪酸成分,具有抗菌、抗癌、延缓衰老等多种生理活性,但目前关于10-HDA生物合成的分子机制还不清楚。通过克隆蜜蜂NADPH-细胞色素P450还原酶(EC 1.6.2.4,NADPH-cytochrome P450 reductase,CPR),在大肠杆菌中异源表达,并对其酶学特性进行分析。结果表明重组菌经IPTG诱导后表达蛋白的分子量与预期一致,为86.29 kDa,Ni-NTA亲和纯化后测得其比活性为77.33(EU of CPR)/μg。酶学性质分析结果表明蜜蜂CPR酶最适温度与pH分别为40℃和8.0,并对一些金属离子及有机溶剂具有不同程度的耐受性。其对底物细胞色素C的动力学参数Km和kcat分别为76μM和268/min。以上研究为探究CPR在10-HDA生物合成途径中的功能奠定理论基础。
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关键词
NADPH-细胞色素P450还原酶
大肠杆菌
异源表达
酶学特性
原文传递
题名
蜜蜂NADPH-细胞色素P450还原酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学特性分析
1
作者
武雪龙
杨晓慧
汪俊卿
王瑞明
机构
山东省齐鲁工业大学生物工程学院
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期28-35,共8页
基金
国家自然科学基金(31201281
31171727)
山东省自主创新及成果转化专项(201422CX02602)资助项目
文摘
10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)是蜂王浆中的主要脂肪酸成分,具有抗菌、抗癌、延缓衰老等多种生理活性,但目前关于10-HDA生物合成的分子机制还不清楚。通过克隆蜜蜂NADPH-细胞色素P450还原酶(EC 1.6.2.4,NADPH-cytochrome P450 reductase,CPR),在大肠杆菌中异源表达,并对其酶学特性进行分析。结果表明重组菌经IPTG诱导后表达蛋白的分子量与预期一致,为86.29 kDa,Ni-NTA亲和纯化后测得其比活性为77.33(EU of CPR)/μg。酶学性质分析结果表明蜜蜂CPR酶最适温度与pH分别为40℃和8.0,并对一些金属离子及有机溶剂具有不同程度的耐受性。其对底物细胞色素C的动力学参数Km和kcat分别为76μM和268/min。以上研究为探究CPR在10-HDA生物合成途径中的功能奠定理论基础。
关键词
NADPH-细胞色素P450还原酶
大肠杆菌
异源表达
酶学特性
Keywords
NADPH-cytochrome P450 reductase
Escherichia coli
Heterologous expression
Enzymatic properties
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蜜蜂NADPH-细胞色素P450还原酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学特性分析
武雪龙
杨晓慧
汪俊卿
王瑞明
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
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