弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血循环肿瘤细胞中不同蛋白表达水平及其对复发的预测效能分析

目的分析弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血循环肿瘤细胞(CTC)中分化抗原47(CD47)、信号调节蛋白α(SIRP-α)、原癌基因(MYC)和增殖细胞相关抗原(Ki67)蛋白表达水平及其对肿瘤复发的预测效能。方法回顾性分析2018年1月至2021年1月山东省临沂市人民医院血液科收治的82例弥漫大B细胞淋巴瘤患者临床资料,均经组织病理学确诊,且接受化疗后缓解。其中男44例,女38例,年龄50~75(63.8±4.6)岁。根据患者缓解后1年内复发情况分为复发组(n=36)和未复发组(n=46)。采集患者晨起空腹外周静脉血4 ml,分离CTC,采用Western印迹法检测CTC中CD47、SIRP-α、MYC及Ki67蛋白表达水平。CD47表达水平与SIRP-α、MYC和Ki67表达水平的相关性采用Pearson相关性分析。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估CD47、SIRP-α、MYC和Ki67表达水平对肿瘤复发的预测效能,并计算曲线下面积(AUC)。结果复发组患者CD47、SIRP-α、MYC、Ki67蛋白表达水平分别为2.24±0.23、1.17±0.12、1.98±0.20、2.63±0.27,未复发组分别为2.04±0.21、1.31±0.13、1.53±0.16、2.24±0.25,复发组患者CD47、MYC和Ki67表达水平高于未复发组,SIRP-α表达水平低于未复发组(均P<0.001)。82例患者中,CD47、SIRP-α、MYC和Ki67表达水平分别为2.13±0.22、1.25±0.13、1.73±0.18、2.41±0.26,CD47表达水平与SIRP-α表达水平呈负相关(r=-0.308,P=0.005),与MYC、Ki67表达水平呈正相关(r=0.484、0.332,P=0.012、0.003)。CD47、SIRP-α、MYC和Ki67表达水平预测弥漫大B细胞淋巴瘤复发的灵敏度分别为66.7%、72.2%、72.2%、66.7%,特异度分别为67.4%、71.7%、67.4%、71.7%,AUC(95%CI)分别为0.694(0.582~0.791)、0.693(0582~0.790)、0.714(0.603~0.808)、0.709(0.598~0.804);联合检测上述4项指标的灵敏度为83.3%,特异度为78.3%,AUC(95%CI)为0.864(0.771~0.930),均高于各指标单独检测(均P<0.05)。结论CD47表达水平与SIRP-α表达水平呈负相关,与MYC、Ki67表达水平呈正相关。CD47、SIRP-α、MYC和Ki67表达水平对弥漫大B细胞淋巴瘤患者复发均具有一定的预测价值,联合检测的预测效能高于单项指标检测。

乳腺癌新辅助化疗后骨髓抑制患者外周血miR-211-5p的表达及其对Notch信号通路的调控机制

目的探讨乳腺癌新辅助化疗后骨髓抑制患者外周血miR-211-5p的表达及其通过靶向环氧化酶2(COX2)基因对Notch信号通路的调控机制。方法纳入2018年1月至2021年1月在临沂市人民医院首次就诊并接受新辅助化疗的185例乳腺癌患者作为研究对象。使用定量实时聚合酶联反应测量miR-211-5p、COX2基因和Notch信号通路相关基因(Notch1、Jagged1和Hes1)mRNA的表达水平。分别将miR-211-5p mimic、inhibitor、mimic NC和inhibitor NC转染SD大鼠骨髓间充质干细胞中,48 h后检测miR-10a-3p和COX2基因的mRNA表达量和Notch信号通路相关基因蛋白表达水平。结果严重骨髓抑制患者的miR-211-5p相对表达量为(2.41±0.32),显著高于轻度骨髓抑制患者的miR-211-5p相对表达量(1.53±0.18)(t=6.39,P<0.001);严重骨髓抑制患者的COX2基因mRNA相对表达量为(3.64±0.74),显著低于轻度骨髓抑制患者的COX2基因mRNA相对表达量(5.37±1.02)(t=7.47,P<0.001)。在严重骨髓抑制患者中,miR-211-5p和COX2基因mRNA水平呈显著负相关关系(r=-0.70,P=0.006)。双荧光素酶报告实验结果证实COX2是miR-211-5p的靶基因。严重骨髓抑制患者外周血Notch信号通路相关基因Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA相对表达量分别为(2.35±0.41),(2.76±0.46)和(3.04±0.52),显著低于轻度骨髓抑制患者(4.12±0.63),(4.53±0.58)和(5.12±0.67)(t=5.37、6.11、6.14,P均<0.001)。使用miR-211-5p模拟物和抑制物转染SD大鼠骨髓间充质干细胞后,mimic组的miR-211-5p相对表达量为(3.46±0.49),显著高于mimic NC组(2.24±0.32)、inhibitor组(1.28±0.19)和inhibitor NC组(2.33±0.37)(P<0.001),而inhibitor组的miR-211-5p相对表达量均显著低于其他3组(P<0.001)。mimic组的COX2基因mRNA表达量为(2.73±0.36),显著低于mimic NC组(4.05±0.59)、inhibitor组(6.15±0.86)和inhibitor NC组(4.18±0.65)(P<0.001),而inhibitor组的COX2基因mRNA表达量均显著高于其他3组(P<0.001)。inhibitor组的Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达显著升高,而mimic组的Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达显著降低。结论乳腺癌新辅助化疗后严重骨髓抑制患者外周血miR-211-5p的表达水平显著升高,且通过靶向下调COX2基因表达水平抑制Notch信号通路。