喷施外源γ-氨基丁酸对低温下甜玉米的影响

玉米是一种喜高温的农作物,其种植时间和范围都会受温度的影响,为探索外源喷施γ-氨基丁酸(GABA)对低温下甜玉米的影响,以甜玉米为实验材料,于三叶期分别采用不同浓度的γ-氨基丁酸喷施植株叶面后,将幼苗进行低温(10℃)处理,研究了幼苗在低温胁迫下的变化情况。结果显示:喷施外源γ-氨基丁酸可以一定程度上提高甜玉米对低温的耐受性,最佳浓度为30μg/mL;喷施外源γ-氨基丁酸可使甜玉米细胞内的可溶性蛋白的含量、游离脯氨酸的含量显著性的升高,丙二醛的含量下降,并且能够使甜玉米中与抗寒胁迫相关的基因如磷脂酶DDLK1(ZmPLD delta-like)、脱水反应结合因子(ZmDREB1 factor)和脱水反应结合蛋白(ZmDBP1b)表达量上调。此研究结果可以为γ-氨基丁酸在提高甜玉米耐寒性的应用提供一定的依据。

以交联透明质酸钠为支架体外构建组织工程软骨

背景:采用组织工程技术再生和重建软骨是目前修复软骨组织缺损效果最好、最有应用前景的方法。目的:以体外培养的软骨细胞和交联透明质酸钠为支架材料,开发一套体外构建组织工程软骨的完整方案。方法:分离新西兰兔膝关节软骨细胞,制成细胞悬液滴加于交联透明质酸钠支架上,体外复合培养21 d,提取RNA进行RT-PCR检测,制备冰冻切片进行显微观察和免疫组织化学观察。结果与结论:软骨细胞接种于交联透明质酸钠支架材料后,可贴附于支架上生长,并且大量细胞聚集成团,在支架材料的纤维间隙中生长或呈单层细胞附着于支架材料纤维。细胞-支架复合物表达软骨组织特异性蛋白聚糖基因和Ⅱ型胶原α1基因,以及软骨组织特异性蛋白Ⅱ型胶原蛋白,可维持软骨细胞表型。表明培养的细胞-支架复合物在体外培养可形成软骨细胞外基质,有望获得组织工程软骨组织。

顶空气相色谱法测定布南色林残留溶剂的含量

摘要：目的建立气相色谱法测定布南色林中残留溶剂含量的方法。方法采用6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱（DB-624，0．53mm×30m，3．0μm），程序升温，初始温度50℃，保持5min，以20℃／min的速率升温至200℃，保持5min；氢火焰离子化检测器（FID），检测器温度250℃，进样口温度220℃，载气为氮气，流速2mL／min，进样体积1mL。外标法计算残留溶剂的含量。结果5种有机溶剂进样浓度与峰面积呈良好线性关系，相关系数均大于0．9990，加样回收率在97．6％～102．9％之间。结论此法准确可靠，灵敏度高，可用于布南色林中残留溶剂的测定。

柱前衍生化法测定莫西沙星小环的对映异构体

目的建立柱前衍生化法测定莫西沙星小环对映异构体的方法。方法采用Symmetry C18（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱，流动相为甲醇-水（60：40），柱温为35℃；衍生试剂为2，3，4，6．四乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯，检测波长为252nm。结果莫西沙星小环对映体衍生物获得了基线分离，并确认了R，R-衍生物的色谱峰；浓度1．44～72mg／L范围内与峰面积呈线性关系，回归方程为A=34801C-6472（r=0．9999）。结论所建方法简便、快速，可用于莫西沙星小环对映异构体的拆分。

玻璃酸治疗骨关节炎的研究进展

骨关节炎(OA)是中老年人常见的慢性病,其发病率逐年增加。临床采用补充外源性玻璃酸(HA)的方法治疗OA已取得显著疗效。此文对近年来HA治疗OA的作用机制、HA相关制剂产品及其临床应用的最新研究进展进行综述。

RP-HPLC测定替比培南酯中聚合物含量

目的建立RP-HPLC测定替比培南酯中聚合物含量的方法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(WatersXBridge C18,5μm,4.6 mm×250 mm),柱温为40℃;以0.025 mol/L磷酸二氢钠溶液(用1 mol/L氢氧化钠溶液调pH为6.0)-乙腈(50:50)为流动相,流速1.0 mL/min;检测波长220 nm,进样量10μL。结果替比培南酯对照液浓度在5.84～13.63μg/mL范围内具有良好的线性关系(r=0.9992);对照溶液在24 h内稳定;对照溶液精密度RSD为0.45%;定量限为0.58μg/mL;最低检出限为0.17μg/mL;重复性试验显示本方法重复性良好。结论此法灵敏度高,操作简便,准确可靠,可用于替比培南酯中聚合物含量的测定。

食品工业特种糖D——核糖

D-核糖是核酸的组成成分,可以广泛用于食品添加剂和医药工业领域。近年来的科学研究表明,D-核糖具有重要的生理功能。如核糖具有护心、养心功能,能缓解心血管疾病如高血压、冠心病造成的心脏受损的病情[1]。D-核糖还可用于治疗运动引起的肌肉酸痛。

2009年我国生化药物临床应用进展

根据2009年相关文献,介绍中国药典2010年版中的生化药物在临床方面的应用进展。

硅烷化玻璃酸酯在皮肤抗皱剂中细胞水平的功能研究

硅烷化玻璃酸酯复合物(silanol hyaluronate compound,SHAC)是一种透明质酸衍生物。类人胶原和肌肽是当前市场上主流的抗皱成分。本研究将SHAC用于皮肤抗皱剂中,研究其对成纤维细胞的影响。SHAC分别与类人胶原和肌肽复配,作用于体外培养的L929细胞,检测正常细胞的增殖活性和UVB损伤细胞的修复能力。结果表明:(1)肌肽能促进L929细胞的增殖,具有抑制UVB照射细胞引起的氧化损伤的能力。类人胶原蛋白没有明显效果。(2)SHAC分别与类人胶原、肌肽制备复配制剂,均能够显著促进细胞的增殖,抑制UVB照射引起的细胞损伤。SHAC能增强类人胶原和肌肽的功效,在开发皮肤抗皱功能的产品领域前景良好。

肝素在组织工程研究中的应用进展

近年来随着组织工程的迅速发展,肝素在组织工程研究中的应用越来越值得关注。肝素及其衍生物作为组织工程支架材料的成分之一,不仅赋予支架抗凝血、减少血栓的特点,而且可以改善支架的生物相容性和促进种子细胞的黏附、增殖和分化,另外还可作为细胞因子的储库和缓释载体,在组织构建过程中进一步促进种子细胞的增殖、分化和维持细胞表型,为组织的再生创造必要条件。我们对肝素在血管、肝脏、神经、皮肤、骨和软骨等组织工程领域中的应用研究进行了综述。

高职院校和高职生如何联合破解“就业难”迷局

目前,由于多种原因共同导致的"招工难"和"就业难"的迷局影响着高职毕业生的就业与择业,面对日益激烈的就业竞争形势,企业对高职生也提出了更高的要求。本文分别从高职院校和高职毕业生自身的角度出发,探讨了如何在新的就业形势下,全方位提高毕业生素质,以满足企业的需要。

2012年我国生化药物临床应用进展

根据2012年相关文献,介绍我国2012年生化药物在临床方面的应用进展。

γ-聚谷氨酸体外抗氧化性及抑制透明质酸酶活性的研究

目的考察γ-聚谷氨酸体外抗氧化活性及对透明质酸酶的抑制活性。方法利用DPPH法测定高相对分子质量(Mr)(140万)和低Mr(10万)γ-聚谷氨酸的DPPH自由基清除率曲线,以IC_(50)值作为评价试样清除DPPH自由基能力的指标,并与抗氧化剂Vc磷酸酯镁和α-熊果苷比较,评价两种Mrγ-聚谷氨酸的抗氧化性;同时利用DNS法测定以上两种M_r的γ-聚谷氨酸对透明质酸酶的抑制活性。结果 140万Mrγ-聚谷氨酸清除DPPH自由基的IC_(50)值为25.5 mg/mL,略优于10万Mrγ-聚谷氨酸(IC_(50) 30.5 mg/mL)。两者清除自由基的效果约为Vc磷酸酯镁(IC_(50) 13 mg/mL)的一半,低于α-熊果苷(IC_(50) 0.016 mg/mL);另外,两种M_rγ-聚谷氨酸在低浓度(0.008%)条件下即可抑制约50%透明质酸酶活性,且其抑制率呈浓度依赖性。结论γ-聚谷氨酸是一种优良的化妆品原料,除具有超强的保湿作用之外,还具有中等程度的抗氧化活性及良好的透明质酸酶抑制活性,表明其在功能性化妆品中具有广阔的应用前景。

AMH检测技术研究进展

抗缪勒氏管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)因其检测不受月经周期及激素避孕药的影响,近年广泛应用于卵巢储备功能的评价、绝经年龄的预测、卵巢相关疾病的诊断、儿童性别发育异常的诊断及辅助生殖技术(ART)。AMH检测技术的发展日新月异,从最早的免疫细胞化学分析及放射免疫分析技术(RIA),再到酶联免疫吸附测定技术(ELISA),目前已经发展到全自动AMH检测技术。本文主要从AMH检测技术的发展及不同阶段技术的比较、优缺点等方面予以综述。

一株产耐热耐碱木聚糖酶菌株的筛选及酶学性质研究

目的对分离得到的一株产耐热耐碱木聚糖酶细菌ZH-07进行鉴定,并对其产木聚糖酶进行酶学性质分析。方法根据培养基上透明圈大小筛选产酶量高的菌株,通过菌落形态、生理生化特征及16S rDNA序列同源性比对等分析鉴定菌株种属。并通过一系列单因素试验、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和薄层色谱(TLC)进行酶学性质研究。结果 ZH-07菌株鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。该菌能以农业废弃物玉米芯为碳源,液体发酵产耐热耐碱木聚糖酶,50℃培养36 h,木聚糖酶的最高酶活性达1664.9 U/m L;木聚糖酶的相对分子质量(Mr)约24×10~3,无纤维素酶活性;酶促反应最适温度为70℃,最适pH 10,70℃、pH 10处理3 h仍保持64.7%的活性。结论 Bacillus subtilis ZH-07产木聚糖酶有较好的热稳定性和碱稳定性,在低聚木糖工业生产中有巨大应用潜力。

雷帕霉素在肿瘤治疗方面研究进展

雷帕霉素(RAPA)在肿瘤治疗方面的研究及应用日益增多,单独应用或联合用药在体外、体内均表现显著的抗肿瘤效果。RAPA通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)受体,影响其转导的多种信号通路,从而发挥抗血管生成、阻滞细胞周期和促进细胞凋亡等多种作用,对肿瘤的增殖、侵袭和转移等过程产生影响。本文综述RAPA在不同肿瘤治疗方面的研究进展,为其在生物医药领域进一步应用提供新方法和新思路。

NP-HPLC分离测定1-[3,5-双(三氟甲基)苯基]乙醇对映异构体

目的研究1-[3,5-双(三氟甲基)苯基]乙醇对映异构体分离测定的方法。方法采用CHIRALPAK AD-3(0.46cm×15 cm,5μm)色谱柱,以正己烷-异丙醇(200:1)为流动相,流速0.5 mL/min,柱温25℃。结果采用本方法能完全分离对映异构体,灵敏方便,检出限为0.2011μg/mL,约为供试品溶液浓度的0.04%,供试品溶液在12 h内稳定。结论本方法简单,专属性强,可有效控制1-[3,5-双(三氟甲基)苯基]乙醇中对映异构体含量。

左金丸方药3种方法提取液的初步药效学比较

目的观察左金丸方药的3种提取液的抑菌、抗炎作用。方法分别制备左金丸的水提取液(WE液)、60%乙醇提取液(AE液)和半仿生提取液(SBE液),采用抑菌环实验和二甲苯致小鼠耳肿胀法分别评价左金丸的AE液、SBE液、WE液的抑菌、抗炎的药效作用。结果左金丸提取液对金黄色葡萄球菌的抑制作用强于大肠杆菌,抑菌环的大小顺序为:SBE液>WE液>AE液。左金丸提取液对二甲苯致小鼠耳肿胀有显著抑制作用,肿胀抑制率大小顺序为:SBE液>WE液>AE液。结论左金丸方药的3种提取液的抑菌、抗炎作用大小顺序为:SBE液>WE液>AE液。

细菌透明质酸酶基因工程菌的构建及高效表达

目的将兽疫链球菌透明质酸酶hyl基因在大肠杆菌原核表达系统中高效分泌表达。方法通过PCR方法扩增得兽疫链球菌hyl基因,Xho I和Nco I双酶切后,连入表达载体pET26b(+),并转化入大肠杆菌,经低温异丙基-β-D-硫代半乳糖苷或乳糖诱导表达,DNS法检测胞外透明质酸酶活性。结果成功构建含兽疫链球菌透明质酸酶基因hyl的大肠杆菌基因工程菌株,经IPTG诱导并添加甘氨酸后胞外透明质酸酶活性高达5.3×104 U/mL。结论实现了透明质酸酶在原核系统中的表达,为工业化生产奠定了基础,具有很好的市场前景。

α-环糊精葡萄糖基转移酶的高效表达及酶法制备AA-2G条件优化

目的构建分泌表达α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-Cyclodextrin Glycosyltransferase,α-CGTase)的重组菌株,并利用该酶液制备AA-2G。方法经PCR扩增浸麻芽孢杆菌154基因组获得α-CGTase基因序列,将该基因序列和p ET26b载体分别经Nco I、Xho I双酶切后用T4 DNA连接酶连接,并转化大肠杆菌BL21。利用发酵培养基分泌表达α-CGTase,利用该酶和淀粉糊精、维生素C反应制备AA-2G,并进行制备条件优化。结果在大肠杆菌中实现了α-CGTase的胞外分泌表达,胞外环化酶活力达到120 U/m L,利用该酶的转糖基反应将淀粉糊精、维生素C转化为AA-2G,经HPLC检测正确。结论利用自制α-CGTase得到了AA-2G,通过制备条件优化AA-2G产量为17.46 g/L,转化率达到58.2%(mg/mg)。