2013-2022年镇江市土源性线虫病监测分析

目的了解镇江市人群土源性线虫病感染状况,为制定防控措施提供科学依据。方法2013—2022年以镇江市辖区内≥3周岁的常住居民及在本地居住满1年以上的外来人口作为监测对象,采集其粪便标本,采用改良加藤厚涂片法检测土源性线虫虫卵,12周岁及以下儿童采用透明胶纸肛拭法加做蛲虫检测。结果2013—2022年累计粪检102470人次,检出土源性线虫感染者175人,平均感染率为0.17%,感染率从2013年的0.39%降至2022年的0.12%,呈现下降趋势(χ_(趋势)^(2)=63.68,P<0.05);下辖各市(区)中句容市感染率最高(0.53%),京口区最低(0.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=254.54,P<0.05)。感染以轻度、单虫感染为主,轻度感染159例,占比90.86%,中度感染15例,占比8.57%,重度感染1例,占比0.57%;单虫种感染173例,感染率0.16%,占比98.86%,同时感染两种虫种2例,占比1.14%,未发现同时感染3种及以上者。感染虫种,以蛔虫感染占比最高,为54.86%(96/175),感染率为0.09%;钩虫占比35.43%(62/175),感染率0.06%;鞭虫占比9.71%(17/175),感染率0.02%。蛲虫累计检查23001名儿童,检出感染者21例,平均感染率为0.09%,2013年感染率最高,为0.23%,2022年为0.13%,相比下降43.48%。结论镇江市土源性线虫病和蛲虫病均处于低流行水平,今后工作重点应放在巩固已取得的寄生虫病防治成果上。

盐胁迫下外源一氧化氮对罗布麻叶片中黄酮类物质合成的影响

本研究以一氧化氮(NO)为供体,在盐胁迫条件下研究其对罗布麻叶片生长、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性、黄酮类化合物合成的影响。结果表明:在150 mmol/LNaCl胁迫下,施用250μmol/LSNP可显著提高罗布麻叶片PAL活性、黄酮类化合物含量;NO清除剂血红蛋白(hemoglobin)可抑制盐胁迫下SNP对罗布麻叶片PAL活性、黄酮类化合物合成的促进作用,说明SNP是通过其分解产物NO影响这些物质的合成。推测在NaCl胁迫下,NO通过促进罗布麻黄酮类物质等次生代谢产物的合成来缓解NaCl胁迫对罗布麻的伤害。

肌层浸润性膀胱癌分子分型研究进展

肌层浸润性膀胱癌(MIBC)具有异质性高、侵袭性强、复发率高、预后差的特点。目前对于MIBC的标准治疗是新辅助化疗后行根治性膀胱切除术,但是患者对化疗的敏感性个体差异较大,临床上常无法预测对化疗具有临床获益的患者。近年来,随着新型药物尤其是以免疫检查点抑制剂为代表的免疫疗法越来越多应用于MIBC治疗,其分子分型在预测药物疗效及患者预后、指导临床精准诊疗中发挥了较大的作用。因此,本文从MIBC分子特征及7种分子分型(UNC分型、MDA分型、癌症基因组图谱分型、Lund分型、Bold分型、基于NAC反应的分子分型、基于共识的MIBC分子分型)展开,对MIBC分子分型研究进展作一综述。

生物制药专业微生物学研究性实验教学的探索

山东第一医科大学生物制药专业学生开设了以“植物内生菌资源的开发利用”为主题的研究性实验,以培养学生的创新能力,提高学生的综合素质。从校园或泰山上采集植物样品,分离、鉴定并保藏其中的内生细菌、放线菌和霉菌,学习微生物的纯培养、显微观察、菌种保藏等各项基本操作技术。在引申实验中融入了分子生物学研究方法以及生物化学的研究方法。实验以植物内生菌为研究对象,使对学生的培养从大众化的共性培养转变为个性化的培养。

中华白玉蜗牛来源糖胺聚糖的提取、分离及其抗氧化活性分析

糖胺聚糖是一种重要的药用活性寡糖,由于蜗牛糖胺聚糖的提取工艺尚不发达,使得蜗牛糖胺聚糖提取物中具有药理活性的有效结构仍不清楚,本文通过优化糖胺聚糖提取工艺,利用化学酶法联合丙酮循环脱脂工艺,经乙醇沉淀从蜗牛不同组织中提取糖胺聚糖,通过咔唑反应对蜗牛肌肉、内脏及黏液中的糖胺聚糖进行定量分析,结果显示,蜗牛肌肉、内脏及黏液中的糖胺聚糖提取率分别为0􀆰776%,1.961%和0.573%,二糖组分分析显示,蜗牛二糖组成以ΔUA2S-GlcNAc为主(98%),并有少量ΔUA2S-GlcNS存在。生物活性分析表明,从蜗牛肌肉、内脏和黏液中提取的糖胺聚糖均具有较高的抗氧化活性。其中,10 mg·mL^(-1)蜗牛黏液糖胺聚糖的总抗氧化能力(T-AOC)最高,为0.6064μmol·mL^(-1),其DPPH·自由基清除率也最高,为64.15%。本研究为蜗牛来源药用糖胺聚糖活性寡糖的制备分析提供研究基础。

基于细胞生物学技术培养医学研究生科研创新能力

创新是一个民族的灵魂,也是国家发展的不竭动力。创新人才培养是时代赋予高等学校的根本任务和历史使命。基于研究生细胞生物学技术课程,通过近年来的教学实践,立足教学方法多元化和教学内容的优化整合,在教育教学的各个环节渗入创新元素,力求培养具有科研创新能力的医学研究生。

白花丹参Cu/Zn SOD基因的克隆和表达分析

目的:获取白花丹参Cu/Zn SOD基因的全长cDNA序列,并分析其序列特征和不同外源胁迫下的表达特征。方法:利用已有白花丹参cDNA全长文库,随机测序获得SmCu/Zn SOD全长序列。BLAST进行序列比对,Motif Scan软件分析氨基酸序列的功能区段,RT-PCR技术分析基因表达特征。结果:获得ORF为459 bp的SmCu/Zn SOD全长cDNA序列,编码氨基酸152个,氨基酸序列分析发现其具有典型的Cu/Zn SOD PROSITE pattern,RT-PCR分析其在叶片中表达量最高。水分亏缺、盐胁迫、低温和ABA处理均能较强的诱导该基因的表达。结论:本研究首次获得白花丹参Cu/Zn SOD全长基因序列,该基因可能参与对干旱、盐碱和低温等非生物胁迫的抵抗。

烟草黑胫病拮抗菌的筛选、鉴定及发酵条件优化

为获得对烟草黑胫病(tobacco black shank)具有较好拮抗作用的菌株,从食腐昆虫美洲大蠊Periplaneta americana肠道分离纯化得到1株对烟草黑胫病具有较强抑制作用的D5-8菌株,拟进一步明确该菌株的分类地位,优化其发酵条件并测定其对烟草黑胫病的防治效果。利用形态特征、生理生化特性观察及16S rRNA基因序列分析对D5-8菌株进行鉴定;以细菌发酵液OD600值及对病原菌的抑制率为指标,对其发酵培养基和发酵条件进行单因素试验及正交试验;通过室内盆栽试验,明确菌株D5-8对烟草黑胫病的防治效果。结果表明,经平板对峙试验发现菌株D5-8对烟草寄生疫霉的抑制率达66.80%;通过形态特征和生理生化特征初步确定菌株D5-8为芽胞杆菌属Bacillus,结合16S rRNA基因序列分析鉴定菌株D5-8为特基拉芽胞杆菌Bacillus tequilensis;其最适培养基:牛肉浸膏8 g,酵母浸粉5 g,麦芽糖10 g,蒸馏水1000 mL;最佳的发酵条件为温度28℃、初始pH 6、转速210 r/min、装液量30 mL、接种量2%、培养时间60 h、光照时间4 h;盆栽试验结果表明,发酵条件优化后D5-8发酵液(10^(8) cfu/mL)对烟草黑胫病的保护防效和治疗防效可达66.89%和53.72%,均高于原始发酵液的61.84%和51.83%。研究结果为特基拉芽胞杆菌D5-8生防菌剂的开发及其对烟草黑胫病的防治应用提供了理论依据。

一株烟草黑胫病拮抗菌Y12的鉴定及发酵条件优化

本试验通过形态学特征、生理生化特征及16S rRNA基因序列分析,对从美洲大蠊肠道内分离出的烟草疫霉拮抗菌Y12菌株进行鉴定;采用分光光度法测定菌悬液在600 nm处的OD值以判断其生长状况并确定最适发酵条件。结果表明,Y12菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。其最适培养基为:牛肉浸膏8.0 g,酵母浸粉5.0 g,葡萄糖10.0 g,琼脂15.0 g,加蒸馏水至1 L;最适发酵条件为:温度28℃、初始pH=7、装液量20 mL、发酵时间60 h、转速220 r/min、光照时间8 h/d、接菌量0.10%。采用最佳发酵条件进行Y12的培养,可明显提高菌株的发酵速率,为后续利用Y12菌株进行生物防治提供了理论依据。

基于新冠肺炎疫情背景下学生对翻转课堂+慕课线上教学方法满意度分析

学生对教学的满意度是教学质量的重要反映,也是学生学习效果以及持续学习意愿的重要影响因素。通过问卷星平台收集在疫情期间医学遗传学课程翻转课堂+慕课线上教学方法的教学满意度情况,发现学生对翻转课堂+慕课的线上教学方法满意度总体情况高于单纯用录播+QQ或微信答疑教学方法。文章讨论了该教学方法的优势,为后疫情时代促进教学改革提供理论参考。

QQ群在医学细胞生物学教学中的应用

医学细胞生物学是我校临床医学、口腔医学本科等专业的一门重要的专业必修课程。该课程知识点零散且抽象,仅利用课堂时间开展教学已不能满足学生的需求。将QQ群运用在医学细胞生物学教学过程中,可以打破时间局限,培养学生的自学能力、强化师生间交流,从而有效提高了教学质量。

马陆肠道细菌对普通卷甲虫活动和取食的影响

目的探究马陆肠道细菌对普通卷甲虫取食和活动的影响,进而筛选普通卷甲虫的细菌驱避剂。方法利用传统分离纯培养法分离马陆的肠道可培养细菌,通过16S rDNA对细菌进行分子鉴定,再通过爬行痕迹实验和取食选择实验确定细菌对普通卷甲虫取食和活动的影响。结果在马陆肠道内分离到可培养肠道细菌10种,分别为短小芽孢杆菌、莫林枸橼酸杆菌、产气克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、蜡样芽胞杆菌、拟香味类香味菌、粪产碱杆菌、厦门芽孢杆菌、弗氏柠檬酸杆菌。通过爬行痕迹实验表明,蜡样芽胞杆菌、拟香味类香味菌和粪产碱杆菌对普通卷甲虫的活动有显著驱避作用;而通过取食选择实验表明,短小芽孢杆菌、产气克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、蜡样芽胞杆菌和厦门芽孢杆菌对普通卷甲虫的取食有显著驱避作用。结论明确了6种马陆肠道细菌对普通卷甲虫的取食有显著驱避作用,为开发普通卷甲虫无害化驱避剂奠定了基础。

后疫情时代高校医学生教学方式选择意愿性分析

以山东第一医科大学2000余名医学生为研究对象,通过问卷星APP平台问卷调查学生对线上教学、线上—线下混合式教学以及传统课堂教学方式的选择意愿,并分析其影响因素,为探寻后疫情时代医学教育改革的方向和策略提供依据。

发酵辅助提取对中草药提取物生物活性的影响

[目的]研究不同菌种对黄连、连翘黄酮的辅助提取方法及抗氧化活性。[方法]采用黑曲霉、枯草芽孢杆菌固体发酵法分别辅助提取黄连、连翘黄酮,与超声提取黄连、连翘黄酮得到总黄酮含量进行比较。通过测定黄连、连翘黄酮对羟基自由基、DPPH自由基的清除作用、对Fe2+的抗氧化能力、铁氰化钾法还原能力的测定,对其抗氧化活性进行研究。[结果]黑曲霉、枯草芽孢杆菌单一菌种或混合菌种固体发酵法得到的黄连、连翘黄酮含量均低于超声提取的黄连、连翘黄酮含量。黄连、连翘黄酮的提取物对羟基自由基、DPPH自由基有良好的清除作用,对Fe2+的抗氧化能力良好,还原能力良好。[结论]该研究为黄连、连翘的开发与利用提供了新方法。

过表达FCHSD1对细胞增殖以及迁移行为的影响

目的通过检测FCHSD1对细胞增殖情况以及细胞迁移行为的影响,为进一步探讨FCHSD1的生物学功能提供理论依据。方法利用G418压力筛选下构建稳定表达FCHSD1的COS7细胞株;通过MTT实验检测稳转细胞株的细胞增殖情况,利用细胞划痕实验检测其迁移能力,western blot检测细胞中AKt、p-AKt的表达情况。结果利用500μg/m L G418筛选一个稳定表达FCHSD1的单克隆细胞株;此稳转细胞株稳定表达MYC-FCHSD1蛋白;与对照组相比较,过表达FCHSD1能够明显降低细胞的增殖速率;另外,MYC-FCHSD1稳转细胞株中的Akt表达水平明显降低,并且p-Akt的表达量也明显下降;过表达FCHSD1稳转细胞株的迁移能力与对照组相比较没有显著差异。结论过表达FCHSD1可能通过调控Akt信号途径来抑制细胞增殖,但对细胞迁移能力的作用不明显。

基于MOOC、Mini-CEX结合的线上线下混合模式的医学细胞生物学实验教学探索

医学细胞生物学是一门重要的基础医学课程。医学细胞生物学实验课的教学质量是这门课的关键。充分利用MOOC等线上资源结合改良的Mini-CEX评价体系开展医学细胞生物学实验课的教学,有效提高学生上实验课的积极性、培养学生科研能力和团队合作能力,进而提高医学细胞生物学实验课的教学质量。

富硒麦草茶的研制

以富硒小麦幼苗、绿茶、枸杞子、菊花和三七花为材料,研制富硒麦草茶。采用观感评价及口味品尝方法,确定麦苗杀青条件与富硒麦草茶原料配比。结果表明:对小麦幼苗喷洒200 mg/L亚硒酸钠溶液,小麦生长良好,嫩绿,富硒;麦苗最佳杀青温度为90℃,用2%异抗坏血酸钠和0.6%柠檬酸护色效果最好;按60%麦苗、20%绿茶、12%枸杞子、5%菊花和3%三七花的配比制成的茶,外观和口感最好。

产脂肪酶菌株的筛选鉴定及响应面法优化发酵工艺

本文开展了产脂肪酶菌株的筛选鉴定及响应面法优化发酵工艺试验,确定得到的高产脂肪酶菌株为Youzh-1,对其进行16S rRNA测序分析,确定其为荧光假单胞菌,在单因素试验的基础上采用响应面法对Youzh-1的发酵工艺进行进一步优化设计,得到最佳发酵工艺为葡萄糖添加量18.825 g/L、牛肉膏添加量25.98 g/L、温度41℃、pH值6。在此条件下测得脂肪酶活力为79.87 U/mL,较理论值87.19 U/mL减少了8.39%,证明模型可靠。

白花丹参谷氧还蛋白SmGRX2基因的克隆及其对丹参的转化

目的获取白花丹参GRX基因的全长cDNA序列(命名为SmGRX2),并分析其序列特征和不同外源胁迫下的表达特征,构建其表达载体并转化到白花丹参。方法利用已有白花丹参cDNA全长文库,随机测序获得SmGRX2全长序列。BLAST进行序列比对,Motif Scan软件分析氨基酸序列的功能区段,real-time RT-PCR技术分析基因表达特征;将SmGRX2连接到含有双增强子的高效植物双元表达载体pGreen0029-GFP上,获得含融合DHA基因的植物双元表达载体pGreen0029-SmGRX2-DHA,采用电击法将含SmGRX2的植物表达载体转入根癌农杆菌LBA4404中,用叶片浸染法转化白花丹参。结果获得ORF为372bp的SmGRX2全长cDNA序列,编码氨基酸123个,氨基酸序列分析发现其具有典型的GRX prosite patters CCMC,NCBI登录号为KJ009322。Real-timePCR分析其在根部中表达量最高。SA和MeJA处理均能较强的诱导该基因的表达。对再生植株用PCR检测证实了SmGRX2基因的导入,pGreen0029-SmGRX2-DHA的转化率为24.4%。结论首次获得白花丹参SmGRX2全长基因序列,分析其可能参与对抗病等生物胁迫的响应;成功获得过表达SmGRX2转基因植株,为SmGRX2基因的进一步功能分析奠定了基础。

一株烟草疫霉拮抗菌MC4-2的鉴定、发酵条件优化及防效测定

【背景】烟草黑胫病是由烟草疫霉(Phytophthora parasitica var.nicotianae)引起的真菌性病害,给我国烟叶生产带来了巨大损失。【目的】在美洲大蠊肠道中分离并获得一株对烟草疫霉具有拮抗作用的菌株MC4-2,拟进一步明确该菌株的分类地位、优化发酵条件及对真菌性病害的防治效果。【方法】通过形态特征、生理生化特征和16S rRNA基因序列等方法对菌株MC4-2进行鉴定;以细菌发酵液在波长为600nm时的OD值为指标,采用单因素和正交试验的方法对菌株MC4-2的发酵培养基和发酵条件进行优化;通过在温室内进行盆栽防效试验,明确了该菌株对烟草黑胫病的防治效果。【结果】通过平板对峙试验发现菌株MC4-2对烟草疫霉有较好的抑制效果,抑制率可达到64.04%;16S rRNA基因序列分析表明菌株MC4-2与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)相似度达到99%,形态特征和生理生化特征与该菌也基本符合;其优化培养基配方为:蛋白胨1.0 g、酵母浸粉1.0 g、蔗糖1.5 g、蒸馏水100 mL;最佳发酵条件为接种量8%、装液量30 mL、初始pH 6.0、转速210 r/min、温度32°C、培养时间60 h、光照时间12 h/d;室内盆栽试验结果表明,菌株MC4-2对烟草黑胫病的平均防效可达到63.86%。【结论】为利用枯草芽孢杆菌MC4-2进行生物防治提供了重要参考依据。