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CPI-203通过抑制p38 MAPK/AKT通路改善类风湿关节炎
1
作者
林燕雯
张玲
+1 位作者
尹佳璇
潘继红
《食品与药品》
CAS
2023年第2期143-148,共6页
目的探讨CPI-203对类风湿关节炎影响及作用机制。方法将生长至5~7代的RA滑膜成纤维细胞(RASF)分为正常对照组,白介素1β(IL-1β,10 ng/ml)诱导组,CPI-203(1μmol/L)用药组,CPI-203+IL-1β组。采用Transwell和划痕实验评估RASF侵袭和迁...
目的探讨CPI-203对类风湿关节炎影响及作用机制。方法将生长至5~7代的RA滑膜成纤维细胞(RASF)分为正常对照组,白介素1β(IL-1β,10 ng/ml)诱导组,CPI-203(1μmol/L)用药组,CPI-203+IL-1β组。采用Transwell和划痕实验评估RASF侵袭和迁移能力,血管形成实验检测血管形成能力,qRT-PCR和ELISA测定表型相关分子表达水平。Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶B(AKT)通路相关蛋白表达。使用II型胶原及佐剂混合而成的乳浊液构建胶原诱导关节炎(CIA)模型。实验组CIA模型诱导成功后腹腔注射CPI-203,200 mg/kg,每两天注射1次;阴性对照组不进行任何处理;阳性对照组构建CIA模型后腹腔注射等量DMSO,每两天注射1次。CPI-203治疗30 d后,观察鼠爪临床病理特征变化,ELISA检测各组小鼠血清中炎性因子表达水平,Mircro-CT分析鼠爪骨侵蚀变化,苏木精-伊红(HE)染色评估滑膜增生和软骨降解情况。结果CPI-203显著抑制了IL-1β诱导的RASF侵袭和迁移,并降低血管形成数(P<0.05)。与阳性对照组相比,实验组小鼠关节临床指标得分、滑膜增生、软骨降解及骨损伤减少,血清中炎性因子IL-6、IL-8水平降低(P<0.033)。结论CPI-203可抑制RASF中炎性因子的表达,减弱RASF的侵袭、迁移及血管形成能力,缓解CIA模型小鼠关节炎症,对类风湿关节炎具备一定治疗潜力。
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关键词
类风湿关节炎
滑膜成纤维细胞
CPI-203
胶原诱导关节炎(CIA)
下载PDF
职称材料
R406对人RASFs炎性因子分泌及生物学功能调节、关节炎小鼠关节炎症缓解作用观察
2
作者
张玲
徐鑫睿
+1 位作者
王林
潘继红
《山东医药》
CAS
2022年第15期49-54,共6页
目的探讨R406(free base)对人类风湿关节炎关节滑膜成纤维细胞(RASFs)炎性因子分泌的抑制及生物学功能(侵袭、迁移和凋亡)的调节作用,观察R406对关节炎小鼠关节炎症的缓解作用。方法取3~7代生长的RASFs,分为实验组、阴性对照组和阳性对...
目的探讨R406(free base)对人类风湿关节炎关节滑膜成纤维细胞(RASFs)炎性因子分泌的抑制及生物学功能(侵袭、迁移和凋亡)的调节作用,观察R406对关节炎小鼠关节炎症的缓解作用。方法取3~7代生长的RASFs,分为实验组、阴性对照组和阳性对照组。实验组分别用1、10、50、100 ng/mL R406和10 ng/mL IL-1β干预,阴性对照组加入DMSO,阳性对照组加入DMSO和10 ng/mL IL-1β干预。干预24 h,采用qRT-PCR法检测各组炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA。选择最适浓度(50 ng/mL)的R406作用于RASFs(实验组)不同时间(6、12、24、48 h),阴性对照组及阳性对照组处理方法同上,采用qRT-PCR检测各组IL-6、IL-8、CCL2 mRNA,ELISA法检测各组IL-6、IL-8、CCL2蛋白,Trans Well检测各组RASFs的侵袭能力;划痕法检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡率。建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)模型鼠,将18只8周龄的DBA 1/J小鼠平均分为实验组、阴性对照组和阳性对照组。实验组诱发CIA后腹腔注射R406,200 mg/kg,每两天注射1次;阴性对照组不诱发CIA;阳性对照组诱发CIA后腹腔注射等量DMSO,每两天注射1次。R406治疗30 d后,ELISA法检测各组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP。结果与阳性对照组比较,实验组中不同剂量R406作用后RASFs中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA表达被抑制,且在50 ng/mL时抑制效果最为显著(P均<0.01)。与阳性对照组比较,实验组中50 ng/mL R406作用于RASFs不同时间,细胞中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2蛋白的表达均被抑制,且在24 h抑制效果最显著(P均<0.01);与阳性对照组比较,实验组RASFs上清液中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2水平降低(P均<0.01)。与阳性对照组比较,实验组RASFs侵袭和迁移数均降低,凋亡率增加(P均<0.05)。与阳性对照组比较,实验组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP水平降低(P均<0.01)。结论R406可以抑制RASFs中炎性因子的分泌,调节RASFs侵袭、迁移、凋亡能力,对CIA模型鼠关节炎症具有抑制作用。
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关键词
脾酪氨酸蛋白激酶抑制剂
R406
类风湿关节炎
滑膜成纤维细胞
白细胞介素6
白细胞介素8
趋化因子配体2
细胞生物学功能
小鼠
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职称材料
题名
CPI-203通过抑制p38 MAPK/AKT通路改善类风湿关节炎
1
作者
林燕雯
张玲
尹佳璇
潘继红
机构
山东
第一
医科
大学
生物医学
科
学院暨
山东
省医药生物技术中心生物化学教研室
山东第一医科大学第一附属医院类风湿关节炎科
国家卫健委生物医药重点实验室
山东
省罕见病防治重点实验室生物化学教研室
出处
《食品与药品》
CAS
2023年第2期143-148,共6页
基金
国家自然科学基金项目(编号:81671624)。
文摘
目的探讨CPI-203对类风湿关节炎影响及作用机制。方法将生长至5~7代的RA滑膜成纤维细胞(RASF)分为正常对照组,白介素1β(IL-1β,10 ng/ml)诱导组,CPI-203(1μmol/L)用药组,CPI-203+IL-1β组。采用Transwell和划痕实验评估RASF侵袭和迁移能力,血管形成实验检测血管形成能力,qRT-PCR和ELISA测定表型相关分子表达水平。Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶B(AKT)通路相关蛋白表达。使用II型胶原及佐剂混合而成的乳浊液构建胶原诱导关节炎(CIA)模型。实验组CIA模型诱导成功后腹腔注射CPI-203,200 mg/kg,每两天注射1次;阴性对照组不进行任何处理;阳性对照组构建CIA模型后腹腔注射等量DMSO,每两天注射1次。CPI-203治疗30 d后,观察鼠爪临床病理特征变化,ELISA检测各组小鼠血清中炎性因子表达水平,Mircro-CT分析鼠爪骨侵蚀变化,苏木精-伊红(HE)染色评估滑膜增生和软骨降解情况。结果CPI-203显著抑制了IL-1β诱导的RASF侵袭和迁移,并降低血管形成数(P<0.05)。与阳性对照组相比,实验组小鼠关节临床指标得分、滑膜增生、软骨降解及骨损伤减少,血清中炎性因子IL-6、IL-8水平降低(P<0.033)。结论CPI-203可抑制RASF中炎性因子的表达,减弱RASF的侵袭、迁移及血管形成能力,缓解CIA模型小鼠关节炎症,对类风湿关节炎具备一定治疗潜力。
关键词
类风湿关节炎
滑膜成纤维细胞
CPI-203
胶原诱导关节炎(CIA)
Keywords
rheumatoid arthritis(RA)
synovial fibroblast
CPI-203
collagen-induced arthritis(CIA)
分类号
R965 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
R406对人RASFs炎性因子分泌及生物学功能调节、关节炎小鼠关节炎症缓解作用观察
2
作者
张玲
徐鑫睿
王林
潘继红
机构
山东
第一
医科
大学
生物医学
科
学院暨
山东
省医药生物技术中心生物化学教研室
山东第一医科大学第一附属医院类风湿关节炎科
国家卫健委生物医药重点实验室
山东
省罕见病防治重点实验室生物化学教研室
出处
《山东医药》
CAS
2022年第15期49-54,共6页
基金
国家自然科学基金(81671624)。
文摘
目的探讨R406(free base)对人类风湿关节炎关节滑膜成纤维细胞(RASFs)炎性因子分泌的抑制及生物学功能(侵袭、迁移和凋亡)的调节作用,观察R406对关节炎小鼠关节炎症的缓解作用。方法取3~7代生长的RASFs,分为实验组、阴性对照组和阳性对照组。实验组分别用1、10、50、100 ng/mL R406和10 ng/mL IL-1β干预,阴性对照组加入DMSO,阳性对照组加入DMSO和10 ng/mL IL-1β干预。干预24 h,采用qRT-PCR法检测各组炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA。选择最适浓度(50 ng/mL)的R406作用于RASFs(实验组)不同时间(6、12、24、48 h),阴性对照组及阳性对照组处理方法同上,采用qRT-PCR检测各组IL-6、IL-8、CCL2 mRNA,ELISA法检测各组IL-6、IL-8、CCL2蛋白,Trans Well检测各组RASFs的侵袭能力;划痕法检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡率。建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)模型鼠,将18只8周龄的DBA 1/J小鼠平均分为实验组、阴性对照组和阳性对照组。实验组诱发CIA后腹腔注射R406,200 mg/kg,每两天注射1次;阴性对照组不诱发CIA;阳性对照组诱发CIA后腹腔注射等量DMSO,每两天注射1次。R406治疗30 d后,ELISA法检测各组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP。结果与阳性对照组比较,实验组中不同剂量R406作用后RASFs中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2 mRNA表达被抑制,且在50 ng/mL时抑制效果最为显著(P均<0.01)。与阳性对照组比较,实验组中50 ng/mL R406作用于RASFs不同时间,细胞中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2蛋白的表达均被抑制,且在24 h抑制效果最显著(P均<0.01);与阳性对照组比较,实验组RASFs上清液中炎性因子IL-6、IL-8、CCL2水平降低(P均<0.01)。与阳性对照组比较,实验组RASFs侵袭和迁移数均降低,凋亡率增加(P均<0.05)。与阳性对照组比较,实验组小鼠血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1α、COMP水平降低(P均<0.01)。结论R406可以抑制RASFs中炎性因子的分泌,调节RASFs侵袭、迁移、凋亡能力,对CIA模型鼠关节炎症具有抑制作用。
关键词
脾酪氨酸蛋白激酶抑制剂
R406
类风湿关节炎
滑膜成纤维细胞
白细胞介素6
白细胞介素8
趋化因子配体2
细胞生物学功能
小鼠
Keywords
spleen tyrosine protein kinase inhibitor
R406
rheumatoid arthritis
synovial fibroblasts
interleukin6
interleukin-8
chemokine(C-C motif)ligand 2
cell biological function
mice
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
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CPI-203通过抑制p38 MAPK/AKT通路改善类风湿关节炎
林燕雯
张玲
尹佳璇
潘继红
《食品与药品》
CAS
2023
0
下载PDF
职称材料
2
R406对人RASFs炎性因子分泌及生物学功能调节、关节炎小鼠关节炎症缓解作用观察
张玲
徐鑫睿
王林
潘继红
《山东医药》
CAS
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