PBL教学模式联合Mini-CEX和DOPS形成性评价体系在儿科实习教学中的应用

目的 探索以问题为基础的学习(PBL)教学模式联合迷你临床演练评估(Mini-CEX)和操作技能直接观察评估(DOPS)形成性评价体系在儿科实习教学中的应用。方法 选取2021年7月至2021年12月在山东第一医科大学附属人民医院儿科轮转实习的临床医学生共40名,随机分为实验组及对照组。对照组进行传统教学模式,实验组给予PBL教学模式。两组在入科时及出科前分别进行1次Mini-CEX和DOPS评估,同时完成两次理论考试。对两组数据进行比较。结果 实验组出科时Mini-CEX评分在病史询问、体格检查、临床判断、组织效能、整体表现评分高于对照组(t分别=3.89、5.40、2.08、4.13、3.86,P均<0.05)。实验组出科时DOPS评分中的对操作适应证和操作步骤的了解和理解、操作技能、无菌观念、操作后相关处理、医患沟通的技巧、整体表现评分高于对照组(t分别=2.17、2.56、2.53、3.88、2.29、2.50,P均<0.05),理论考试成绩高于对照组(t=2.47,P<0.05)。结论 在儿科实习教学中联合采用PBL教学模式及Mini-CEX、DOPS评价体系,能提升实习医师的学习能力、分析问题能力、创新思维能力及临床综合能力。

儿童腹腔感染相关脓毒症病原菌特征分析

目的了解本地区儿童腹腔感染相关脓毒症的病原菌构成及耐药情况,为临床治疗提供参考。方法回顾性分析2018年1月至2019年12月在本科室住院的腹腔感染相关脓毒症患儿的病例资料。结果在70例患儿中,共分离出病原菌107株,以革兰阴性菌为主,共83株(77.57%),革兰阳性菌24株(22.43%)。前3位的病原菌依次为大肠埃希菌(56.07%)、铜绿假单胞菌(12.15%)、星座链球菌(5.61%)。大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶菌株(ESBLs)22株,占36.67%。对头孢唑啉、氨苄西林、哌拉西林等β-内酰胺类抗菌药物的不敏感率均在75%以上,对头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、头孢吡肟等头孢菌素的耐药率均>30%,对哌拉西林他唑巴坦等β-内酰胺类抗菌药物的复方制剂耐药率低,对碳青霉烯类抗菌药物均敏感。铜绿假单胞菌对氨曲南的耐药率为15.38%,对其它常用药物均较敏感。结论大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等革兰阴性菌是本地区儿童腹腔感染相关脓毒症的主要病原菌,治疗时应根据病原菌种类及药敏结果合理选择抗菌药物,减少耐药菌株的产生。

MCP-1基因多态性与学龄前儿童下呼吸道感染的关联及其危险因素

目的分析学龄前儿童下呼吸道感染危险因素及与单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因多态性的关联。方法选取山东第一医科大学附属人民医院2021年3月-2023年3月治疗的下呼吸道感染学龄前患儿126例为研究组,152名同期健康体检学龄前儿童为对照组。分析下呼吸道感染病原菌分布,多因素分析学龄前儿童下呼吸道感染的危险因素,比较两组MCP-1基因2518位点A/G基因分布。结果感染患儿共分离出128株病原菌,革兰阴性菌(88株占68.75%),革兰阳性菌(40株占31.25%);哮喘、早产、每周零食摄入≥7次、家长吸烟、低出生体质量、外周血MCP-1表达水平较高均为学龄前下呼吸道感染的独立危险因素(P<0.05);两组研究对象MCP-1基因2518位点A/G基因型及等位基因频率比较差异无统计学意义。结论学龄前儿童下呼吸道感染病原菌以流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌为主,与哮喘、早产、每周零食摄入≥7次、家长吸烟、低出生体质量、外周血MCP-1表达水平密切相关,与MCP-1基因分布无相关性。

肺炎支原体肺炎患儿血清SP-D、Gal-3、CCL5水平与炎症因子和预后不良的关系研究

目的:探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清表面活性蛋白D(SP-D)、半乳糖凝集素-3(Gal-3)、C-C基序趋化因子配体5(CCL5)水平与炎症因子和预后不良的关系。方法:选取2020年1月~2021年1月我院收治的165例MPP患儿为MPP组,另选取54例健康儿童为对照组。采用ELISA法检测血清SP-D、Gal-3、CCL5、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8水平,放射免疫法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。采用Pearson/Spearman相关系数分析MPP患儿血清SP-D、Gal-3、CCL5水平与IL-6、IL-8、TNF-α水平的相关性。通过多因素Logistic回归分析MPP患儿预后不良的影响因素。采用接受者操作特征(ROC)曲线分析血清SP-D、Gal-3、CCL5水平对MPP患儿预后不良的预测价值。结果:与对照组比较,MPP组患儿的血清SP-D、Gal-3、CCL5以及IL-6、IL-8、TNF-α水平升高(P<0.05)。MPP患儿的血清SP-D、Gal-3、CCL5水平与IL-6、IL-8、TNF-α水平均呈正相关(P<0.05)。血清SP-D、Gal-3、CCL5、IL-6、TNF-α水平较高、病变类型为大片状阴影、热程较长是MPP患儿预后不良的危险因素(P<0.05)。血清SP-D、Gal-3、CCL5三项联合预测MPP患儿预后不良的曲线下面积(AUC)为0.926,明显大于三项指标单独预测的0.842、0.794、0.771。结论:MPP患儿血清SP-D、Gal-3、CCL5水平升高,与炎症因子和预后不良密切相关,可作为MPP患儿预后不良的预测指标。

沉默甲基转移酶样7B基因表达抑制肾母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移

目的:探讨甲基转移酶样7B(methyltransferase-like 7B,METTL7B)与肾母细胞瘤患者预后的关系,以及沉默METTL7B基因对肾母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:采用免疫组织化学法检测72例肾母细胞瘤组织及其配对的癌旁正常肾组织中METTL7B的表达情况;蛋白质印迹法检测人肾母细胞瘤SKNEP-1细胞和正常肾上皮细胞系(PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012)中METTL7B的表达水平。分析METTL7B与肾母细胞瘤患者临床病理特征和生存的关系,应用Kaplan-Meier法和COX比例风险回归模型分析预后相关因素。采用脂质体转染法将特异性针对METTL7B基因的siMETTL7B及阴性对照(negative control,NC)siRAN(siNC)瞬时转入SK-NEP-1细胞,然后采用蛋白质印迹法检测沉默效率;随后分别采用克隆形成实验、CCK-8法、FCM法、Transwell小室实验以及细胞划痕实验检测沉默METTL7B基因表达对SK-NEP-1细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。结果:肾母细胞瘤组织中METTL7B的表达率为68.06%(49/72),高于癌旁正常肾组织中的16.67%(12/72)(P<0.05)。与SK-NEP-1细胞相比,PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012细胞中METTL7B蛋白的表达水平均较低(P均<0.05)。METTL7B与肾母细胞瘤的美国儿童肿瘤协作组(Children’s Oncology Group,COG)分期有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径和病理分型无关(P均>0.05)。COX多因素分析结果显示,COG分期为Ⅲ~Ⅳ期、病理分型为UFH型和METTL7B高表达是肾母细胞瘤预后不良的独立影响因素(P均<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,METTL7B高表达患者的总生存时间短于METTL7B低表达患者(P<0.05)。在SK-NEP-1细胞中沉默METTL 7B基因表达后,SK-NEP-1细胞的克隆形成能力、增殖能力、侵袭能力和细胞迁移能力均受到明显抑制(P均<0.05),而细胞凋亡率明显提高(P<0.05)。结论:METTL7B与肾母细胞瘤分期和不良预后相关。沉默METTL7B基因表达可抑制肾母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,并促进其凋亡。

WTAPP1对肾母细胞瘤细胞增殖、侵袭、迁移及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨长链非编码RNA Wilms瘤1相关蛋白假基因1(Wilms tumor 1associated protein pseudogene 1,WTAPP1)对肾母细胞瘤细胞增殖、侵袭、迁移及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:实时荧光定量PCR法检测48例肾母细胞瘤组织及及其配对的癌旁组织、人肾母细胞瘤细胞(SK-NEP-1)和正常肾上皮细胞(PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012)中WTAPP1的相对表达量。分析比较WTAPP1高表达和低表达组患者的临床病理特征及预后。采用慢病毒感染的方法将携带有WTAPP1全基因(过表达WTAPP1)的慢病毒载体或特异性针对WTAPP1基因的shRNA(shWTAPP1)的慢病毒载体分别转入SK-NEP-1细胞。分别采用克隆形成实验和CCK-8法检测SK-NEP-1细胞的增殖能力,细胞划痕愈合实验和Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法检测SK-NEP-1细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc和Survivin蛋白的相对表达量。结果:癌组织中WTAPP1的相对表达量明显高于癌旁组织(P<0.05)。SK-NEP-1细胞WTAPP1的表达水平明显高于正常肾上皮细胞系(PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012细胞)(P<0.05)。WTAPP1表达与肾母细胞瘤临床分期具有相关性(P<0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤直径和是否发生淋巴结转移均无相关性(P均>0.05)。WTAPP1高表达患者的5年生存率明显低于低表达者(P<0.05)。WTAPP1过表达后,SK-NEP-1细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力均明显提高(P均<0.05);而沉默WTAPP1表达后,SK-NEP-1细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力均明显降低(P均<0.05)。WTAPP1过表达后,SK-NEP-1细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc和Survivin蛋白的表达水平均明显上调(P均<0.05);沉默WTAPP1表达后,SK-NEP-1细胞中Wnt3a、β-catenin、C-myc和Survivin蛋白的表达水平均明显下调(P均<0.05)。结论:WTAPP1与肾母细胞瘤临床分期和生存预后有关,其可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进瘤细胞的增殖、侵袭和迁移。