IGF2BP2/m6A/ITGA5信号轴调控肾透明细胞增殖和迁移

目的探讨N6-甲基腺嘌呤(m6A)“识别蛋白”胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的潜在作用。方法通过分析癌症基因数据库(TCGA)、采用qRT-PCR法和Western blotting法检测IGF2BP2在肾癌中的表达水平,甲基化RNA免疫沉淀qPCR结合生物信息学鉴定整合素α5(ITGA5)mRNA的m6A修饰。采用基因敲低/过表达技术,采用qRT-PCR和Western blotting法检测IGF2BP2对ITGA5表达调控的作用。通过功能性获得和缺失实验确定IGF2BP2和ITGA5对肾癌细胞增殖和迁移的调控。结果TCGA肾癌数据库显示,IGF2BP2在肾癌组织中高表达。同时高表达的IGF2BP2不利于患者的整体生存期(HR=1.6,P=0.005)和无病生存期(HR=1.9,P=0.014)。qRT-PCR法以及Western blotting法检测结果显示,IGF2BP2在肾癌组织中高表达。Western blotting检测结果显示,正常肾上皮细胞中IGF2BP2的表达低于其他几种肾癌细胞系。基因集合富集分析(GSEA)发现ITGA5可能是IGF2BP2下游靶分子。进一步通过敲除或者过表达发现,IGF2BP2在转录后水平调控ITGA5。甲基化RNA免疫沉淀qPCR发现ITGA5在3′UTR区存在m6A修饰化位点,低m6A修饰可能有助于维持其mRNA的稳定性。结论IGF2BP2在肾透明细胞癌中高表达;IGF2BP2不利于肾癌患者的生存预后;IGF2BP2/m6A/ITGA5信号轴调控肾癌细胞的增殖、迁移和血管新生。