靶头修饰对PEG-PCL胶束在人宫颈癌细胞内转运行为的影响

目的 研究转铁蛋白靶向肽T7(7pep)对聚乙二醇-聚己内酯(PEG-PCL)胶束在人宫颈癌HeLa细胞内转运行为的影响。方法 以香豆素-6(C6)为荧光指示探针,通过薄膜分散法制备包载有C6的PEG-PCL(PEG-PCL-C6)胶束以及靶头7pep修饰的PEG-PCL(7pep-PEG-PCL-C6)胶束。比较两种胶束的粒径、多分散指数及外观形态;比较两种胶束被HeLa细胞实时摄取的情况及其入胞后与早期内吞体(EE)、内吞循环室(ERC)、晚期内吞体(LE)的共定位情况。结果 PEG-PCL-C6和7pep-PEG-PCL-C6胶束的平均粒径分别为(75.0±2.3)、(82.0±1.5)nm,多分散指数分别为0.17±0.20、0.17±0.32,外观均为规整的圆球形。7pep-PEGPCL-C6胶束的入胞速度和入胞量均明显快/多于PEG-PCL-C6胶束。7pep-PEG-PCL-C6胶束比PEG-PCL-C6胶束能够更快地进入EE,而入胞后PEG-PCL-C6胶束进入ERC的速率较7pep-PEG-PCL-C6胶束快,且PEG-PCL-C6胶束和7pep-PEG-PCL-C6胶束在LE均有逐渐累积的趋势,但7pep-PEG-PCL-C6胶束入胞60 min时与LE的皮尔森系数、信号重叠比率、共定位比率均显著低于入胞30 min时(P<0.05或P<0.01)。结论 靶头7pep修饰可提高PEG-PCL-C6胶束的入胞速率和入胞量,还可改变其胞内转运行为。

二氢杨梅素对LPS/ATP诱导血管内皮细胞NLRP3炎症小体活化的影响及机制

目的探讨二氢杨梅素(DHM)对脂多糖(LPS)/三磷酸腺苷(ATP)诱导的血管内皮细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,将细胞随机分为空白对照组、LPS/ATP组、LPS/ATP+25μmol/L DHM组、LPS/ATP+50μmol/L DHM组和LPS/ATP+100μmol/L DHM组。除空白对照组外,其他各组经LPS(0.5μg/mL)诱导细胞3.5 h后加入ATP(5 mmol/L)处理细胞30 min;DHM各组分别加入25、50、100μmol/L DHM孵育1 h后加入LPS/ATP诱导。用Western blotting法检测NLRP3、ASC、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1前体蛋白(pro-caspase-1)、剪切体半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(cleaved caspase-1)、沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白;用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)对SIRT1进行富集分析,用转录调控网络分析SIRT1调控的靶基因并构建网络图;用免疫荧光法进行SIRT1定位检测;分子对接分析DHM与SIRT1的作用模式。结果与空白对照组比较,LPS/ATP组NLRP3、ASC、cleaved caspase-1蛋白表达高(P均<0.05);与LPS/ATP组比较,各DHM组NLRP3、ASC、cleaved caspase-1蛋白表达低(P均<0.05)。SIRT1主要分布于细胞核内。与空白对照组比较,LPS/ATP组相对荧光强度弱(P<0.05);与LPS/ATP组比较,LPS/ATP+100μmol/L DHM组相对荧光强度强(P<0.05)。与空白对照组比较,LPS/ATP组SIRT1蛋白表达低(P<0.05);与LPS/ATP组、LPS/ATP+25μmol/L DHM组比较,LPS/ATP+50μmol/L DHM组、LPS/ATP+100μmol/L DHM组SIRT1蛋白表达高(P均<0.05)。GO富集分析结果:生物过程富集分析结果显示与对营养水平的反应等生物过程联系密切;细胞组分富集分析结果显示与染色质沉默复合体等密切相关;分子功能富集分析结果显示与染色质DNA结合等分子功能有关。KEGG通路富集分析结果:SIRT1涉及长寿调节、脂质与动脉粥样硬化等信号通路。DHM可有效嵌入SIRT1(受体生物大分子)的“活性口袋”。结论DHM可抑制LPS/ATP诱导的血管内皮细胞NLRP3炎症小体活化,其机制可能与上调SIRT1表达有关。

新型降脂药物PCSK9抑制剂在动脉粥样硬化心血管疾病的研究现状

动脉粥样硬化是许多心血管疾病的早期病理改变,脂质代谢紊乱是动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)最重要的危险因素之一。前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)是血脂调节的关键因子,可以通过与低密度脂蛋白受体(LDLR)结合,降解LDLR从而阻止低密度脂蛋白的清除,导致低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平升高,增加心血管疾病的风险。PCSK9也参与炎症细胞因子的生成、内皮功能障碍和动脉粥样硬化斑块的形成。多项研究显示,PCSK9是治疗ASCVD的一个有希望的新靶点。PCSK9抑制剂是目前治疗高胆固醇血症的新型药物。本文就PCSK9抑制剂在动脉粥样硬化中的作用及药物研究进展做一综述,为临床用药提供参考。

阿仑膦酸钠脂质体的制备及透皮给药性能评价

目的 筛选制备阿仑膦酸钠(ALN)脂质体的最佳条件并探究其体外透皮性能。方法 通过薄膜水合法结合过膜挤压法制备ALN脂质体,计算包封率和载药量,并采用双室立式透皮扩散池考察药物的渗透性,计算累积渗透量和释放模型的拟合。结果 通过单因素试验得到制备脂质体的最佳条件为膜材比2.5∶1、转速700 r·min^(-1)、脂药比10∶1、超声时间6 min、水化温度45℃、包封率和载药效率最大分别为49.6%和14%。ALN脂质体的累积渗透量最大为814.78μg·cm-2相当于原液的两倍。且原液的释放模型基本符合Ritger-Peppas方程,ALN脂质体的释放模型基本符合零级动力学方程,具有一定的缓控释作用。结论 所制备的ALN脂质体均匀稳定,含ALN的脂质体具有良好的透皮效果,因此证明了将ALN制成脂质体的可行性,同时也为外用新剂型的研究提供了思路,具有良好的发展前景。

以提高本科生创新能力为导向的翻转教学模式的构建和应用

本文通过分析现阶段翻转课堂的误区和课堂教学活动的误区,提出了优化措施,以提高本科生创新能力为导向,构建了“D+6S”翻转教学模式,旨在探寻一种更适合人才培养需求的翻转教学。以基础化学为例介绍其具体应用过程,并对期末考试卷面成绩进行分析,结果表明,采用“D+6S”翻转教学的学生平均成绩显著高于采用传统授课方式的学生成绩(P<0.05)。发放问卷调查学生的学习感受,问卷结果显示,在提高学习主动性、提升学习兴趣、有效增加课堂的参与度、锻炼表达能力,以及培养学以致用的能力等方面,翻转教学都优于传统教学。尤其突出的是,学生认为,在提高创新能力方面,“D+6S”翻转教学明显优于传统教学(P<0.001)。