检验科微生物检验质量的影响因素与病原菌耐药性研究

目的探究检验科微生物检验质量的影响因素与病原菌耐药性。方法抽取2018年8月—2019年8月期间该院检验科送检微生物中的376例检测标本为研究样本,对所有样本资料进行整合,全面分析影响微生物检验结果的因素,并研究病原菌耐药性。结果微生物血常规(75.55%)、尿常规(76.66%)检测总准确率比较高,病原菌培养(46.96%)、脑脊液(37.93%)、蛋白定量(39.13%)以及其他(34.61%)检测准确率比较低;人员素质因素(44.28%)、标本采集及保存(34.28%)对微生物检验质量影响最大,操作规范性(15.71%)与其他因素(5.71%)次之;金黄色葡萄球菌对红霉素(15.34%)、青霉素(18.33%)、左氧氟沙星(12.97%)、头孢噻吩(11.35%)耐药率比较高,大肠埃希菌对头孢噻吩(23.18%)、克林霉素(33.84%)、四环素(20.67%)、氯霉素(15.77%)、庆大霉素(12.57%)耐药率高,肺炎克雷伯菌对青霉素(15.34%)、头孢噻吩(18.27%)、红霉素(12.57%)、庆大霉素(12.54%)耐药率比较高。结论影响微生物检验质量的因素有多种,在实际检验过程中,要规范工作人员的操作步骤,提高工作人员素质,还要提高抗菌类药物选择的合理性,降低耐药率,提高微生物检验质量。

转录共激活因子在肺癌组织中表达及其与患者预后的关系

目的 研究转录共激活因子(TAZ)在非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中表达情况及其与肺癌患者预后的关系。方法 选取2019年1月至12月山东省聊城市第二人民医院收治的NSCLC患者118例,收集临床病例资料,免疫组织化学方法观察癌组织及配对癌旁组织TAZ表达情况并进行评分;对患者进行随访,利用Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归分析TAZ表达与肺癌患者预后的关系。结果 118例肺癌患者中,癌组织中TAZ阳性表达70例,癌旁组织阳性表达41例,癌组织TAZ阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线结果显示,TAZ阳性表达患者总生存率低于TAZ阴性表达患者(P<0.05);Cox回归分析结果显示,TAZ表达阳性、肿瘤直径≥3 cm、淋巴结转移、TNMⅢ期是影响患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 TAZ在肺癌组织中高表达,与肿瘤直径、TNM分期及淋巴结转移密切相关,是影响肺癌患者预后的独立影响因素。TAZ阳性表达可能是影响NSCLC患者预后的新型生物学标志物。

神经外科病房鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的为了解本院神经外科病房鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性及耐药基因流行特点,现对鲍曼不动杆菌表型和β-内酰胺酶基因类型进行检测分析。方法从本院患者的各类临床标本中分离的120株鲍曼不动杆菌进行药敏试验,结果按NCCLS2006年的标准作出判定。结果用K-B法测定的120株鲍曼不动杆菌对5种抗生素的耐药性。其中头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为7.1%,头孢曲松的耐药率为64.5%,头孢吡肟和头孢他啶的耐药率都为64.2%,头孢呋肟的耐药率为80.0%,头孢唑啉的耐药率为97.5%结论鲍曼不动杆菌是医院获得性感染的重要细菌之一,因其分离率高、耐药广泛、病死率高,对危重患者威胁很大。

溃疡性结肠炎患者血清趋化因子配体19、干扰素调节因子4水平及临床意义

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者血清趋化因子配体19(CCL19)、干扰素调节因子4(IRF4)水平及临床意义。方法选择2020年6月至2022年5月在该院住院治疗的105例UC患者为UC组,另选取83例健康体检者为对照组。根据Mayo评分将UC患者分为缓解期组(n=35)和活动期组(n=70)。根据活动期病情严重程度,将活动期UC患者分为轻度组(n=19)、中度组(n=23)和重度组(n=28)。根据患者预后情况分为预后良好组和预后不良组。采用酶联免疫吸附试验检测血清CCL19、IRF4水平;采用Pearson相关分析血清CCL19、IRF4水平与Mayo评分的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响UC患者预后的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CCL19、IRF4水平对UC患者预后不良的预测价值。结果UC组血清CCL19、IRF4水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。缓解期组血清CCL19、IRF4水平低于活动期组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重度组血清CCL19、IRF4水平明显高于轻度组和中度组,且中度组明显高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后良好组CCL19、IRF4、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)水平明显低于预后不良组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析结果显示,UC患者血清CCL19、IRF4水平均与Mayo评分呈正相关(r=0.426、0.471,P<0.05)。血清CCL19、IRF4水平升高是UC患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CCL19、IRF4水平单独及联合预测UC患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.798、0.752、0.845。结论UC患者血清CCL19、IRF4水平均升高,且与患者病情和临床预后关系密切,可作为UC临床预后评估的潜在指标。

某三甲医院6637株医院感染病原菌分布及耐药性分析

目的探讨医院感染病原菌的分布及耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法收集本院2016年1月~2017年9月分离的6637株病原菌,对标本来源、病原菌分布和耐药性进行分析。采用WHONET5.4软件对数据进行统计分析。结果病原菌分离阳性率高的标本是痰液(62.80%);6637株病原菌中,革兰阴性菌4230株,占63.73%;革兰阳性菌2166株,占32.64%;真菌241株,占3.63%;前5位病原菌依次为:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎链球菌。革兰阴性菌对碳青霉烯类及哌拉西林/他唑巴坦敏感性较高(>80%),对其他药物表现出强耐药、多耐药、泛耐药;革兰阳性菌未发现耐万古霉素、利奈唑胺和替加环素的菌株;真菌对氟胞嘧啶敏感,对其他药物存在耐药,未发现高耐药菌株。结论该院呼吸道标本是病原菌分离的主要标本;革兰阴性菌为主要致病菌,大肠埃希菌是医院感染优势菌株;各病原菌存在不同程度耐药,甚至强耐药、多耐药、泛耐药,临床应重视细菌耐药检测,根据药敏试验结果合理用药,控制耐药菌发展,防止医院感染发生。

NTN4对肾透明细胞癌的临床应用价值

目的探讨神经导向因子4(NTN4)在肾透明细胞癌(ccRcc)中的临床应用价值。方法运用TCGA、UALCAN和HPA数据库,比较NTN4的信使RNA(mRNA)在癌旁组织及ccRcc组织中的表达水平,以及NTN4蛋白在正常肾脏组织和ccRcc组织中的表达水平,采用survminer包的surv_cutpoint()函数确定NTN4表达水平的最佳截断值,并以此为截点将患者分为NTN4高表达组与NTN4低表达组,并分析NTN4表达水平与ccRcc患者临床特征的关系及其对ccRcc患者预后的影响。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析NTN4对ccRcc的诊断价值。采用Kaplan-Meier生存曲线和Log-Rank检验分析NTN4高表达组和NTN4低表达组的生存情况。采用单因素和多因素Cox回归分析ccRcc预后的危险因素。比较ccRcc组织和正常肾脏组织的NTN4的启动子甲基化水平(Beta值),利用基因集富集分析(GSEA)探讨NTN4在ccRcc组织中的潜在机制并构建列线图预测模型,且采用Calibration校准曲线进行模型验证。结果从TCGA数据库中筛选出72例癌旁组织和533例ccRcc组织样本数据(其中72例样本为配对组织)。533例ccRcc组织中NTN4的mRNA表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);72例配对ccRcc组织中NTN4的mRNA表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。UALCAN数据库分析结果显示,ccRcc组织中NTN4蛋白表达水平低于正常肾脏组织,差异有统计学意义(P<0.05)。NTN4高表达组有384例患者,NTN4低表达组有149例患者。NTN4低表达组和NTN4高表达组ccRcc患者组织学分级、病理学分期、肿瘤大小及局部浸润范围(T分期)、远处转移情况(M分期)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,NTN4诊断ccRcc的曲线下面积为0.881(95%CI:0.847~0.916),最佳截断值为6.68,灵敏度为0.65,特异度为0.94。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,NTN4高表达组ccRcc患者的预后情况优于NTN4低表达组ccRcc患者(P<0.05)。单因素与多因素Cox回归分析结果显示,NTN4低表达、年龄>60岁、M分期为M1是ccRcc患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。与正常肾脏组织相比,ccRcc组织中NTN4的Beta值明显升高(P<0.05)。列线图模型的Calibration校准曲线分析结果显示,列线图模型的C-index为0.728。GSEA结果显示,NTN4相关基因主要富集在RNA剪接、胞吞作用、泛素介导的蛋白质降解、神经营养因子信号通路等相关途径。结论NTN4在ccRcc组织中表达水平下降,且有望作为预测ccRcc患者预后的生物标志物。

微RNA-296、血管内皮生长因子-B的表达与冠心病患者冠脉病变程度的关系

目的 探讨微RNA-296(mi R-296)、血管内皮生长因子-B(VEGF-B)的表达与冠心病(CHD)患者冠脉病变程度的关系。方法 选取2019年1月至2022年11月山东省聊城市第二人民医院收治的93例CHD患者,根据冠状动脉病变支数分为单支病变组38例、双支病变组33例、多支病变组22例,再根据Gensini积分将其分为冠状动脉狭窄(CAS)轻度组30例、中度组34例、重度组29例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测mi R-296,酶联免疫吸附试验检测血清VEGF-B。通过双萤光素酶报告基因验证mi R-296与VEGF-B的关系。采用Pearson相关性分析CHD患者mi R-296、VEGF-B表达的相关性,采用Spearman相关性分析CHD患者mi R-296、VEGF-B表达与Gensini积分及冠脉病变支数的相关性。结果 多支病变组mi R-296表达低于单支病变组和双支病变组,VEGF-B水平高于单支病变组和双支病变组,且双支病变组mi R-296表达低于单支病变组,VEGF-B高于单支病变组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组mi R-296表达低于轻度组和中度组,VEGF-B水平高于轻度组和中度组,且中度组mi R-296表达低于轻度组,VEGF-B水平高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。双萤光素酶报告基因显示,VEGF-B是mi R-296的靶点。Pearson相关性分析显示,CHD患者mi R-296与VEGF-B表达呈负相关(r=-0.731,P<0.05)。Spearman相关性分析显示,CHD患者mi R-296表达与Gensini积分及病变支数呈负相关(rs=-0.719、0.638,P<0.05),VEGF-B表达与Gensini积分及病变支数呈正相关(rs=0.727、0.698,P<0.05)。结论CHD患者mi R-296低表达,VEGF-B高表达,两者与CAS病变程度密切相关。

某院近5年住院患者肠杆菌科细菌分布及耐药监测分析

目的对该院2013-2017年住院患者分离的肠杆菌科细菌分布及药敏情况进行统计分析,为临床治疗及合理选择抗菌药物提供依据。方法采用纸片扩散法(K-B法)或自动化仪器(VITEK2-compact系统)对临床分离的5562株非重复肠杆菌科细菌进行药敏试验,并按美国临床实验室标准化协会(CLSI)相关标准判断药敏结果。结果共收集该院临床分离的非重复肠杆菌科细菌5562株,其中大肠埃希菌2820株,肺炎克雷伯菌1607株,阴沟肠杆菌317株及其他肠杆菌科细菌818株。5年间肠杆菌科细菌的检出率基本持平,2013年为50.9%,2017年为51.1%。药敏试验数据显示,所有肠杆菌科细菌对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、厄他培南、头孢替坦和阿米卡星保持了高的敏感率(>90.0%),对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶和头孢吡肟也有较高的敏感率(73.0%~89.3%),对氨曲南、庆大霉素、妥布霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、头孢曲松、复方磺胺甲噁唑的敏感率较低(27.3%~66.1%),对氨苄西林的敏感率最低(8.0%)。5年间,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌检出率从62.7%上升到64.6%;产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率从37.5%下降至30.5%。碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)检出率为1.6%。结论肠杆菌科细菌对常见抗菌药物的耐药率总体呈下降趋势,但CRE菌株的日趋增多,给临床治疗造成严重影响,应充分利用细菌耐药监测结果进行感染控制,提高临床抗菌药物合理使用的意识,有效遏制该类菌株感染的发生。

聊城地区手足口病病原构成的临床研究

目的探讨聊城地区手足口病（HFMD）的病原构成及临床特点。方法采集2010年6月聊城地区240例HFMD患者（包括23例重症患者）咽拭子并提取病毒RNA。采用real—timeRT—PCR方法，以肠道病毒5’UTR区通用引物及探针对病毒RNA进行初步筛查，初筛阳性标本进一步采用CA16及EV71VP1区特异性引物及探针进行型别鉴定。结果普通患者EV71阳性143例、CA16阳性6例、其他肠道病毒阳性21例；重症患者中EV71阳性率达82．6％（19／23），CA16感染未见引起重症。结论聊城地区HFMD患者以1～3岁儿童为主，男性高发于女性，农村高发于城市；HFMD的病原包括EV71、CA16及其他肠道病毒，主要病原为EV71，且EV71感染容易引起重症并发症。

聊城地区新德里金属β-内酰胺酶菌株的分子流行病学及感染危险因素研究

目的研究聊城地区新德里金属β-内酰胺酶(NDM)菌株的分子流行病学及感染危险因素。方法采用分层抽样法从聊城地区2014年1月至2018年12月15所医院中抽取样本5689例,其中,临床标本中分离的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌共112份,回顾性研究分析院内感染危险因素。用改良Hodge试验、ETP-EDTA协同试验、mCIM试验确证表型。用PCR法扩增碳青霉烯酶基因。结果5689例样本中临床标本中分离的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌共112份,发生率1.97%。可见,不同危重度、合并基础疾病、存在侵入性操作、使用糖皮质激素、使用免疫抑制剂药物是碳青霉烯类耐药情况下碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌感染率差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析模型结果显示,危重度(符合并入住ICU)、合并基础疾病(2种及以上)、存在侵入性操作、使用糖皮质激素、使用免疫抑制剂药物是碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌感染的独立危险因素(OR=1.977、1.558、1.103、1.078、1.770,P<0.05),26株产NDM肠杆菌科细菌呈现多重耐药性,其中7株对亚胺培南耐药、8株对厄他培南耐药、6株对美罗培南耐药,5株对3种药物都敏感。PCR结果显示,26株产NDM的大肠埃希菌分为4个基因型,其中9株D型,8株B型,5株C型,4株A型。结论医院已出现多种NDM亚型,主要感染因素为侵袭性操作及抗生素的应用,主要通过X3型质粒在肠杆菌科细菌中传播。

HIF-1α、VEGF、PCT在COPD患者中的表达及临床意义

目的探讨缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、降钙素原(PCT)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中的表达及临床意义。方法选择2021年1月至2022年6月收治的125例COPD患者作为观察组,根据急性生理和慢性健康状况(APACHEⅡ)评分分为轻症组75例,重症组50例。选择同期100例健康体检者作为对照组。比较各组HIF-1α、VEGF、PCT水平,分析其对重症COPD,以及重症COPD预后不良的预测价值。结果观察组HIF-1α、PCT水平明显高于对照组,VEGF水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);重症组HIF-1α、PCT水平明显高于轻症组,VEGF水平明显低于轻症组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,HIF-1α、PCT水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.621,P=0.027;r=0.603,P=0.035),VEGF水平与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.563,P=0.035)。HIF-1α、VEGF、PCT联合检测预测重症COPD的曲线下面积为0.803,灵敏度和特异度分别为90.1%、70.1%,优于单项指标检测。Logistic回归模型显示,HIF-1α≥35.25 pg/mL、VEGF≤130.10 pg/mL、PCT≥2.95 ng/mL是重症COPD患者发生预后不良的危险因素(P<0.05)。结论HIF-1α、VEGF、PCT在COPD患者中出现明显异常,在重症患者中更明显,3项指标联合检测对COPD的诊断、病情评估、预后预测具有重要作用。

克罗彭施泰特棒状杆菌感染与肉芽肿性乳腺炎相关性研究进展

肉芽肿性乳腺炎也称肉芽肿性小叶性乳腺炎,是一种少见的炎性乳腺疾病,由KESSLER等[1]于1972年提出,患者一般以乳腺肿块就诊,可伴有皮肤脓肿和瘘管形成,该病影像学检查不具有特异性,易与乳腺癌混淆。肉芽肿性乳腺炎病因尚不明确,可能与自身免疫性疾病、超敏反应和微生物感染等有关。近年来,革兰阳性棒状杆菌,尤其是克罗彭施泰特棒状杆菌在肉芽肿性乳腺炎中的重要性逐渐引起人们关注。本文就克罗彭施泰特棒状杆菌感染与肉芽肿性乳腺炎的相关性进行综述,以期进一步认识该菌在肉芽肿性乳腺炎中的致病性,为肉芽肿性乳腺炎诊治中细菌学证据的查找提供相关依据。

胱抑素C、血清肌酐和内生肌酐清除率在糖尿病肾病早期诊断中的效能比较

目的探讨血清胱抑素C(CysC)、血清肌酐和内生肌酐清除率在糖尿病肾病早期诊断中的效能。方法采用乳胶颗粒增强免疫比浊法测定30例糖尿病患者血清胱抑素C,同时测定血肌酐(SCr,酶法)及肌酐清除率(CCr),比较CysC、Scr与CCr的相关性,采用受试者工作特征曲线下面积(AUC^(BOC))评价CysC的诊断效能。结果血清CysC、SCr与CCr与糖尿病均呈显著相关,其中以CysC与CCr的相关程度最为密切。CysC和Scr的AUC^(BOC)分别为0.716、0.702。结论CysC在糖尿病肾病早期诊断中具有较高的准确性,能可靠地反映肾功能早期损害的指标,在糖尿病肾病的早期诊断中具有指导意义。

AFU、AFP-L3、HCY联合检测对原发性肝癌早期诊断临床价值的研究

目的探讨3种血清肿瘤标志物α-L-岩藻糖苷酶（AFU）、AFP异质体（AFP-L3）及同型半胱氨酸（HCY）联合检测原发性肝癌（PHC）的互补诊断价值及对肝癌早期诊断的意义。方法对该院2004年11月～2005年12月收治的84例PHC患者、健康对照组30例、乙型肝炎对照组30例和冠心病组30例联合检测AFU、AFP-L3及HCY。采用速率法测定AFU水平，电泳亲和印迹法测定AFP-L3，采用IMx同型半胱氨酸专用试剂包测定HCY。结果PHC组与健康对照组血清AFU、AFP-L3及HCY水平相比差异有统计学意义（P〈O．01）；3项标志物单项检测的敏感性分别为46．43％、88．10％、84．52％，3项指标联合检测PHC的检出率可达93．63％；PHC组与冠心病组HCY浓度差异有统计学意义（P％0．05）。结论联合检测AFU、AFP-L3及HCY 3项指标对HPC的早期诊断有一定的指导意义。

PCI围手术期联合检测血清NT-PROBNP和cTn在老年急性冠脉综合征中的应用

目的：探讨PCI围手术期血清N 末端脑钠肽前体（N-terminal pro-B-type natriuretic peptide，NT-PROBNP）和肌钙蛋白（cardiac troponin，cTn）联合检测在老年急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）中的应用。方法选取2013年4月～2014年4月期间山东省聊城市第二人民医院收治的67例需行PCI治疗的老年ACS患者为研究对象，选取同期健康老人30例作为对照。检测并比较2组研究对象围手术期血清NT-PROBNP和cTn水平，分析血清NT-PROBNP和cTn与老年ACS患者心功能的关系，并采用ROC曲线分析血清NT-PROBNP和cTn联合检测对老年ACS患者心功能的预测能力。结果老年ACS患者血清cTnT、cTnI和NT-PROBNP水平均较健康老人显著升高（P＜0.05），术后4h、12h和24h老年ACS患者的血清cTnT、cTnI和NT-PROBNP水平均较术前升高，术后72h患者血清cTnT、cTnI和NT-PROBNP水平逐渐降至术前水平或更低，术后4h、12h和24h各时间点之间的血清cTnT、cTnI和NT-PROBNP水平比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。Pearson相关性分析结果显示：血清cTnT、cTnI和NT-PROBNP水平与老年ACS患者心功能均呈负相关（rcTn C ＝-0.675，r cTnT ＝-0.706，rcTnI ＝-0.841，rNT-PROBNP ＝0.822，P＜0.05）。ROC曲线下面积可信区间0.678～0.945，0.6≤A≤0.9，提示血清NT-PROBNP和cTn联合检测对老年ACS患者心功能的预测价值良好。结论老年ACS患者血清NT-PROBNP和cTn水平与老年ACS患者患者心功能均呈负相关，血清NT-PROBNP和cTn联合检测可作为行PCI的老年ACS患者心功能的预测指标。

D-二聚体的研究进展

D-二聚体(DD)是已交联的纤维蛋白的降解产物,它的生成或增高反映了凝血和纤维系统的激活,可以作为体内血栓前状态和血栓形成的分子标志物之一。因此,在血栓前状态及血栓形成性疾病的诊断、疗效观察、预后判断及病理研究中有着广泛的应用价值。现着重对D-二聚体的形成机理、方法学和临床意义作一综述。

小儿肺炎支原体感染不同血清学方法检测及临床应用

目的 通过对小儿肺炎支原体感染不同血清学方法检测的结果探讨 ,评价几种方法对肺炎支原体感染的诊断价值。方法 选择儿科病房以呼吸道感染收治的住院患者 1 61例 ,分别采用 SERODIA-MYCO凝集试验、ELISA法、金标渗滤法检测血清抗 MP Ig M和冷凝集试验。结果 1 61例受检样品中阳性结果分别为 33例 ( 2 0 .5 % ) ,2 8例 ( 1 7.4% ) ,2 2例 ( 1 3.7% ) ,冷凝集试验阳性结果 1 3例 ( 8.1 % )。血清抗 MP Ig M敏感性分别为 94.3% ,80 % ,62 .9% ;特异性分别为 97.7% ,96.7% ,99.2 % ;冷凝集试验敏感性为 37.1 % ,特异性为 94.7%。结论 抗 MP Ig M是机体受肺炎支原体感染时最早出现的特异性抗体 ,血清抗 MP Ig M检测具有操作简便、灵敏度高、特异性强能早期诊断的优点 ,目前适用一般实验室常规应用。

β-arrestin 2抗基因RNA慢病毒表达载体的构建与鉴定

目的构建携带β-arrestin 2抗基因RNA的慢病毒表达载体并对其进行鉴定。方法将线性化的慢病毒载体pGC-FU与抗基因RNA在In-Fusion交换酶作用下构建目的质粒pGC-agRNA,转化感受态细胞,对长出的克隆应用菌落PCR鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析。重组病毒质粒与另外两种辅助包装原件载体质粒通过LipofectamineTM2000共转染293T细胞,培养48 h后,收集细胞培养上清液,将病毒浓缩后在293T细胞中测定病毒滴度,并检测慢病毒载体在工具细胞NG108-15细胞的转染效率。结果抗基因RNA被成功构建入慢病毒表达载体pGC-FU,病毒滴度为2×109TU/mL。用该慢病毒感染NG108-15细胞,当感染复数(MOI)为100时,感染效率大于95%。结论成功构建了携带β-arrestin 2抗基因RNA的慢病毒表达载体,为研究β-arrestin 2在μ阿片受体调控机制中的作用提供了有效的研究工具,而且为抗基因RNA技术应用于体内外实验研究奠定了基础。

高敏C反应蛋白的研究现状

高敏C反应蛋白是1种急性时相反应蛋白,在炎性反应或组织损伤时会升高,在疾病诊断、病情变化及疗效观察等方面具有较大临床意义。本文对高敏C反应蛋白的研究现状作一综述。