重组人白细胞介素18的纯化及其生物学活性研究

目的 :纯化rhIL 18并对其生物学功能进行初步研究。方法 :采用优化的包涵体提取技术和SephacrylS 2 0 0分子筛层析纯化rhIL 18,利用MTT染色法研究rhIL 18对NK细胞促杀伤作用和对外周血单个核细胞 (PBMC)的促增殖作用 ,采用半定量RT PCR方法研究rhIL 18诱导IFN γ基因的表达情况。结果 :得到纯度达 96 %的纯品rhIL 18,复性的rhIL 18可以明显地促进PBMC增殖 ,增强NK细胞细胞毒活性。结论 :得到纯度较高、具有较好生物学功能的rhIL 18。

人白细胞介素15单克隆抗体的制备及鉴定

目的 :用rhIL 15与沙门氏菌裸菌相偶联制备IL 15单克隆抗体 (monoclonalantibody ,McAb) ,以便为疾病的诊断、治疗和发病机制的研究提供可靠的生物制剂。方法 :将纯化的rhIL 15蛋白与沙门氏菌裸菌相偶联制成免疫原 ,用脾内、腹腔、静脉三种途径相结合免疫BALB c小鼠 ,以PEG为促融剂 ,将脾细胞与SP2 0细胞进行融合 ,HAT选择培养 ,间接ELISA筛选阳性克隆 ,通过多次克隆化 ,获得稳定分泌特异性McAb的杂交瘤细胞株 ,并对所获得的细胞株及分泌的McAb特性进行了分析。结果 :获得 4株能稳定分泌特异性McAb的杂交瘤细胞系 (hybridomacell,Hc) ,ELISA法检测其效价分别为 1:10 6 、1:10 7、1:10 7、1:10 7。Dotblot检测IL 15的灵敏度为 1 5ng ,其中一株 (1 7E4 )尚可用于Westernblot检测。结论 :成功制备了 4株IL 15McAb杂交瘤细胞系。

细胞因子共用受体γ链的结构、功能及生物学意义

细胞因子共同的受体亚单位γ链(γc)主要通过参与细胞与细胞之间的信号转导,在淋巴细胞发育、活化和行使功能等方面起重要作用。γc基因的缺乏或γc信号转导途径受阻,都可引起X-性连锁重症联合免疫缺陷症(X-SCID)。本文重点阐述γc亚单位的结构和功能方面的属性,同时对γc亚单位生物学作用进行讨论。

人rIL-6对人胎脾单个核细胞IL-2合成的影响

用人重组白细胞介素6与人胎脾单个核细胞(FSMC)共同培养24小时,结果发现其培养上清含有明显的IL-2活性,与对照组相比,差异有非常显著性(P<0.0001),且IL-2产生与IL-6刺激剂量呈依赖关系;不同胎龄FSMC经相同剂量IL-6处理后产生的IL-2水平差异无显著性(P>0.05)。结果提示IL-6能诱导FSMC产生IL-2。