纯中药制剂复聪汤对庆大霉素致聋豚鼠耳蜗毛细胞修复再生的实验研究

目的观察纯中药制剂对庆大霉素致聋动物和耳蜗毛细胞的修复再生作用。方法选用73只健康青年豚鼠,行听力学检查后,53只动物连续肌肉注射庆大霉素(80mg.kg-1.d-1)24～30天致聋(GM组),其间死亡8只,剩余45只随机分成中药治疗组(25只)和致聋后对照组(20只),中药治疗组给予纯中药制剂"复聪汤Ⅰ号"口服液和"复聪汤Ⅱ号"滴耳液治疗,致聋后对照组同法给予生理盐水。另外20只豚鼠作为正常对照组,每天肌肉注射等量生理盐水。在治疗30、60和90天后对GM组两组动物分别行ABR、DPOAE检测,同时,每一时间点处死6只动物,左侧耳蜗行扫描电镜观察,右侧耳蜗铺片行光镜观察和毛细胞计数。结果实验前所有豚鼠的听功能正常;连续注射庆大霉素30天后,GM组豚鼠ABR反应阈值上升到50～80dB SPL,DPOAE幅值降低,光镜和电镜下表现为耳蜗毛细胞纤毛断碎、倒伏、融合和消失,多处毛细胞表皮板肿胀、突起和疱疹样变性,或毛细胞被完全挤出网状板,基底回和第三回耳蜗毛细胞严重消失;中药治疗30天后,80%的耳聋豚鼠的ABR反应阈恢复到30～50dB SPL,DPOAE幅值明显提高;耳蜗铺片和电镜观察显示耳蜗毛细胞数目有一定恢复,组织结构有修复现象,扫描电镜可见再生毛细胞仅出现少量纤毛,而致聋后对照组未发现此种现象;治疗60天后,耳蜗毛细胞数目明显增多,Corti器的毛细胞区有大量的增殖细胞出现,扫描电镜可见成小束的新生纤毛出现在毛细胞缺失部位,同时支持细胞大量增殖;治疗90天后,再生的静纤毛束已基本形成,尤其是耳蜗基底部位的毛细胞明显增多,听功能基本正常。结论纯中药制剂复聪汤对庆大霉素致聋豚鼠耳蜗毛细胞有一定的修复和再生作用。

复聪汤对工业噪声致聋豚鼠耳蜗毛细胞修复再生的研究

本研究用复聪汤对工业噪声致感音神经性耳聋动物进行治疗,观察其对听神经和耳蜗毛细胞的修复再生作用效果。方法:54只健康青年豚鼠听力学检查后,42只动物给予工业噪声(96-102dB SPL)10d暴露致聋,动物致聋后随机分成两组,噪声治疗组22只用纯中药制剂给予"复聪汤Ⅰ号"口服液和"复聪汤Ⅱ号"滴耳液治疗;噪声对照组20只给予同样方法口服0.9%氯化钠溶液,另有12只为正常对照组。在治疗30,60和90d后测定实验动物的听功能脑干诱发电位(ABR),畸变耳声发射(DPOAE)后,每组处死6只动物,耳蜗左侧扫描电镜观察,右侧耳蜗铺片行光镜观察和毛细胞计数。结果:实验前ABR和DPOAE测定所有受试豚鼠的听功能正常;在连续10d工业噪声暴露后,豚鼠ABR反应阈值上升到40到60 dBSPL,DPOAE幅值降低。电镜观察可见耳蜗毛细胞静纤毛折断、散乱和融合,以及中回毛细胞的损害消失;在用复聪汤口服和耳浴治疗30d后,80%的治疗组豚鼠ABR反应阈值恢复到30到40 dBSPL,DPOAE幅值有较明显提高;耳蜗铺片和电镜观察显示耳聋豚鼠的耳蜗毛细胞数目有一定恢复,组织结构有修复现象,电镜可见再生毛细胞仅出现少量纤毛,而未治疗噪声对照组未发现此种现象;治疗60d时,耳蜗毛细胞数目明显增多,Corti器的毛细胞区,有大量的增殖细胞出现,扫描电镜可见成小束的新生纤毛出现在毛细胞缺失部位,同时支持细胞大量增殖;到治疗90d时,再生的静纤毛束已基本形成,尤其是耳蜗基底部位的毛细胞明显增多,听功能已基本正常。结论:复聪汤对听力损失豚鼠耳蜗毛细胞有一定的修复和再生作用。

中药复聪汤拮抗庆大霉素耳中毒的研究

目的:用纯中药制剂复聪汤拮抗庆大霉素(GM)耳中毒性,观察对耳蜗毛细胞和听神经的保护效果。方法:选用60只健康青年豚鼠,分成GM拮抗组,GM对照组和正常对照组,每组20只。GM拮抗组动物给予GM连续肌肉注射的同时口服纯中药制剂复聪汤拮抗连续30d,GM对照组动物仅GM连续肌肉注射30d。分别在治疗30、60、90d后测定动物的听功能(ABR,DPOAE)后处死6只动物,耳蜗行扫描电镜和光镜观察及毛细胞计数。结果:在连续30d的GM注射的GM拮抗组和GM对照组ABR平均阈值上升;GM拮抗组在中药拮抗30d后,豚鼠的ABR反应阈值明显上升,DPOAE幅值有较明显降低;耳蜗铺片显示耳蜗外毛细胞(OHC)的存活数目明显下降,扫描电镜观察到耳蜗OHC大量损害消失,静纤毛束折断。在拮抗治疗60d后,耳蜗毛细胞数目明显增多;GM拮抗组到90d后的耳蜗毛细胞形态整体基本完好,并可见到支持细胞转分化为新生毛细胞现象,且听功能已基本恢复正常。结论:在注射GM的同时给予中药进行拮抗治疗,反而加重了耳蜗毛细胞的损害,而在后期的连续中药治疗可以在一定程度上促进耳蜗受损毛细胞的修复和听功能的改善。