沉默甲基转移酶样7B基因表达抑制肾母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移

目的:探讨甲基转移酶样7B(methyltransferase-like 7B,METTL7B)与肾母细胞瘤患者预后的关系,以及沉默METTL7B基因对肾母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:采用免疫组织化学法检测72例肾母细胞瘤组织及其配对的癌旁正常肾组织中METTL7B的表达情况;蛋白质印迹法检测人肾母细胞瘤SKNEP-1细胞和正常肾上皮细胞系(PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012)中METTL7B的表达水平。分析METTL7B与肾母细胞瘤患者临床病理特征和生存的关系,应用Kaplan-Meier法和COX比例风险回归模型分析预后相关因素。采用脂质体转染法将特异性针对METTL7B基因的siMETTL7B及阴性对照(negative control,NC)siRAN(siNC)瞬时转入SK-NEP-1细胞,然后采用蛋白质印迹法检测沉默效率;随后分别采用克隆形成实验、CCK-8法、FCM法、Transwell小室实验以及细胞划痕实验检测沉默METTL7B基因表达对SK-NEP-1细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。结果:肾母细胞瘤组织中METTL7B的表达率为68.06%(49/72),高于癌旁正常肾组织中的16.67%(12/72)(P<0.05)。与SK-NEP-1细胞相比,PCS-400-010、PCS-400-011和PCS-400-012细胞中METTL7B蛋白的表达水平均较低(P均<0.05)。METTL7B与肾母细胞瘤的美国儿童肿瘤协作组(Children’s Oncology Group,COG)分期有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径和病理分型无关(P均>0.05)。COX多因素分析结果显示,COG分期为Ⅲ~Ⅳ期、病理分型为UFH型和METTL7B高表达是肾母细胞瘤预后不良的独立影响因素(P均<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,METTL7B高表达患者的总生存时间短于METTL7B低表达患者(P<0.05)。在SK-NEP-1细胞中沉默METTL 7B基因表达后,SK-NEP-1细胞的克隆形成能力、增殖能力、侵袭能力和细胞迁移能力均受到明显抑制(P均<0.05),而细胞凋亡率明显提高(P<0.05)。结论:METTL7B与肾母细胞瘤分期和不良预后相关。沉默METTL7B基因表达可抑制肾母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,并促进其凋亡。