白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株基因组中CYP6基因片段的分离与鉴定

目的 获得白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株ＣＹＰ６ 基因家族中某个成员的一个基因片段。方法 根据家蝇ＣＹＰ６Ａ１、ＣＹＰ６Ｄ１ 以及致倦库蚊ＣＹＰ６Ｅ１ 同源区氨基酸序列，设计１ 对简并引物，进行ＰＣＲ，获得一与设计的细胞色素Ｐ４５０ 基因片段大小相符合的基因片段。将该片段与ｐＵＣ１９ 质粒重组，并克隆至ＪＭ１０９ 大肠杆菌中，经筛选后测序；将推导的氨基酸序列进行同源性分析，并用ＰＣ／ＧＥＮＥ软件绘制系统树。结果 获得了１ 条长２４８ｂｐ 的核酸序列；所得序列与昆虫ＣＹＰ６ 家族的同源性在３４－２ ％ ～４４－３％ 之间，而与ＣＹＰ４ 家族同源性较低，与ＣＹＰ４Ｃ１ 、ＣＹＰ４Ｄ１、ＣＹＰ４Ｄ２ 同源性分别为２２－１％ 、２９－５ ％ 和２７－６ ％ ；所绘制的系统树显示出与同源性分析相一致的结果。结论 该序列为ＣＹＰ６ 家族中某一成员的基因片段。