生理学教学改革初探

生理学作为医学专业的一门基础性课程,是高等医学院校医学教学的重要内容。由于生理学与其他医学课程紧密连接的特点,因而学好生理学是学好其他学科的基础。本文主要以现阶段医学院校生理学教学为基础,对如何提高高校生理学教学水平进行全面分析,从提高教师的教学水平、改革完善生理学教学内容,合理利用多媒体进行实验教学、紧扣临床实践进行理论教学等角度对生理学的教学改革进行初步探讨,以期提高高校生理学的教学质量。

银杏叶提取物对高同型半胱氨酸血症血管内皮NF-κBp65、iNOS、MCP-1表达影响的实验研究

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对高同型半胱氨酸血症(HHcy)、血管内皮核转录因子(NF-κBp65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的干预作用。方法雄性Wistar大鼠51只随机分为空白对照组、模型组、叶酸组和银杏叶4组,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定血清同型半胱氨酸(Hcy)水平;免疫组化法观察MCP-1、iNOS、NF-κBp65的表达,HE染色观察主动脉组织形态学变化。结果模型组血清Hcy水平明显高于空白对照组(P<0.01)。模型组内皮细胞内NF-κBp65、iNOS及内皮下MCP-1呈较多棕黄色颗粒的表达,银杏叶组和叶酸组则呈较少棕黄色颗粒表达,空白对照组只有极少量棕黄色颗粒的表达。结论GBE可能通过减少HHcy主动脉内皮细胞NF-κBp65、iNOS及MCP-1表达,明显改善血管内皮功能,延缓HHcy动脉粥样硬化的进程。

后处理减轻心肌缺血/再灌注损伤与HIF-1α-iNOS-cGMP通路激活的关系

目的 探讨后处理减轻缺血/再灌注所致的心肌损伤效应是否与低氧诱导因子-1α （HIF-1α）及其下游通路有关.方法 建立大鼠心肌缺血/再灌注及后处理模型,检测心肌组织中HIF-1α及其下游基因诱导性一氧化氮合酶（iNOS）的表达情况及cGMP的含量.结果 后处理缩小缺血/再灌注所致的心梗面积[（27.30±4.16）%比 （36.00±5.29）%,P＜0.01],减少心肌细胞凋亡（Caspase 3比活性：（1.85±0.50）比（3.79±0.64）,P＜0.01）,上调心肌组织中HIF-1α表达[（5.76±0.55） 比（2.85±0.13）,P＜0.01）的同时,提高了iNOS的表达及其cGMP的含量.预先给予HIF-1α脯氨酸羟化酶抑制剂DMOG使后处理心肌组织中HIF-1α表达进一步上调后,iNOS的表达及cGMP含量随之增加,同时后处理减轻心肌损伤的效应[心梗面积：（17.95±2.00）% 比 （27.30±4.16）%,P＜0.01; Caspase3比活性：0.43±0.13比1.85±0.50,P＜0.01]也进一步增强.结论 后处理减轻缺血/再灌注所致心肌损伤的效应可能与其激活心肌组织中HIF-1α-iNOS-cGMP通路有关.

缺血后处理降低高胆固醇血症大鼠心肌对缺血/再灌注损伤的易感性及其机制

目的:探讨缺血后处理对高胆固醇血症基础上发生的心肌缺血/再灌注损伤的影响及其可能的机制。方法:建立食源性高胆固醇血症大鼠模型,运用TTC染色、酶活性检测等方法测定缺血/再灌注所致的心肌损伤,用实时定量RT-PCR方法检测心肌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA水平,用Western blot方法检测HIF-1α蛋白水平。结果:高胆固醇血症加重了缺血/再灌注造成的心肌损伤,而缺血后处理显著缩小了高胆固醇血症大鼠缺血/再灌注所致的心梗面积,降低了血清肌酸激酶(CK)的活性,减少了心肌细胞凋亡。同时,缺血后处理提高了高胆固醇血症大鼠缺血心肌组织中HIF-1α的蛋白水平。结论:缺血后处理可以降低高胆固醇血症大鼠心肌对缺血/再灌注损伤的敏感性,其效应与心肌组织中HIF-1α的蛋白水平存在着相关性。

连翘干叶片和鲜叶片DNA提取方法和质量比较研究

目的探讨三种DNA提取方法对连翘干叶片和鲜叶片DNA质量的影响,比较干叶片和鲜叶片DNA提取质量。方法采用常规CTAB法、高盐低pH法和新改良CTAB法提取连翘干叶片和鲜叶片DNA,进行A260/A280测定、琼脂糖凝胶电泳检测和RAPD扩增分析。结果新改良CTAB法提取的连翘干叶片和鲜叶片DNA的A260/A280比值在1.8～2.0之间,电泳条带清晰无拖尾,选用随机引物(S7)对上述DNA样品进行RAPD扩增,可获得具有一定多态性扩增谱带。对连翘干叶片和鲜叶片DNA样品综合比较,结果显示由干叶片获得的DNA质量高于鲜叶片。结论新改良CTAB法是一种分离高质量完整DNA的简便、快速方法,该方法得到的干叶片DNA质量较鲜叶片更适合下一步分子生物学研究。

低氧诱导因子-1α在后处理心肌保护效应中的作用

目的 探讨后处理减轻心肌缺血/再灌注损伤的效应与低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的关系.方法 建立大鼠心肌缺血/再灌注及后处理模型,以心肌梗死面积、乳酸脱氢酶（LDH）活性来反映心肌的损伤程度,运用Western blot、real time-PCR等方法检测心肌组织中HIF-1α的表达情况,以探讨其是否参与了后处理的心肌保护效应.结果 后处理缩小了缺血/再灌注所致的心梗面积,降低了血清LDH活性,同时上调了心肌组织中HIF-1α的表达.预先给予HIF-1α脯氨酸羟化酶抑制剂DMOG使HIF-1α表达上调后,后处理减轻心肌损伤的效应进一步增强.结论 后处理减轻缺血/再灌注所致心肌损伤的效应可能与其上调心肌组织中HIF-1α的蛋白表达有关.

三个环己醇类衍生物镇痛活性的研究

目的 :本文对人工定向合成的三个胺基环己醇类衍生物 Fs- 812 5、Fs- 82 0 6、Fs- 870 2的镇痛活性进行研究 ,以期获得定向设计高效非成瘾性镇痛药物的可靠科学依据。方法 :用热板测痛法测定给药前和给药后 5～ 10 m in内的痛阈值 ,以 ED5 0值为比较对象 ,研究三个环己醇类衍生物对小白鼠的镇痛活性。结果 :1脑室给药 (ic)的镇痛 ED5 0 值显示 :Fs- 870 2 (ED5 0 值为1.8± 0 .6 2 ug· kg- 1 )的镇痛活性最强 ,而 Fs- 82 0 6略强于 Fs- 812 5 ,且二者无显著差别。 2腹腔给药 (ip)的 ED5 0 值。显示 Fs- 870 2镇痛活性最强 ,Fs- 812 5次之 ,Fs- 82 0 6最弱。 3ic/ip的比值提示 :Fs- 812 5的比值最大 ,脂溶性最强 ,最易通过血脑屏障 ,Fs- 870 2次之 ,Fs- 82 0 6的比值最小 ,最难通过血脑屏障。 4与吗啡的镇痛活性相比 ,Fs- 870 2为吗啡的 40倍 ,Fs-812 5和 Fs- 82 0 6都约为吗啡的 10倍。 5与吗啡的镇痛作用持续时间相比 ,Fs- 870 2最长 ,Fs- 82 0 6次之 ,Fs- 812 5最短。

低氧后处理诱导的低氧诱导因子-1α表达上调减轻H9c2心肌细胞低氧/复氧损伤

本文旨在探讨低氧后处理(hypoxic postconditioning)对低氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)所致的心肌细胞损伤以及低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响,并分析二者之间可能的关系。利用H9c2心肌细胞株建立低氧/复氧和低氧后处理模型,通过测定细胞存活率、细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性及caspase-3活性来观察低氧/复氧造成的H9c2细胞的损伤,用Westernblot检测H9c2细胞内HIF-1α的蛋白水平,用real-timePCR检测细胞内HIF-1α的mRNA水平。结果显示,低氧后处理提高了低氧/复氧H9c2细胞的存活率,降低了LDH及caspase-3活性。同时,低氧后处理增加了H9c2细胞内HIF-1α的蛋白水平。预先利用HIF-1α脯氨酸羟化酶抑制剂DMOG上调HIF-1α的蛋白水平后,由低氧/复氧导致的H9c2细胞的损伤明显减轻,其效应与低氧后处理完全一致。对H9c2细胞内HIF-1α蛋白水平与细胞存活率进行相关性分析,结果显示二者呈显著正相关(r=0.743,P<0.01);而运用siRNA方法抑制细胞内HIF-1α基因表达后,显著削弱了低氧后处理减轻低氧/复氧细胞损伤的效应。以上结果提示,HIF-1α表达上调是低氧后处理减轻细胞低氧/复氧损伤的机制之一。