HPLC法测定保健食品中核苷酸的含量

本文建立了保健食品中5种核苷酸含量的液相检测方法。采用50 ℃热水超声浸提,耐水性C_(18)色谱柱分离,流动相为0.01 mol·L_(-1)磷酸二氢钾(pH=4.8)∶甲醇=97∶3,在254 nm条件下测定。结果表明,在5~100 μg·mL_(-1)线性良好,相关系数大于0.999,平均回收率在96.2%~104.7%,重复性RSD为0.26%~1.06%。该方法操作简便、结果准确、重复性好,可用于保健食品中核苷酸含量的测定。

保健食品中叶黄素总量的高效液相色谱分析测定

建立了一种保健食品中叶黄素总量的高效液相色谱分析方法。采用乙醇溶液分散溶解,在碱性溶液中皂化成游离叶黄素,再用有机溶剂萃取,0.1%BHT乙醇溶液定容,经C18色谱柱分离,采用高效液相色谱法外标法定量。结果表明,在4μg/mL~50μg/mL的范围内线性良好,得到回归方程为y=95570.5x-164969,相关系数为0.9994,精密度RSD为0.33%,重复性RSD为1.67%,加标回收率在102.10%~103.91%之间。该方法准确可靠,能用于保健食品中叶黄素总量的测定。

枸杞中30种禁用农药残留的LC-MS/MS检测分析

建立了液相色谱-串联质谱法同时测定枸杞中30种禁用农药残留的分析方法。通过比较2020年版药典规定的5种供试品制备的方式,最终选择HLB固相萃取法进行前处理,采用LC-MS/MS多反应监测模式(MRM)分段采集,基质外标法定量。结果显示,30种禁用农药在5 ng/mL~100 ng/mL (以甲胺磷计)范围内线性关系良好,相关系数>0.990;30种农药的方法检出限和定量限分别在0.000 04 mg/kg~0.002 68 mg/kg和0.000 1 mg/kg~0.008 1 mg/kg之间,平均加标回收率72.12%~128.40%;该方法精密度RSD 0.2%~8.6%,重复性RSD 1.4%~9.0%,稳定性RSD 1.3%~9.4%。该方法适用于枸杞中30种禁用农药残留的检测分析。

基于糖特征图谱及免疫细胞活性研究的不同产地黄芪的质量评价

通过建立黄芪多糖和单糖糖谱,结合技术成熟的细胞免疫活性实验,建立以多糖为质控指标的黄芪品质评价方法。本研究采用高效液相色谱仪(HPLC)建立黄芪总多糖和单糖特征图谱,利用SIMCA软件和SPSS软件对数据分别进行多元统计分析和聚类分析以区分不同产地及不同种植方式的蒙古黄芪,并通过小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验进行活性评价。结果表明山西浑源仿野生黄芪多糖含量和增强巨噬细胞吞噬活性的能力较高于移栽芪。山西浑源、山西五寨和甘肃陇西的黄芪多糖具有相似的分子量分布,但每个部分的峰面积占总峰面积的百分比具有明显差异,山西黄芪多糖中分子量为10 kDa左右的部分高于甘肃黄芪,PCA显示可以将山西黄芪和甘肃黄芪区分开。三者都是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和半乳糖醛酸5种单糖组成的。但3个产地的黄芪多糖(APS)具有不同的单糖物质的量比。PCA显示可以将3种不同的蒙古黄芪区分开。本研究采用了将糖谱技术与APS对细胞免疫功能的影响相结合的方法为不同产地及不同种植方式黄芪的品质评价及质量控制提供了依据。

注射用黄芪多糖研究进展与二次开发思路

注射用黄芪多糖(国药准字Z20040086)是20世纪90年代初山西省中医药研究院根据山西省黄芪资源优势研发的中药静脉用粉针剂,其采用先进的生产工艺,截留得到黄芪多糖的有效部位(阿拉伯半乳聚糖混合物),临床上用于放化疗后病人血象的改善。然而,受多糖分离纯化的技术瓶颈且结构难于精准测定的困难,导致其作用机制并不明确,风险不易控制。近年来,多糖受体理论研究成果表明多糖在与蛋白受体结合时,仅是多糖分子中的寡糖片段与受体相结合,多糖分子中也存在1种或多种寡糖片段'活性中心'。因此将多糖降解为寡糖,从寡糖水平研究多糖的活性中心,为突破多糖结构研究技术瓶颈提供了新策略。因此该文对注射用黄芪多糖的研究现状及多糖受体理论等进行综述,结合实际成功案例,提出注射用黄芪多糖的二次开发思路。研究结果将为中药多糖的新药研发奠定物质基础,为多糖类药物质量控制等国际性难题的解决提供依据,同时为糖生物学深入研究提供分子模型,丰富多糖受体理论。

基于多糖受体理论的黄芪多糖质量控制研究思路

黄芪是我国常用的大宗中药材,具有很高的药用及食用价值。其化学成分主要包括皂苷类、黄酮类、多糖类及氨基酸类等。其中黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)作为黄芪的主要活性成分因其非专属性和可控性不强等问题,未能作为质控指标评价黄芪种质资源。多糖受体理论的提出和应用为解决多糖类药品质控的国际性难题提供了新思路。综述了近年来黄芪多糖质量控制与多糖受体理论的研究进展,并提出了黄芪寡糖活性中心的质控研究思路。

基于部分酸水解寡糖特征图谱及免疫活性评价的不同产地黄芪的品质比较

目的比较不同产地的蒙古黄芪多糖(APS)部分酸水解产物寡糖特征图谱及免疫活性差异,建立以寡糖混合物为指标的黄芪品质评价方法。方法以黄芪多糖为研究对象,首先通过正交试验选择了最佳部分酸水解的条件,将多糖水解成可供分析的寡糖,建立基于部分酸水解-亲水作用色谱的黄芪寡糖特征图谱,利用SIMCA软件对数据进行多元统计分析以区分不同产地的蒙古黄芪,采用亲水作用色谱与质谱联用对黄芪多糖部分酸水解产物进行结构表征,并通过小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验进行活性评价。结果通过正交试验得到的最佳水解条件为温度90℃、三氟乙酸浓度1 mol/L,水解时间1 h。黄芪寡糖特征图谱的PCA结果显示,可以将3种不同的蒙古黄芪区分开。质谱解析可知3种不同的黄芪多糖均主要为1→4连接的线性葡聚糖,水解得到聚合度3~8的葡寡糖。山西浑源仿野生黄芪多糖的部分酸水解产物增强巨噬细胞吞噬活性的能力较高于移栽芪且高于未水解的总黄芪多糖。结论表明基于部分酸水解-亲水作用色谱的黄芪寡糖特征图谱及对细胞免疫功能影响差异可为不同产地及不同种植方式的蒙古黄芪进行品质评价,也是对黄芪质量评价方法的重要补充。同时对其他中药多糖的表征具有一定的启蒙作用。