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基于多靶标质粒分子的转基因大豆快速筛查方案
被引量:
1
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作者
史宗勇
刘璇
+8 位作者
许冬梅
李夏莹
陈子言
梁晋刚
王颢潜
张雨琪
温洪涛
张秀杰
高建华
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第11期1540-1554,共15页
随着我国批准进口和自主研制的转基因大豆转化体数量不断增加,亟需建立覆盖全面、检测靶标数量较少且符合国情的快速筛查方案。另外,为了控制检测工作量,还需构建对应的多靶标质粒(multi-targets plasmid,MTP)分子,作为大豆转基因成分...
随着我国批准进口和自主研制的转基因大豆转化体数量不断增加,亟需建立覆盖全面、检测靶标数量较少且符合国情的快速筛查方案。另外,为了控制检测工作量,还需构建对应的多靶标质粒(multi-targets plasmid,MTP)分子,作为大豆转基因成分检测的阳性物质。本文通过收集整理相关转化体的分子特征信息,获得了29种转基因大豆独立转化体的外源转化元件信息。全面分析其组成情况及使用频率,同时结合我国转基因检测相关标准方法,从而确定一套新的筛查方案。该方案包括8个检测靶标,CaMV 35S启动子(P-35S)、NOS终止子(T-nos)、耐除草剂基因pat、E9终止子(T-E9)、抗虫基因cry1Ac、AHAS启动子(P-AHAS)、pinⅡ终止子(T-pinⅡ)和DP305423转化体的特征序列,以及1个大豆内标准基因Lectin。通过这9个靶标序列的检测,可全面筛查上述29种转基因大豆独立转化体。本文将其称为转基因大豆筛查的"8+1"方案。将这9种靶标的检测序列串联并接入pUC18质粒,获得MTP分子pDDSC-1910。为了验证该分子作为阳性物质的适用性,以其为模板,对9种靶标进行定性PCR分析,结果均能获得预期的特异性扩增产物,且表现出较高的灵敏度。因此,本文建立了一个覆盖全面的转基因大豆筛查新方案,并成功构建了相应的MTP分子作为阳性物质,为转基因大豆的高效筛查和检测工作提供便利。
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关键词
转基因大豆
筛查
外源元件
阳性物质
质粒
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题名
基于多靶标质粒分子的转基因大豆快速筛查方案
被引量:
1
1
作者
史宗勇
刘璇
许冬梅
李夏莹
陈子言
梁晋刚
王颢潜
张雨琪
温洪涛
张秀杰
高建华
机构
山西农业大学生命科学学院生物信息系
农业
农村部农作物生态环境安全监督检验测试中心(太原)
农业
农村部科技发展中心
黑龙江
农业
科学
院农产品质量安全研究所
山西
农业
大学
生命科学
学院
生物
科学
系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第11期1540-1554,共15页
基金
国家科技重大专项(No.2018ZX08012001-009)资助。
文摘
随着我国批准进口和自主研制的转基因大豆转化体数量不断增加,亟需建立覆盖全面、检测靶标数量较少且符合国情的快速筛查方案。另外,为了控制检测工作量,还需构建对应的多靶标质粒(multi-targets plasmid,MTP)分子,作为大豆转基因成分检测的阳性物质。本文通过收集整理相关转化体的分子特征信息,获得了29种转基因大豆独立转化体的外源转化元件信息。全面分析其组成情况及使用频率,同时结合我国转基因检测相关标准方法,从而确定一套新的筛查方案。该方案包括8个检测靶标,CaMV 35S启动子(P-35S)、NOS终止子(T-nos)、耐除草剂基因pat、E9终止子(T-E9)、抗虫基因cry1Ac、AHAS启动子(P-AHAS)、pinⅡ终止子(T-pinⅡ)和DP305423转化体的特征序列,以及1个大豆内标准基因Lectin。通过这9个靶标序列的检测,可全面筛查上述29种转基因大豆独立转化体。本文将其称为转基因大豆筛查的"8+1"方案。将这9种靶标的检测序列串联并接入pUC18质粒,获得MTP分子pDDSC-1910。为了验证该分子作为阳性物质的适用性,以其为模板,对9种靶标进行定性PCR分析,结果均能获得预期的特异性扩增产物,且表现出较高的灵敏度。因此,本文建立了一个覆盖全面的转基因大豆筛查新方案,并成功构建了相应的MTP分子作为阳性物质,为转基因大豆的高效筛查和检测工作提供便利。
关键词
转基因大豆
筛查
外源元件
阳性物质
质粒
Keywords
genetically modified soybean
screening
exogenous elements
positive molecule
plasmid
分类号
S565.1 [农业科学—作物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
基于多靶标质粒分子的转基因大豆快速筛查方案
史宗勇
刘璇
许冬梅
李夏莹
陈子言
梁晋刚
王颢潜
张雨琪
温洪涛
张秀杰
高建华
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
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职称材料
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