细胞周期蛋白K促进食管鳞癌细胞增殖的机制研究

目的:探讨细胞周期蛋白K(CCNK)促进食管鳞状细胞癌(ESCC)发生发展的机制。方法:对中国ESCC高发区155例患者的转录组数据及GSE53625数据库进行CCNK基因差异表达分析;通过转染慢病毒分别在KYSE150、KYSE30及KYSE180细胞中构建CCNK基因稳定敲减(CCNK-SH)和阴性对照(NC)细胞株;利用集落形成实验和CCK-8法检测敲减CCNK基因对ESCC细胞增殖的影响;应用流式细胞术检测敲减CCNK基因对ESCC细胞周期的影响;分析155例ESCC患者转录组数据,对CCNK差异表达基因进行信号通路富集;应用免疫荧光染色检测DNA损伤的指标γ-H2AX;分析155例ESCC患者转录组数据和RT-qPCR实验验证CCNK基因与DNA损伤修复相关基因表达的情况。结果:CCNK基因在ESCC组织中高表达(P<0.01);与NC组相比,CCNK-SH组细胞增殖和集落形成能力显著降低(P<0.01);敲减CCNK基因能够将ESCC细胞阻滞于G2/M期(P<0.01);免疫荧光染色结果显示,与NC组相比,CCNK-SH组γ-H2AX信号显著增强(P<0.01);CCNK基因表达与DNA损伤相关基因存在显著相关性。结论:CCNK可能通过DNA损伤修复机制参与细胞周期调控,从而影响ESCC细胞的增殖。