非酒精性脂肪性肝病的病理改变与血清铁蛋白和血清铁含量变化关系的meta分析

目的 系统评价非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的存在及病理改变与血清铁蛋白和血清铁含量变化的关系。方法 检索PubMed、中国知网、维普、万方、Cochrane图书馆等数据库,收集从建库至2021年12月发表的NAFLD的存在及病理改变与血清铁蛋白和血清铁含量变化的关系的中英文文献。对文献进行二次筛选、质量评价及数据提取,采用Stata 12.0软件进行meta分析。结果 共纳入32篇文献,合计4 177例患者。Meta分析结果显示:与对照组相比,NAFLD患者血清铁蛋白(SMD=0.93,95%CI:0.85~1.01,P=0.000)和血清铁(SMD=0.57,95%CI:0.37~0.76,P=0.000)含量较高;与单纯性脂肪肝患者相比,非酒精性脂肪性肝炎患者血清铁蛋白(SMD=0.59,95%CI:0.41~0.78,P=0.000)含量较高,而血清铁(SMD=0.14,95%CI:0.00~0.29,P=0.057)含量两者差异无统计学意义。结论 NAFLD的存在与血清铁蛋白和血清铁含量增多具有相关性,并且NAFLD病理改变越严重,血清铁蛋白和血清铁含量越高。因此,血清铁蛋白和血清铁在NAFLD进展中的因果作用及NAFLD的发病机制值得进一步研究及临床验证。

琥珀酸脱氢酶抑制剂对内毒素血症大鼠心肌组织内琥珀酸代谢和炎性损伤的影响

目的探讨琥珀酸脱氢酶抑制剂对内毒素血症大鼠心肌组织内琥珀酸代谢和炎性损伤的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠40只,体质量200~220 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=10):正常对照组(C组)、琥珀酸脱氢酶抑制剂(丙二酸二甲酯)对照组(DC组)、内毒素血症组(E组)和抑制剂+内毒素血症组(DE组)。E组和DE组腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)20 mg/kg建立内毒素血症模型,C组和DC组给予等容量生理盐水。LPS处理4 h后,DC组和DE组大鼠腹腔注射琥珀酸脱氢酶抑制剂160 mg/kg,C组和E组给予等容量生理盐水。采用ELISA检测血清肌钙蛋白I(cTnI)浓度以及心肌组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的含量。采用琥珀酸含量检测试剂盒检测心肌组织内琥珀酸的含量。采用Western blot法和免疫荧光法检测琥珀酸脱氢酶的表达。采用Western blot检测心肌组织核因子κB抑制蛋白-α(inhibitor of NF-κB,IκB-α)磷酸化程度和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达。结果与C组比较,E组和DE组大鼠血清cTnI浓度、心肌组织琥珀酸、琥珀酸脱氢酶、IκB-α磷酸化程度、HIF-α、TNF-α和IL-1β水平显著升高(P<0.05)。与E组比较,DE组大鼠血清cTnI浓度及心肌组织琥珀酸、IκB-α磷酸化程度、HIF-α、TNF-α和IL-1β水平显著降低(P<0.05)。结论内毒素血症大鼠心肌组织内琥珀酸和琥珀酸脱氢酶含量显著升高,抑制琥珀酸脱氢酶活性可有效降低琥珀酸的堆积,进而可能通过抑制NF-κB和HIF-1α通路降低心肌组织内炎性细胞因子的产生。

miR-154-5p调控CUL2对子宫颈癌裸鼠模型的抑制作用研究

目的探讨微小RNA 154-5p(miR-154-5p)调控枯灵素2(CUL2)对子宫颈癌裸鼠模型的抑制作用。方法(1)采用慢病毒转染技术,建立并筛选稳定过度表达miR-154-5p的子宫颈癌SiHa细胞株(miR-154-5p-OE组),以转染慢病毒空载体的SiHa细胞作为对照组(miR-154-5p-CO组),实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测两组细胞中miR-154-5p和CUL2 mRNA的表达。将两组SiHa细胞悬液接种于裸鼠皮下,建立裸鼠皮下移植瘤模型,测量移植瘤体积。49 d后处死miR-154-5p-OE组和miR-154-5p-CO组裸鼠,剥离移植瘤,采用qRT-PCR技术、蛋白印迹(western blot)法和免疫组化法检测两组裸鼠移植瘤组织中miR-154-5p及CUL2 mRNA和蛋白的表达。(2)建立并筛选miR-154-5p与CUL2同时稳定过度表达的SiHa细胞株(CUL2-OE组),以转染过度表达miR-154-5p载体和空基因序列载体的SiHa细胞作为对照组(CUL2-CO组),进行功能回复实验,qRT-PCR技术检测两组细胞中CUL2 mRNA的表达。将两组SiHa细胞悬液接种于裸鼠皮下,建立裸鼠皮下移植瘤模型,测量移植瘤体积。(3)将miR-154-5p-CO组和miR-154-5p-OE组带有绿色荧光蛋白(GFP)的SiHa细胞悬液注射于裸鼠尾静脉内,建立裸鼠转移瘤模型,60 d后处死裸鼠,解剖肝、脾、肺、肾、子宫,采用小动物活体光学成像系统检测各器官的GFP信号强度。结果(1)与对照miR-154-5p-CO组SiHa细胞比较,miR-154-5p-OE组SiHa细胞中miR-154-5p表达水平显著升高(分别为1.00±0.23、22.30±16.29;t=3.92,P=0.001),CUL2 mRNA表达水平显著下降(分别为1.00±0.95、0.62±0.07;t=9.67,P<0.001)。接种49 d后,与对照miR-154-5p-CO组裸鼠比较,miR-154-5p-OE组裸鼠移植瘤体积显著缩小[分别为(554.6±108.3)、(84.9±47.4)mm3;t=4.17,P<0.001];miR-154-5p-OE组裸鼠移植瘤组织中miR-154-5p表达水平显著升高(P<0.001),CUL2 mRNA和蛋白的表达水平均显著下降(P均<0.01)。(2)功能回复实验中,与CUL2-CO组SiHa细胞比较,CUL2-OE组SiHa细胞中CUL2 mRNA表达水平显著升高(分别为1.00±0.17、6.24±0.88;t=10.13,P<0.001)。接种31 d后,与对照CUL2-CO组裸鼠比较,CUL2-OE组裸鼠移植瘤体积显著增大[分别为(4.5±0.4)、(18.4±6.5)mm^(3);t=2.64,P=0.020]。(3)60 d后处死肿瘤转移模型裸鼠,空白组、miR-154-5p-CO组、miR-154-5p-OE组裸鼠的肝、脾、肺、肾、子宫的GFP信号强度分别比较,差异均有统计学意义(P均<0.001);且与miR-154-5p-CO组相比,miR-154-5p-OE组裸鼠的肺、子宫的GFP信号强度均显著下降(P均<0.001)。结论miR-154-5p可通过靶向调控CUL2在裸鼠体内发挥抑制子宫颈癌的作用,miR-154-5p可作为子宫颈癌治疗的潜在靶点。