不同技术路线研发新型冠状病毒疫苗的特性和研究进展

席卷全球的新型冠状病毒肺炎(coronavirusdisease2019,COVID19,以下简称新冠肺炎)疫 情 给 全 人 类 的 生命健康安全带来巨大威胁,传播速度快、感染率高 是 新 冠 肺 炎 的 典 型 特 点,据 历 史 经 验,及 时 接 种 疫 苗 可 以 有 效 阻止疫情传播。在疫情爆发后,积极有效地启动 研 发 新 型 冠 状 病 毒 (SARSCoV2)疫 苗 成 为 全 球 科 学 家 及 科 研 机 构的共同目标。在疫苗研发和 设 计 的 过 程 中,一 些 经 获 批 使 用 的 SARSCoV2 疫 苗 具 有 较 好 的 安 全 性 和 免 疫 原 性,其临床试验已证实了具有良好的保护效 力。 根 据 SARSCoV2 疫 苗 研 发 的 技 术 路 线 不 同,疫 苗 主 要 包 括 灭 活 疫苗(inactivatedvirusvaccine)、重组蛋白疫苗(recombinantproteinvaccine)、病毒载体疫苗(viralvectorbasedvac cine)和核酸疫苗(nucleicacidvaccine)等。本文对各类疫苗优缺点和研制进展进行综述,阐述 SARSCoV2疫 苗 所 面临的一些问题,为疫苗后续的改进提供有益借鉴。

SARS-CoV-2重组S1和S蛋白疫苗诱导保护性免疫的研究

目的:评价新型冠状病毒(SARS-CoV-2)重组S1蛋白和S蛋白疫苗对SARS-CoV-2的免疫保护效果。方法:将SARS-CoV-2重组S1蛋白和S蛋白分别联合氢氧化铝佐剂以0.1μg/只、1μg/只、5μg/只、10μg/只不同剂量接种6~8周BALB/c纯系健康雌性小鼠。第二次免疫后采血通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IgG抗体效价,通过假病毒中和试验比较免疫小鼠血清对SARS-CoV-2野生型株(WT)、英国株(B.1.1.7)、巴西株(P.1)、印度株(B.1.617.2)、Mu毒株(B.1.621)和南非株(501Y.V2-1)六种假病毒毒株中和活性效价,取脾细胞通过酶联免疫斑点技术(ELISpot)检测免疫小鼠的细胞免疫水平。结果:SARS-CoV-2重组S和S1蛋白都能诱导小鼠产生较强的IgG抗体水平。免疫S1蛋白的小鼠血清对SARS-CoV-2野生型株、英国株、巴西株有明显的中和活性,免疫S蛋白的小鼠血清除了对SARS-CoV-2野生型株、英国株、巴西株有明显中和活性之外,对印度株也有明显的中和活性,两种蛋白质免疫的小鼠血清均对野生型株中和效果最强。S蛋白免疫的小鼠脾细胞能够显著诱导出γ干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)的产生。S蛋白诱导产生的IgG抗体、中和抗体、细胞免疫水平均高于S1。结论:SARS-CoV-2重组S蛋白疫苗能够诱导产生较强的保护性免疫应答。

尿毒症患者血清通过ROS-NLRP3信号通路促进人主动脉平滑肌细胞增殖参与新生内膜增生

目的通过在体外模拟慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)病理环境探讨ROS-NLRP3信号通路在CKD中对血管新生内膜增生的影响。方法体外培养人主动脉平滑肌细胞(human aortic smooth muscle cells,HASMCs),实验分为3组:正常血清对照组(NC组)、尿毒症血清处理组(CKD组)、尿毒症血清+Mito-TEMPO处理组(CKD+Mito-TEMPO组)。采用Western blot、免疫荧光和ELISA实验方法观察尿毒症血清对HASMCs表型、氧化应激水平、炎症因子表达水平以及NLRP3炎症复合体表达的影响。结果与NC组相比,经尿毒症患者血清处理后,HASMCs增殖显著增强,平滑肌肌动蛋白α(smooth muscle actinα,α-SMA)和钙调理蛋白1的蛋白表达、线粒体活性氧(mitochondrial reactive oxygen species,mtROS)水平显著增加(P均<0.05),炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-18和TNF-α的水平显著增加(P均<0.05),nod样受体蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,caspase-1)、剪切的caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白表达水平显著增加(P均<0.05),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性降低显著降低(P<0.05);而加入mtROS抑制剂后,HASMCs增殖显著降低;α-SMA和钙调理蛋白1的蛋白表达,mtROS水平,炎症因子IL-6、IL-18、TNF-α水平,NLRP3、caspase-1、剪切的caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白表达水平均显著减少(P均<0.05);SOD活性降低显著增加(P<0.05)。结论尿毒症血清通过ROS-NLRP3信号通路促进HASMCs增殖、参与新生内膜增生。