L-精氨酸对家兔生理及失血性休克后尿量的影响

NO是一种有许多生理、病理作用的气体物质,NO可扩张血管,改善肾循环,从而对尿的生成的影响及对肾功能具有保护作用。持续严重的休克可导致肾功能障碍。休克后给予补充生理盐水等措施来恢复血压,维持各种生命活动。由于 NO的底物是 L-精氨酸,本实验观察了L-Arg对家兔尿生成的影响。

miR-103通过抑制FBW7的表达促进肝癌细胞增殖

【目的】研究miR-103对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。【方法】Real time PCR方法检测miR-103在肝癌组织和细胞中的表达。将miR-103 inhibitor转染到肝癌细胞中,分为实验组(转染miR-103 inhibitor)和对照组(转染Negative Control),通过MTT实验检测肝癌细胞的增殖变化。Real time PCR和Western blotting检测转染miR-103 mimics后肝癌细胞中FBW7 mRNA和蛋白的表达变化。通过重荧光素酶报告基因实验检测转染miR-103 mimics或inhibitor后FBW7-3’UTR活性的变化。【结果】Real time PCR结果显示miR-103在肝癌组织和HepG2细胞系中均高于癌旁组织和LO2肝细胞系(P<0.05)。MTT实验结果显示,转染miR-103 inhibitor实验组肝癌细胞的存活细胞数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Real time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-103 mimics实验组肝癌细胞中FBW7的mRNA和蛋白表达水平都低于对照组.重荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染miR-103 mimics的实验组中FBW7-3’UTR报告基因活性显著降低(P<0.05);与对照组相比,转染miR-103 inhibitor的实验组中FBW7-3’UTR活性显著升高(P<0.05)。进一步实验发现,转染FBW7后能显著下调由miR-103 mimics所引起的细胞增殖作用。【结论】miR-103可以通过抑制FBW7的表达来促进肝癌细胞增殖。

MK-801降低鞘内注射强啡肽A(1-17)对福尔马林诱导的大鼠痛反应的增强效应

本实验用福尔马林试验在动物痛模型上观察了鞘内单纯注射生理盐水 (NS)、NMDA受体阻断剂MK 80 1、阿片受体阻断剂纳洛酮 (naloxone)、强啡肽A [DynA (1 17) ]以及先用MK 80 1或纳洛酮再注射DynA (1 17)对动物的行为痛反应的影响。大鼠后肢脚掌皮下注射福尔马林后出现的行为痛反应显示有 2个时相 ,即首先出现持续较短的第一时相和 3～ 6min后出现的持续较长的第二时相。实验结果显示 ,各组的第一时相无明显差异 ;而第二时相则有差异 :鞘内注射DynA (1 17)组第二时相痛反应持续时间 (489 5± 2 2 5s)明显较单纯鞘内注射NS组(3 44 7± 12 9s)、MK 80 1组 (3 3 1 4± 2 0 7s)和纳洛酮组 (3 5 2 5± 18 4s)长 (均为P <0 0 1) ;而先用NMDA受体阻断剂MK 80 1后再注射DynA (1 17) ,则第二时相行为痛反应的持续时间 (2 85 7± 19 4s)较单纯注射DynA (1 17)组明显缩短 (P <0 0 1) ,但与单纯鞘内注射MK 80 1组相比无明显差异 ;先用阿片受体阻断剂纳洛酮后再注射DynA (1 17) ,则动物的第二时相行为痛反应 (473 8± 17 8s)与单纯注射DynA (1 17)组相比无明显差异 ,而与单纯注射NS组或纳洛酮组相比则明显增强 (分别为P <0 0 1)。因此本实验结果提示 :(1)在脊髓水平的DynA(1 17)

miR-143通过靶向FASN抑制肝癌HepG2细胞脂质形成

目的研究miR-143对肝癌Hep G2细胞脂质形成的影响及其分子机制。方法应用qRT-PCR方法检测miR-143在临床肝癌和癌旁组织以及肝癌细胞系和正常肝细胞系中的表达。通过油红O染色实验检测miR-143对肝癌细胞脂质形成的影响。Western blotting检测miR-143对肝癌细胞中脂肪酸合成酶(FASN)表达的影响。通过报告基因实验检测miR-143及其抑制子对报告基因载体FASN-CDS活性的影响。结果 qRTPCR结果表明在临床肝癌组织和Hep G2细胞中miR-143的表达显著低于癌旁组织和Chang liver肝细胞系(P<0.01)。油红O染色实验结果显示,miR-143能显著降低肝癌细胞中脂质的形成。qRT-PCR和Western blotting结果证实,miR-143可以显著下降FASN的mRNA和蛋白表达水平。报告基因检测结果表明,在Hep G2细胞中miR-143可以显著降低FASN-CDS报告基因的活性(P<0.01);相反,miR-143抑制子可以显著升高FASN-CDS的活性(P<0.01)。在Hep G2细胞中miR-143抑制子可以上调FASN的表达并促进脂质形成。结论 miR-143可以通过抑制FASN的表达阻碍肝癌细胞脂质形成。

脊髓背角中强啡肽A表达的上调对福尔马林引起的大鼠炎性水肿的影响

目的:利用鞘内注射前强啡肽mRNA的反义寡聚核苷酸,观察由福尔马林引起的大鼠后脚炎性水肿程度的变化,来证明脊髓背角中强啡肽(dynorphin,Dyn)A的量可能影响外周炎症反应的大小。方法:在3组成年Wistar大鼠(每组5只)预先在鞘内分别注入对抗前强啡肽mRNA的反义寡聚核苷酸(AS-ODN)、生理盐水(NS)、和反序的反义寡聚核苷酸(RS-ODN);4h后,再给各组动物一侧后脚掌皮下注射福尔马林(0.5%,100μl),并分别在注射后的1h、2h、3h三个时间点,各以5只动物先检查后脚掌直径,以福尔马林注射前的直径为对照,算出直径增加的百分数,作为炎性水肿变化的指标,并在脚掌检测后立即处死动物作免疫组化检测,确定各时间点大鼠两侧脊髓背角浅层中DynA(1—8)免疫反应样物质的光密度值。结果:①3组动物在福尔马林注射后的3个时间点,注射侧后脚掌的炎性水肿均呈进行性的加重,但在鞘内注入AS-ODN的实验组,各个时间点的水肿程度均明显地小于注射了生理盐水和RS-ODN的两个对照组;而在两个对照组相应的各时间点之间无显著性差异。②在免疫组化检测中,可看到三组动物注射侧脊髓背角中都出现DynA(1-8)的光密度值随测定值时间推后而增加,实验组各时间点的测定值均明显地小于两个对照组相应时间点的测定值,但后两组的各相应时间点的测定值之间无显著性差异。结论:鞘内注射反义核苷酸后福尔马林引起的脊髓中强啡肽A的表达上调被阻止,并且平行地出现了局部炎性水肿发展的被阻止。

双波长比例法测定单细胞活性氧探析

目的建立双波长比例法测定单细胞活性氧的方法。方法①酶法急性分离成年大鼠心室肌细胞,用离子影像系统测定荧光信号,确定荧光强度值变化相反的两个激发光波长。②BPS-4装置灌流心肌细胞,模拟心肌缺血/再灌注模型及再灌注时应用还原型谷胱甘肽,用双波长比例法测定细胞内活性氧含量变化,验证此法。结果①荧光强度值最大和最小的激发光波长分别是:480 nm和420nm,以F480/F420的比值表示活性氧的含量。②心室肌细胞在模拟缺血期和恢复再灌注期的相对F480/F420分别为缺血前的(115.27±4.52)%和(116.99±3.99)%,在再灌注期给予GSH,则活性氧含量降为缺血前的(101.14±3.20)%。结论双波长比例法可用于测定细胞内活性氧。

L-精氨酸及谷氨酸对未成年小鼠学习与记忆功能的影响

研究了不同剂量的Ｌ精氨酸（ＬＡｒｇ）以及与谷氨酸（Ｇｌｕ）合用时对神经系统（海马区）的影响，以及ＮＯ介导谷氨酸的神经毒作用。通过观察小鼠的学习与记忆的过程，各组与正常对照组之间的被动回避反应的结果显示其嗜暗反应的潜伏期在大剂量ＬＡｒｇ与ＬＡｒｇ及Ｇｌｕ合用组明显延长，同时观察病理切片显示海马区的神经元细胞减少，神经胶质细胞增多等方面有不同程度的变化，ＮＯ作用具有浓度依赖性，大剂量有神经毒作用。

热休克蛋白32对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织抗氧化能力的影响

目的探讨热休克蛋白32(HSP32)在局灶性脑缺血再灌注损伤中的抗氧化作用。方法将36只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组,每组12只:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和锌原卟啉IX(Znpp)+缺血再灌注组(Z组)。采用右侧颈内动脉尼龙线线栓法致大脑中动脉栓塞法制备局灶性脑缺血再灌注模型。Z组在造模前经腹腔注射HSP32特异性抑制剂Znpp(45μmol/kg)。所有大鼠再灌注6 h后处死取脑,光镜下观察各组脑组织病理变化,检测脑组织中SOD活性、MDA含量和HSP32蛋白表达。结果与S组比,IR组和S组SOD显著降低(P<0.05),MDA显著升高(P<0.05);IR组HSP32蛋白的表达显著增多(P<0.05),Z组HSP32的表达与S组差异无统计学意义(P>0.05);与IR组比,Z组MDA显著升高(P<0.05),SOD显著降低(P<0.05)。结论脑缺血再灌注可以诱导热休克蛋白32的表达,使再灌注后的氧化损伤减轻。

经桡动脉冠状动脉介入术后橈动脉闭塞的相关危险因素Meta分析

目的系统评价经桡动脉途径行冠状动脉介入术(TRI)后桡动脉闭塞(RAO)危险因素,为冠状动脉介入术治疗以及术后桡动脉闭塞的预防提供临床指导。方法检索外文数据库PubMed、Embase、CochranceLibrary及中国学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库已公开发表的的关于国内外TRI术后RAO的相关危险因素的研究文献,检索时间为建库至今「根据纳入标准与排除标准选出符合要求的文献,采用Stata14.0软件进行Meta分析。结果共纳入8篇研究,3395例研究对象,TRI术后RAO的总发生率为6.65%(226/3395),Meta分析结果显示,年龄(MD=0.060,95%CI-0.258~0.378,P=0.712)、女性(0R=1.737,95%CI1.302~2.319,P<0.05)、体重指数(MD=0.008,95%CI-0.174-0.190,P=0.749)、高血压史(OR=0.722,95%CI0.353.1.477,P=0.373)、高血脂史(OR=0.793,95%CI0.629.1.505,P=0.901)、糖尿病史(0R=1.210,95%CI0.883.1.659,P=0.236)、吸烟史(0R=1.405,95%CI0.987-2.000,P=0.059)、既往CABG(OR=3.735,95%CZ0.035-402.984,P=0.581)、既往TRI(0R=1.213,95%CI0.328-4.494,P=0.772)、冠状动脉疾病(0R=1.692,95%CI1.056.2.713,P=0.029)、肌(MD=-0.033,95%CI-0.208-0.143,P=0.714)、桡动脉平均直径(MD=-0.938,95%CI-1.357-0.520,P<0.05)、6F鞘管(OR=0.904,95%CI0.549-1.488,P=0.691)、5F鞘管(0R=1.107,95%CI0.672-1.822,P=0.689)、右侧路径(OR=0.874,95%CI0.589.1.297,P=0.504)、阿司匹林(OR=1.005,95%CI0.687-1.470,P=0.980)、氯吡格雷(0R=1.206,95%CI0.768.1.893,P=0.416)、β阻滞剂(OR=0.925,95%CI0.228.3.755,P=0.913)、鞘管/棧动脉直径(MD=1.526,95%CI0.743.2.308,P<0.05)、桡动脉痉挛(OR=2.973,95%CI1.117-7.914,P=0.029)、手术时间(MD=0.277,95%CI-0.2540.813,P=0.312)、肝素用量(MD=-0.088,95%CI-0.305-0.128,P=0.424).结论TRI术后RAO的发生率与女性、冠状动脉疾病史、桡动脉平均直径、鞘管/桡动脉直径比值、橈动脉痉挛有关.

L-精氨酸对家兔尿量的影响

在以往的实验中,我们发现用L—精氨酸(Arg)对家兔尿量在生理及失血性休克后尿量各有不同程度的影响。后继续观察发现各种不同剂量的L-Arg对家兔在各种情况下的尿量影响不同,结果显示差异。

内毒素在肝胰岛素抵抗中对肝细胞线粒体功能的影响

目的研究果糖饮食及皮下注射内毒素(LPS)致大鼠肝胰岛素抵抗(IR)及内毒素血症中,LPS对肝细胞线粒体功能的影响。方法 30只SD雄性大鼠随机分为三组。对照组(NC组):普通饲料喂养;果糖组(HFD组):10%果糖水喂养;LPS组:皮下注射LPS 300μg/(kg·d)。8周糖耐量实验后,检测血浆肝酶、空腹胰岛素、LPS变化,计算IR指数;检测肝组织氧化损伤及能量代谢指标;Western blot检测肝组织胰岛素信号转导蛋白及线粒体内膜蛋白(UCP2)表达;观察肝组织病理学变化。分离培养大鼠肝细胞分为四组。NC组:DMEM培养液培养;HFD组:培养液+果糖水(4.5 g/L);LPS组:培养液+LPS(10 mg/L);果糖+LPS组(H+L组):培养液+果糖水(4.5 g/L)+LPS(10 mg/L)。20 h后,检测肝细胞线粒体功能及胰岛素信号转导蛋白表达。结果与NC组比较,HFD组与LPS组LPS、肝酶及氧化损伤产物显著升高,能量代谢异常(P<0.01),胰岛素信号转导蛋白表达降低,UCP2表达升高(P<0.01);HFD组与LPS组上述指标变化差异无统计学意义(P>0.05)。HFD组、LPS组和H+L组细胞上清液氧化损伤产物高于NC组(P<0.05或P<0.01),能量代谢异常(P<0.05),胰岛素信号转导蛋白表达下降,UCP2表达升高(P<0.05或P<0.01);各干预组之间以上指标变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论果糖饮食及皮下注射LPS致大鼠肝IR中,伴有内毒素血症。LPS可促发肝氧化应激,影响肝细胞线粒体功能,促进代谢性疾病的发生。

重组人尿激酶原联合依诺肝素治疗急性ST段抬高型心肌梗死的有效性和安全性研究

目的探讨重组人尿激酶原(pro-UK)联合依诺肝素治疗急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)的有效性和安全性。方法选取发病12 h内的STEMI患者118例作为研究组,给予pro-UK 20 mg静脉注射+30 mg静脉点滴,溶栓前30 min内静脉注射依诺肝素30 mg,15 min后皮下注射依诺肝素1 mg/kg,继以每12 h皮下注射1次至出院,最长8 d。以2012至2015年参加pro-UKⅣ期临床试验STEMI患者1851例作为对照组。观察2组间接再通率、直接再通率、出血发生率及住院期间主要心血管和死亡事件。结果研究组间接再通率85.6%,直接再通率67.6%;与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组轻微出血发生率6.78%,无严重出血发生;与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组梗死后心绞痛发生率1.69%,无再梗死、再闭塞发生;与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组病死率为4.24%,与对照组4.48%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论pro-UK联合依诺肝素治疗STEMI具有安全、简便的特点。

SCN1B基因在大鼠睾丸发育中的表达分析

目的检测大鼠睾丸发育中SCN1B基因的转录表达及定位情况,探讨在精子发生中该基因可能的作用机制。方法选取出生后第2~65天总共21个时间点的Wistar雄性大鼠,每个时间点取三只来自不同笼鼠的睾丸组织,提取总的mRNA并逆转录成cDNA,采用实时定量PCR技术检测SCN1B基因在大鼠睾丸组织中的转录表达。另选取60日龄鼠的睾丸组织,采用免疫组织化学方法观察SCN1B基因的蛋白表达定位情况。结果鼠出生第8天后SCN1B基因转录表达开始逐渐上升,在第16天达到最高值,随后到65天缓慢降低,但表达仍然较高。60日龄睾丸曲细精管中的精子细胞有阳性表达。结论大鼠睾丸组织发育的中后期,SCN1B基因的转录表达高,可能在减数分裂和精子成熟时期起着一定作用,且该基因在精子细胞中有表达。

大鼠睾丸中SNPH基因表达分析的研究

目的观察大鼠睾丸不同发育阶段SNPH基因的mRNA表达水平及蛋白分布情况,研究在精子发生中该基因所起的作用,同时也观察SNPH基因在不同组织的蛋白表达水平。方法提取大鼠中脂肪、心脏、睾丸、脑组织中的蛋白,观察SNPH基因在各组织的表达水平。取出生后21个时间点的大鼠睾丸组织,每个时间点取三只,从中提取总RNA并逆转录成cDNA,借助RT-PCR技术检测SNPH基因的转录表达水平。免疫组化分析65日龄的睾丸组织,观察SNPH蛋白的表达分布情况。结果SNPH蛋白在脑组织表达最高,其次是睾丸、脂肪,在心肌中表达最少;SNPH基因mRNA表达在第2-31天表达量少,基本不表达,从第35天开始逐渐增加,第45天表达急剧增加,到第65天转录表达最高;SNPH基因在65日龄睾丸生精小管中的精子细胞有阳性表达。结论SNPH蛋白在脂肪、睾丸、脑、心肌中都有表达。在大鼠睾丸组织发育的后期,SNPH基因的转录表达逐渐升高,因此该基因可能参与精子成熟,且主要在精子细胞中表达。

LBL与PBL相结合的教学模式在生理学教学中的应用及效果评价

目的:探讨LBL(Lecture-based Learning)结合PBL(Problem-Based Learning)教学在生理学教学中的应用及效果。方法:以山西医科大学汾阳学院2012级影像专业本科生为研究对象,学生随机分为两个教学班(A班与B班)。A班(102人)采用LBL教学,B班(42人)采用LBL结合PBL教学。其中,B班在PBL教学中分为7个小组,每组6人。课程结束后,两班采取相同试卷考试,对考试总成绩及论述题成绩比较分析,采用DREEM量表对教育环境进行评估。结果:B班论述题成绩显著高于A班(P<0.05),但两班总成绩差异无统计学意义(P>0.05);DREEM量表调查显示,B班学生的学习知觉、环境知觉、社交自我知觉、教育环境评估得分显著高于A班(P<0.05);两班对教师的知觉、学术自我知觉得分差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LBL结合PBL教学可有效改善生理学教学环境,提高教学效果。

脊髓中参与痛觉调制的物质及其研究进展

脊髓在痛觉的形成及其调制中起着重要的作用,脊髓中参与痛觉调制的活性物质十分复杂,其中有些具有促痛或镇痛作用,还有一些具有双向的调节作用。本文对脊髓尤其是脊髓背角内痛信号传递过程中所参与的活性物质及受体、作用途经、及其研究进展作了综述。一些具有镇痛作用的物质及其衍生物,是临床麻醉及治疗中常用的辅助药。如果能抑制促痛物质、或者促进镇痛物质的产生,将在炎症及病理性疼痛的治疗,以及在脊髓水平的麻醉中具有十分重要的意义。