精索静脉曲张对青春期大鼠性激素以及其睾丸受体的影响

目的:探讨精索静脉曲张(VC)对青春期大鼠睾丸组织中睾酮浓度(ITC)、血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及其睾丸雄激素受体(AR)、卵泡刺激素受体(FSHR)和黄体生成素(LHR)的影响。方法:通过部分结扎左肾静脉方法制作左侧精索静脉曲张模型(EV),雄性Wistar大鼠36只,随机分为6组,EV持续2、4、8周组和相应接受假手术的对照组,每组各6只。于造模成功后2、4、8周取实验组及对照组下腔静脉血及左侧睾丸,放射免疫法检测ITC及血清T、FSH、LH浓度,并用免疫组化方法检测其受体AR、FSHR、LHR在睾丸组织中的表达,用TUNEL法检测细胞凋亡并计算生精细胞的凋亡指数(AI)。结果:VC后2周时,各激素平均灰度值未见明显变化,实验组LHR(138.77±7.41)明显上升(P﹤0.05);4周时实验组ITC(7.11±1.74)nmol/L较对照组(9.51±1.50)nmol/L及实验组2周组(9.01±0.98)nmol/L下降(P﹤0.05),8周时实验组血清T(0.38±0.11)nmol/L及ITC(4.46±1.24)nmol/L较实验组2周组[T(1.01±0.26)nmol/L、ITC(9.01±0.98)nmol/L]、4周组[T(0.93±0.17)nmol/L,ITC(7.11±1.74)nmol/L]均有明显差异(P﹤0.05)。实验组AI[(8.74±1.79)%、(19.08±2.31)%、(30.61±1.77)%]均明显高于对照组[(5.97±0.90)%、(5.35±1.05)%、(6.28±0.89%)],各EV组生精小管的超微结构损伤也随着精索静脉曲张持续时间的增加而逐渐严重。结论:VC可降低EV大鼠ITC、血清T浓度以及其受体AR的表达,使生精细胞AI增加并影响血清FSH、LH浓度及其睾丸受体的表达。

血红素氧合酶-1在空气细颗粒物PM2.5致人脐静脉内皮细胞损伤过程中作用的实验研究

目的 通过观察活性氧（reactive oxygen species,ROS）清除剂（钛试剂,Trion）和血红素氧合酶-1 （heme oxygenase,HO-1）抑制剂（锌原卟啉,ZnPP）对空气细颗粒物PM2.5所致人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的生物作用的影响,探讨HO-1在PM2.5致细胞损伤中的作用机制.方法 复苏由上海拜力生物科技有限公司提供的人脐静脉内皮细胞株,37℃、5％ CO2条件下正常培养至细胞形成致密单层时,分别进行干预.实验分组：（1）空白对照组（对照组）：细胞正常培养24 h.（2）PM2.5染毒组（PM2.5组）：不同浓度PM2.5（200、400、800 μg/ml）培养细胞24 h,选择400 μg/ml为其有效干预浓度（后续各组如未特殊注明,默认PM2.5浓度为400 μg/ml）.（3）PM2.5＋Trion组：ROS抑制剂Trion（10μmol/L）干预细胞1h后,加入PM2.5,培养24 h.（4）PM2.5＋ZnPP组：HO-1抑制剂ZnPP（10μmol/L）干预细胞1h后,加入PM2.5,培养24 h.收集干预后的各组细胞,用MTT法比较细胞活性,逆转录聚合酶链反应法和免疫细胞荧光法分析细胞内HO-1 mRNA及蛋白表达情况,荧光探针标记法测定细胞内ROS水平,流式细胞技术测定细胞凋亡率,分光光度法测定caspase-3活性.结果 PM2.5组细胞死亡率和凋亡率均高于对照组（P均＜0.05）.PM2.5＋Tiron组细胞死亡率和凋亡率均低于PM2.5组,PM2.5＋ ZnPP组则均高于PM2.5组（P均＜0.05）.PM2.5组ROS水平高于对照组（P＜0.05）.PM2.5＋Tiron组ROS水平低于PM2.5组,PM2.5＋ZnPP组则高于PM2.5组（P均＜0.05）.PM2.5组HO-1 mRNA和蛋白表达均高于对照组（P分别＜0.05和0.01）.PM2.5＋Tiron组HO-1 mRNA和蛋白表达均低于PM2.5组,PM2.5＋ZnPP组亦均低于PM2.5组（P＜0.05或0.01）.3、6、12和24 h不同时间干预后,PM2.5组细胞caspase-3活性均高于对照组（P均＜0.05）,PM2.5＋Tiron组均低于PM2.5组（P均＜0.05）,PM2.5＋ ZnPP组则均高于PM2.5组（P均＜0.05）.结论 PM2.5可以通过增加ROS损害HUVEC,同时引起HO-1表达增加.而HO-1继发性表达增加可能参与了细胞自身抗PM2.5氧化损伤的过程.