自噬基因Beclin1对上皮性卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用

目的观察自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞株SKOV3中过表达对肿瘤细胞在体内、体外生长活性的影响。方法脂质体法将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染人卵巢癌细胞株SKOV3,MTT法分析外源性Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,流式细胞仪检测转染后肿瘤细胞的凋亡及自噬情况。将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后,接种到裸鼠皮下,观察体内致瘤活性及生长情况;免疫组化检测瘤组织Beclin1蛋白的表达。结果Beclin1在SKOV3中的过表达后抑制肿瘤细胞在体外的生长,抑制率为58.68%;pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3的凋亡率为(21.26±3.89)%,高于空质粒pcDNA3.1转染组和未转染组,差异有显著性(P<0.05);流式细胞仪检测pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3细胞MDC平均荧光强度高于pcDNA3.1转染组和未转染组。重组质粒pcDNA3.1/Beclin1使SKOV3细胞在裸鼠体内成瘤时间延长,瘤体体积及质量明显小于空质粒组和空白对照组,抑瘤率为50.27%。结论自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞SKOV3中过表达可抑制SKOV3在体内、体外的增殖,针对自噬基因Beclin1的卵巢癌基因治疗可能具有可行性。

米非司酮配伍米索前列醇用于中期妊娠引产的用药方法临床观察

目前，国内外对米非司酮配伍米索前列醇在中期妊娠引产中的用药方法及剂量仍无统一规定，均在探索之中。本院自2000年1月始，将米非司酮配伍米索前列醇用于终止13—24周妊娠，并改变单纯口服给药法为口服联合阴道给药法，取得良好效果，现报告如下。

剖宫产瘢痕妊娠9例

剖宫产瘢痕妊娠（cesarean scar pregnancy,CSP）虽较少见,但随着剖宫产率的增加,其发生率有明显增长趋势。CSP是剖宫产术后远期潜在的严重并发症.处理不当可导致大出血、子宫破裂、丧失生育能力甚至孕产妇死亡,应引起临床高度重视。笔者将我院2010-03至2013-01收治9例剖宫产瘢痕妊娠患者临床资料进行回顾性分析。

妊娠高血压综合征性心脏病46例临床分析

目的 :探讨妊娠高血压综合征 (妊高征 )性心脏病影响母儿预后的因素。方法 :回顾性分析 46例妊高征性心脏病的临床资料。结果 :妊高征性心脏病发生率为 0 .3 7% ,占同期妊高征的 4.67% ,全组无一例死亡 ,均在纠正心力衰竭后顺利结束妊娠。结论 :对于妊高征性心脏病病人需严密监护、及时治疗、选择适当分娩方式是减少并发症、降低病死率的重要措施。

吗啡对子宫内膜基质细胞增殖及ERmRNA表达的影响

目的 研究吗啡对雌激素诱导的体外培养的人子宫内膜基质细胞的增殖作用及其ERm RNA表达的影响。 方法 体外分离培养人子宫内膜腺上皮细胞和基质细胞 ,并通过免疫细胞化学的方法进行鉴定 ;将基质细胞给予 17-β雌三醇或 /和吗啡及纳洛酮干预 ,观察细胞的生长增殖情况 ;通过 RT- PCR的方法半定量分析吗啡对基质细胞的雌激素受体 ERm RNA表达的影响。 结果 第一代传代的基质细胞各组接种密度间比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。接种用药第 1、 3、 5、 7、天进行细胞计数 ,细胞数较对照组增加 ,E+Mor组细胞数较 E2 组降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。 E+M+N组与 E2 组比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;ER与内参照β- actin分别在 4 6 9bp和348bp处出现特征性条带。雌激素组、吗啡组与对照组比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,E+Mor组与对照组比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。吗啡作用 2 4 h呈剂量依赖性抑制基质细胞 ERm RNA的表达 ,3组吗啡的终浓度分别为 1× 10 - 6 m ol/ L、 1× 10 - 5mol/ L、 1× 10 - 4mol/ L ,经 Spearman等级相关检验 ,r=- 0 .94 6 ,差异有显著性 (P<0 .0 1)。 结论 外源性阿片类药物吗啡可以直接抑制雌激素对人子宫内膜基质细胞的促增殖作用 ,其机制可能是影响了雌激素?

子宫内膜异位症T_H1型与T_H2型免疫应答类型的研究

子宫内膜异位症(endometriosis,EM)是育龄妇女的常见病,在临床中发病率呈升高趋势,其5年以内的复发率在40%以上.近年来的研究发现,EM的发病与细胞因子有着密切的关系.

人骨髓间充质干细胞在不同输注液中的生存和生长

背景:间充质干细胞移植技术快速发展,需要异地移植病例不断增加,但是关于细胞保存运输条件的研究甚少。目的:比较几种临床常用输注液及实验室配制的输注液对间充质干细胞生存和生长的影响。方法:抽取健康志愿者髂骨骨髓,采用密度梯度离心和贴壁筛选相结合的方法,分离培养骨髓间充质干细胞。对骨髓间充质干细胞进行细胞形态、细胞表面标记和多向分化能力的鉴定。25℃条件下,用10%FBS-DMEM、细胞输注液和5种临床常用细胞输注液(9g/L氯化钠注射液、50g/L葡萄糖注射液、50g/L葡萄糖氯化钠注射液、2%和5%的人血白蛋白溶液)保存第3代骨髓间充质干细胞,检测1,2,4和6h细胞的存活率。然后4℃条件下,以细胞输注液保存骨髓间充质干细胞,检测2,4,8,12,24h细胞的存活率和存活细胞的生长曲线。结果与结论:第3代骨髓间充质干细胞呈均匀一致的长梭形,平行或旋涡状紧密排列。细胞表面标记CD44、CD105表达阳性,CD45表达阴性。成骨诱导3周后,长梭形骨髓间充质干细胞变成多角形,vonKossa染色可见典型的黑色钙化小结;成脂诱导2周后,细胞变成短梭形或椭圆形,油红O染色可见胞浆内密集的被染成红色的脂滴。在25℃条件下,细胞输注液中保存的骨髓间充质干细胞,其存活率远高于在上述5种临床常用输注液中所保存细胞;4℃条件下,细胞输注液和完全培养基中保存的骨髓间充质干细胞存活率和再生长能力基本相同。提示细胞完全培养基成分配制的输注液是维持间充质干细胞脱离培养环境后保持细胞活性,且延长细胞存活时间最适宜的溶液。

三维超声诊断胎儿丹迪-沃克综合征的价值

目的探讨三维超声线断层成像、任意平面成像诊断胎儿丹迪-沃克综合征的价值。方法对二维超声初步诊断为丹迪-沃克综合征的30例胎儿,进一步应用三维线断层成像及任意平面成像检查,对比所需标准切面的显示率。结果三维超声线断层成像、任意平面成像与二维超声相比在小脑侧冠状切面、小脑正中矢状切面显示率明显改善。结论二维超声初步诊断为丹迪-沃克综合征时,应进一步行三维超声线断层成像或任意平面成像检查,二者能快速、准确地获得所需的系列标准切面。

论著上皮性卵巢癌中p110α、hvps34及p-PKB的表达及临床意义

目的研究信号传导途径PI3K/PKB中的成分p110α、hvps34、p-PKB在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与卵巢癌临床病理参数之间的关系.方法应用免疫组化检测25例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤、19例交界性上皮性卵巢肿瘤及69例上皮性卵巢癌组织中ClassⅠPI3K(p110α)、ClassⅢPI3K(hvps34)及其下游的磷酸化PKB的表达水平,并分析它们与临床病理参数之间的关系.结果(1)hvps34在正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤组织中表达较高,在交界性卵巢癌组织中开始下降,在上皮性卵巢癌中的表达最低;p110α、p-PKB在交界性卵巢癌组织中开始升高,在上皮性卵巢癌中的表达明显高于其它3组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)卵巢癌Ⅰ～Ⅱ期、高中分化、淋巴结无转移的卵巢癌组织中p110α及p-PKB的表达均低于Ⅲ～Ⅳ期、低分化、淋巴结有转移者,差异有有统计学意义(P<0.05).结论在上皮性卵巢癌中PI3K/PKB信号通路中的成分p110α、hvps34、p-PKB存在表达异常,可能与上皮性卵巢癌的发生、发展有关.

绝经前子宫切除对卵巢功能及骨代谢和骨密度的影响

目的 研究子宫全切而保留卵巢患者远期卵巢激素水平及骨代谢、骨密度情况。方法子宫全切保留单侧卵巢者48例,保留双侧卵巢者15例及对照组30例。所有观察对象均测定血清E2、FSH及血清Ca、血P、血AKP、血BGP、及空腹尿Ca/Cr及尿HYP/Cr值、骨密度值。结果 单侧卵巢保留组血AKP值显著高于对照组(P<0.05),血BGP显著高于对照组(P<0.01),且空腹尿Ca/Cr及尿HYP/Cr值均显著高于对照组(P<0.01),骨密度值显著低于对照组(P<0.05)。双侧卵巢保留组尿HYP/Cr值显著高于对照组(P<0.05)。结论 子宫全切保留单侧卵巢者远期易发生骨量丢失致骨密度下降,双侧卵巢保留者亦有骨吸收加快,但无骨密度下降。

彩超监测脐动脉与子宫螺旋动脉对高危妊娠的研究

目的通过彩色多普勒超声联合监测晚孕期高危妊娠患者胎儿脐动脉(UA)及子宫螺旋动脉(SA)血流参数指标,探讨晚孕期高危妊娠胎儿脐动脉、子宫螺旋动脉血流动力学的变化,以及两者联合监测对预测围产儿结局的临床应用价值。方法应用彩色多普勒超声对120例单胎晚期妊娠妇女胎儿的脐动脉及母体子宫螺旋动脉的血流进行检测,分别测量以下血流参数:收缩期峰值速度与舒张期末速度之比值(S/D),阻力指数(RI)及搏动指数(pulsatility index,PI),80例高危妊娠与40例正常妊娠组作对照分析。结果 (1)高危妊娠组胎儿脐动脉及子宫螺旋动脉血流S/D、RI、PI值高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)高危妊娠组围产儿结局异常的百分比明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);(3)当胎儿脐动脉和子宫螺旋动脉血流参数指标都异常时,围产儿结局不良发生率为80.00%,明显高于胎儿脐动脉或子宫螺旋动脉单独异常组,且各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠晚期彩色多普勒超声检测胎儿脐动脉、子宫螺旋动脉的血流状态,对预测妊娠结局的发生有临床价值;两者联合检测比单纯胎儿脐动脉或子宫螺旋动脉监测对预测高危妊娠胎儿不良结局更有价值;子宫螺旋动脉可以作为脐动脉预测不良妊娠结局的补充。

三维超声在胎儿肾盂扩张中的应用

目的应用三维超声任意平面成像及断层超声显像技术探讨胎儿肾盂扩张的影响因素及不同转归,评价胎儿肾盂扩张的程度,指导临床干预。方法对30例二维超声初检单侧肾盂前后径≥10 mm的胎儿进行随访,应用三维任意平面成像及断层超声显像技术观察、测量并记录其肾盂前后径、肾实质厚度及肾动脉的阻力指数(RI)。结果 30例胎儿肾积水中,10 mm≤肾盂前后径<15 mm的胎儿中,肾实质厚度≤5 mm者5例,出生后消失2例,手术1例;肾实质厚度>5 mm者21例,出生后消失18例,手术0例;在本组中,RI≥0.7者4例,出生后消失1例,手术1例;RI<0.7者22例,出生后消失19例,手术0例。肾盂前后径≥15 mm的胎儿中,肾实质厚度≤5 mm者3例,出生后消失0例,手术2例;肾实质厚度>5 mm者1例,出生后消失1例,手术0例;在本组中,RI≥0.7者3例,出生后消失0例,手术2例;RI<0.7者1例,出生后消失1例,手术0例。结论产前超声检查示肾盂前后径≥15 mm,肾实质厚度≤5 mm且RI≥0.7的胎儿往往存在病理性梗阻,应高度重视。三维超声技术能够迅速、准确地获得诊断肾盂扩张的标准切面。

妊娠高血压病人不同药物与妊娠结局关系的主成分logistic回归

目的:探讨主成分logistic回归分析方法在研究妊娠高血压病人用药与其妊娠结局关系中的作用以及不同药物对妊娠结局的影响,解决多个疾病因素变量存在共线性的问题。方法:对logistic回归模型进行共线性诊断,应用主成分分析方法对存在共线性的变量综合成一个主分量,然后进行logistic回归分析,得到并解释最终的回归模型。结果:不同药物的不同剂量对妊娠结局的影响各不相同。主成分logistic回归在研究妊娠高血压病人药物与妊娠结局关系中有较好的作用。在对疾病因素进行logistic回归分析时,若变量间存在多重共线性,采用主成分改进的logistic回归分析能得出更合理的回归模型。

不良妊娠结局影响因素的病例对照研究

目的:探讨不良妊娠结局发生的影响因素,为不良妊娠结局综合防治提供参考依据。方法:采用1∶2匹配病例对照研究方法,分析不良妊娠结局发生的影响因素。结果:单因素条件Logistic回归分析结果显示:不良妊娠结局组与无不良妊娠结局组的孕妇文化程度、全家人均月收入、孕前健康教育、月经是否规则、此次妊娠患有妊娠期高血压疾病等差异有统计学意义(P<0.05);多因素条件Logistic回归分析结果表明:孕妇文化程度、此次妊娠患有妊娠期高血压疾病、参加体育活动、妊娠次数被引入回归方程。结论:孕妇文化程度高、参加体育活动、妊娠次数少为不良妊娠结局发生的保护因素,而患有妊娠期高血压疾病为不良妊娠结局发生的危险因素。

孕前体质指数及孕期增重与早产相关性分析

目的:探讨孕前体质指数(BMI)、孕期增重(GWG)的变化与早产相关性。方法:以1 438例单胎产妇为研究对象,测量其孕前身高、体重和分娩前最后一次体重,计算孕前BMI及GWG。将BMI<18.5 kg/m2为体重过低组,18.5 kg/m2≤BMI<23.9 kg/m2为体重正常组,24 kg/m2≤BMI<27.9 kg/m2为超重组,BMI≥28kg/m2为肥胖组。根据GWG分为GWG<10 kg、10 kg≤GWG≤15 kg、16 kg≤GWG≤19 kg、GWG≥20 kg 4个组,了解孕前BMI和GWG对早产结局的影响。结果:1 438例活产单胎新生儿中6.3%发生早产。孕前体重过低组早产发生率高于体重正常和超重组,差异无统计学意义(P>0.05);GWG<10 kg组早产的发生率高于10 kg≤GWG≤15 kg和16 kg≤GWG≤19 kg组,差异有统计学意义(P<0.05);孕前体重过低组孕期增重明显低于体重正常组,孕前体重过低组发生早产的孕妇孕期增重明显低于足月产,孕前体重正常组发生早产的孕妇孕期增重明显低于足月产,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:孕期增重过低或者偏高与早产危险性增加有关,应关注孕期体重变化从而减少早产的发生。

自噬基因Beclin1过表达诱导人卵巢癌细胞SKOV3自噬和凋亡的研究

目的:探讨自噬基因Beclin 1在人卵巢癌SKOV3细胞中过表达对其体外生长活性的影响。方法:构建自噬基因Beclin 1的真核表达载体pcDNA3.1/Beclin1,将其稳定转染SKOV3细胞,实现Beclin 1在SKOV3中的过表达;用MTT法分析Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,用流式细胞仪检测凋亡和自噬情况,电镜和荧光显微镜下观察自噬现象。结果:pcD-NA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后Beclin 1在mRNA和蛋白水平均高于空质粒pcDNA3.1转染组和未转染组。Beclin 1在SKOV3中的稳定过表达后G1期细胞明显增多,S期细胞比例明显减少,细胞增殖受到抑制,凋亡率为(21.26±3.89)%,高于空质粒pcDNA3.1转染组和未转染组,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后MDC标记的自噬囊泡平均荧光强度高于pcDNA3.1转染组和未转染组。pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后在电镜下可见大量自噬囊泡形成。在荧光显微镜下见pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3细胞中MDC标记的自噬囊泡明显增加。结论:自噬基因Beclin1过表达可诱导人卵巢癌细胞SKOV3自噬和凋亡,针对自噬基因Beclin1的卵巢癌基因治疗可能具有可行性。

三阶梯筛查在宫颈癌中的应用

宫颈癌是最常见的女性恶性肿瘤之一，发病率居乳腺癌之后，为女性恶性肿瘤第二位，妇科恶性肿瘤之榜首。全世界每年大约有50万的新发病例，发展中国家约占80％，据世界卫生组织统计，我国每年新发病例约13．15万例，全世界的1／4。因此，提高健康意识，

胚胎围植入期超早孕妇女血中早孕因子的分离纯化

目的分离纯化围植入期超早孕妇女血清中免疫抑制物质——早孕因子（early pregnancy factor，EPF）。方法挑选取超声波监测的排卵受精后1到8d内的山西太原妇女40名，抽取血液20-40mL，RIT检测EPF活性，对收集的400mL胚胎植入期妇女血清，经过DEAESepharose离子交换层析，ConASepharose4B亲和层析以及Heparin Sepharose CL-6B亲和层析进行了EPF的分离纯化。结果受精后1-8天内的妇女血中可检测到EPF。EPF可以被纯化为相对分子质量为18000的单一条带。结论胚胎围植入期超早孕妇女血中EPF蛋白质的分离和纯化，为EPF的研究，尤其是围植入期免疫抑制作用，避免了母亲的免疫系统对半移植物胚胎的排斥的研究提供了理论和应用价值。

妊娠期高血压疾病大鼠甲状腺超微结构和功能变化的联系

目的研究妊娠期高血压疾病大鼠甲状腺激素水平及甲状腺组织的超微病理改变,探讨妊娠期高血压疾病甲状腺组织结构损伤是否与其激素水平变化相一致。方法采用亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)建立妊娠期高血压疾病模型大鼠,发光免疫法测定正常妊娠组、妊娠期高血压疾病模型组(PIH组)大鼠血清中FT3、FT4及TSH的浓度变化,透射电镜下观察甲状腺组织的结构变化。结果 PIH组FT3、FT4水平较正常妊娠组呈下降趋势,TSH水平显著升高(P<0.05);电镜下观察PIH组大鼠甲状腺滤泡上皮细胞损伤明显,主要显示甲状腺功能低下。结论甲状腺亦是妊娠期高血压疾病慢性攻击的靶器官,妊娠期高血压疾病存在甲状腺组织形态学的改变,与血清中激素浓度变化意义基本相同。

甲苯对雌性大鼠垂体促性腺激素的影响

【目的】探讨亚慢性甲苯染毒对雌性sD大鼠垂体促性腺激素的影响，为阐明甲苯对雌性生殖内分泌系统的不良影响提供实验依据。【方法】60d雌性sD大鼠，随机分为4组，动情周期2周后分别给予0、35、70、330mg／kg甲苯连续灌胃染毒40～45d，每天上午阴道涂片观察动情周期的变化。于动情期处死大鼠分别提取脑垂体做免疫组化，同时测定血清中FSH和LH含量，观察甲苯对垂体促性腺激素的影响。【结果】高剂量组与对照组相比，动情周期持续时间延长、动情周期异常率升高，规则动情周期数降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组化结果：高剂量组、中剂量组与对照组相比，棕色颗粒明显增多，两组平均光密度（MOD）和面数密度（SD）存在显著性差异（P〈0．01），低剂量组可见少量棕色颗粒，表明LH和FSH有少量表达，与对照组无明显统计学差别（P〉O．05）。血清中FSH和LH浓度结果：高剂量组与对照组相比明显增高（P〈0．05）；中剂量组和对照组相比明显增高（P〈0．05）；低剂量组和对照组相比无统计学差异（P〉0．05）。【结论】甲苯可引起大鼠动情周期的改变：引起大鼠垂体促性腺激素细胞分泌激素增多，同时可引起血清中FSH和LH含量的增高。