脂质体共载紫杉醇与二氢卟吩e6协同介导PDT治疗肺癌的实验研究

目的研究二氢卟吩e6(chlorin e6,Ce6)负载于脂质体共载紫杉醇(paclitaxel,PTX)协同介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对裸鼠肺癌模型的治疗效果。方法实验分为三部分:(1)采用薄膜蒸发法制备PTX&Ce6-LP并进行表征观察。(2)建立裸鼠肺癌A549肿瘤模型,经活体荧光成像观察PTX&Ce6-LP进入荷瘤裸鼠体内的代谢情况,获得PDT治疗给药后激光照射的最佳时间点。(3)PDT瘤内治疗。将40只裸鼠分为3大组,PDT组24只、模型组8只和正常对照组8只。其中PDT组,再根据PTX&Ce6-LP中Ce6的浓度(1.25、2.5和3.75 mg/kg)分为3个亚组,每组各8只。PDT组经皮穿刺将光纤导入瘤内进行激光照射治疗,每次照射功率108 mW,照射时间10 min,每3 d治疗一次。第4次PDT治疗后3 d,各组中5只取其瘤体进行组织病理学检测,包括HE染色、Bax和Bcl-2免疫组化分析;每组中剩余的3只继续进行PDT治疗,直至肿瘤治愈,记录PDT治疗次数,并取其治疗区域进行组织病理学检测。结果(1)实验制得的PTX&Ce6-LP的粒径约为176.6 nm,Ce6的包封率为50.1%、PTX包封率为69.3%,PTX&Ce6-LP吸收峰位于403 nm和665 nm。(2)PTX&Ce6-LP进入裸鼠体内后1 h在肿瘤部位富集,24 h时体内富集浓度明显减少。(3)PDT不同浓度(1.25、2.5和3.75mg/kg)组4次治疗后3 d,抑瘤率分别为11.0%、35.3%、62.3%。HE染色结果显示:各组呈现不同程度的坏死,且PTX&Ce6-LP浓度越高坏死程度越高。PDT三个亚组随着PTX&Ce6-LP浓度的增加,Bax的表达增强,Bcl-2的表达减弱。各组Bax的表达水平:模型组<1.25 mg/kg组<2.5 mg/kg组<3.75 mg/kg组;Bcl-2的表达水平:模型组>1.25 mg/kg组>2.5mg/kg组>3.75 mg/kg组。(4)2.5 mg/kg组第9次PDT治疗和3.75 mg/kg组第7次PDT治疗实现对肿瘤治愈。结论本研究通过PTX&Ce6-LP所介导的PDT治疗肺癌A549肿瘤模型,有效地抑制了其瘤体生长,实现对肿瘤的完全清除。