糖尿病肾病维持性血透患者透析前后血清差异蛋白质组学研究

目的应用基质辅助激光解吸附电离/飞行时间质谱技术(MALDI-TOFMS)技术检测和探讨糖尿病肾病维持性血透患者透析前后血清以及透析废液中的差异蛋白质的变化。方法收集糖尿病肾病维持性血透患者透析前后的血清以及透析废液,经MALDI-TOFMS分析检测,并对差异蛋白质进行多肽指纹图谱鉴定。同时在蛋白质数据库Mascot Search进行检索以确定其性质。结果①透析前后的血清经WCX磁珠处理后,在质荷比(m/z)为1866,2022,2661和5905处,检测到具有差异的多肽指纹图谱变化;②透析前后的血清以及透析废液经WCX磁珠处理后,均发现m/z为2661的蛋白峰,且透析后强度小于透析前的强度;③采用Mascot Search进行蛋白质数据库检索,在m/z为2022处,鉴定为补体片段C3f。结论糖尿病肾病维持性血透患者血液透析前后的血清中存在差异蛋白质。

维生素E对大鼠肾脏缺血再灌注损伤诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨维生素E对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响及可能的机制。方法健康雄性Wistar大鼠18只随机分为对照组、IRI组和维生素E组。动物右肾切除1周后,夹闭左肾动脉制作IRI模型,24h后取肾标本,维生素E组右肾切除后给予维生素E50mg/d灌胃至再灌注24h。半定量分析肾脏病理损伤、TUNEL检测肾组织凋亡、比色法测肾组织caspase-3活性。结果①与对照组相比,IRI组肾脏病理损伤严重、肾小管上皮细胞凋亡明显增加、caspase-3活性明显增高(P<0.01);②与IRI组相比,维生素E处理组肾脏病理损伤明显减轻、肾小管上皮细胞凋亡明显减少、caspase-3活性明显减少(P<0.01)。结论维生素E能抑制肾脏IRI诱导的肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能是通过抑制caspase依赖的细胞凋亡途径实现的。

根据细胞周期序贯联合用药对阿霉素肾病大鼠的疗效

目的观察三种根据细胞周期序贯联合用药方案对阿霉素肾病大鼠的治疗效果并进行比较。方法38只大鼠随机分为正常对照组(n=6)、肾病组(n=8)和治疗组(n=24)。采用阿霉素诱导肾病大鼠模型。治疗组随机分为3组:Mp+Cs+CTX组、Mp+Rap+CTX组、Mp+LEF+CTX组,分别采取三种根据细胞周期序贯联合用药方案治疗4周。以S-丽春红法测24h尿蛋白定量,全自动生化仪检测血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。结果①肾病组大鼠24h尿蛋白定量显著高于正常对照组,3个治疗组的大鼠24h尿蛋白定量均显著低于肾病组;肾病组大鼠血清TP水平显著低于正常对照组,Mp+Cs+CTX组、Mp+Rap+CTX组的大鼠血清TP水平显著高于肾病组;肾病组大鼠血清ALB水平显著低于正常对照组,3个治疗组大鼠血清ALB水平均显著高于肾病组。②3个治疗组中Mp+Cs+CTX组的大鼠24h尿蛋白定量、血清TP、血清ALB水平与肾病组相比变化最为显著。结论三种根据细胞周期序贯联合用药方案对阿霉素肾病大鼠尿蛋白排出量增加和血清蛋白水平下降均有改善,其中激素联合Cs与CTX的治疗方案疗效最好。

环孢素对体外培养人系膜细胞增殖、凋亡及细胞周期影响的研究

目的观察环孢素A对系膜细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法对体外培养的人肾小球系膜细胞分别加入0.01,0.1,1,2,5μmol/L的环孢素A,药物作用24h,48h,72h后用MTT法检测细胞增殖,药物作用48h后采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,同时每种方法均设立对照组(不加药物干预组)。结果①环孢素A能时间、剂量依赖性地抑制系膜细胞增殖,以72h抑制作用最为明显;不同药物浓度在作用24h,48h,72h后,系膜细胞增殖与对照相比差异均具有统计学意义(P<0.05);②环孢素A可阻滞细胞周期,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,且随着药物浓度的增加,G0/G1期所占百分比逐渐增高,S期所占百分比逐渐降低,且其差异与对照相比具有统计学意义(P<0.05);③高浓度环孢素A可促进系膜细胞的凋亡。结论环孢素A可显著抑制系膜细胞增殖,使系膜细胞阻滞于G0/G1期;并且环孢素A有诱导系膜细胞凋亡的作用。

1，25－二羟维生素D3的免疫调节作用与肾脏病的研究进展

1，25－二羟维生素D3[1，25－dihydroxyvitaminD3，1，25－（oH）2D3]是维生素D3的活性形式，是第二甾体类激素，它除了调节机体的钙和骨代谢外，还参与免疫系统的分化与调节。1，25～（OH）2D，是通过与它的特定受体－维生素D受体（vitaminDreceptor，VDR）相互作用来实现它的大部分基因效应的，抗原提呈细胞和T细胞是它作用的靶细胞，它的作用主要是诱导产生基因耐受性树突状细胞，抑制具有致病作用的T淋巴细胞，促进调节性T细胞（regulatoryTcells，Treg）的增生。研究证实，1，25～（OH）2D，对多种自身免疫性疾病均有免疫调节作用，本文着重探讨其在肾脏病中的免疫调节作用。

IMD在冠状动脉造影及介入治疗前后的变化及临床意义

目的观察IMD在冠状动脉造影及介入治疗前后的变化,以探讨IMD在冠心病疾病过程中的变化规律及临床意义。方法随机选取接受冠状动脉造影及介入治疗患者52例,分别于术前、术后24 h静脉取血获得血浆,采用放免法测定血浆IMD浓度,并与健康对照组(n=20)进行比较。结果冠造介入组患者治疗前IMD水平(pg/ml)明显低于健康对照组(146.85±33.10 vs 189.04±56.89,P<0.05),行冠状动脉造影及介入治疗后IMD水平显著升高(163.76±56.25,P<0.01)。治疗前冠状动脉造影不正常者IMD水平明显低于冠状动脉造影正常患者(135.50±29.34 vs 167.37±18.63,P<0.05),且术后均明显增高(P<0.05)。结论 IMD在冠心病患者中含量较低,其水平的降低可能为冠心病潜在危险因素之一。在行冠状动脉造影及介入治疗后,出现IMD水平的增高,可能与治疗过程中的出现心肌缺血再灌注损伤,机体出现代偿有关。

不典型膜性肾病的病因研究现状

膜性肾病（MN）是肾小球疾病的病理类型之一,根据病因及病理表现分为特发性膜性肾病（IMN）和不典型膜性肾病（AMN）.随着诊疗技术的提高及完善,MN的确诊率也相应地升高,尤其是AMN.本文对近年来AMN相关的病因研究作一综述.

根据细胞周期序贯应用免疫抑制剂治疗大鼠阿霉素肾病

目的观察3种根据细胞周期序贯用药方案对阿霉素肾病大鼠的治疗效果。方法以两次注射的方法制备阿霉素肾病大鼠模型，设正常对照组（8只）、肾病组（8只）、甲基泼尼龙（MP）＋环孢素A（CsA）＋霉酚酸酯（MMF）治疗组（8只）、MP＋CsA＋环磷酰胺（CTX）治疗组（8只）和MP＋他克莫司（FK506）＋雷帕霉素（Rapa）治疗组（8只）。检测24h尿蛋白量和血清总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、胆固醇（Ch01）、三酰甘油（TG）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）；观察肾组织病理变化；Western印迹法检测结缔组织生长因子（CTGF）的表达；免疫组化和实时荧光定量PCR法检测nephrin和podocin的表达。结果（1）2周末、4周末、8周末、12周末肾病组24h尿蛋白量均显著高于对照组（均P〈0．01），治疗组大鼠24h尿蛋白量在8周末、12周末均显著低于肾病组（均P〈0．05），治疗组之间差异无统计学意义。（2）肾病组TP、Alb显著低于对照组（均P〈0．01），TG、Chol显著高于对照组（均P〈0．01），治疗组TP、Alb显著高于肾病组（均P〈0．05），TG、Chol显著低于肾病组（均P〈0．05），治疗组之间各生化指标差异均无统计学意义。（3）3组治疗方案均可抑制CTGF蛋白的表达，其中尤其以MP＋FK506＋Rapa组合方案效果显著。（4）相比对照组，肾病组大鼠nephrin和podocin蛋白及其mRNA的表达均显著减少（均P〈0．01）；治疗组nephrin、podoein的表达和分布均有所恢复。结论根据细胞周期序贯用药方案对阿霉素肾病大鼠的病理损伤均有显著改善，可以有效减少阿霉素肾病大鼠的尿蛋白量；升高TP和Alb，减少TG和Chol；可以恢复nephrin、podocin在阿霉素肾病大鼠肾脏中的表达；并抑制CTGF蛋白的表达，明显改善肾脏纤维化。

Treg细胞在IgA肾病发病机制中的作用

IgA肾病是一种以IgA免疫复合物沉积在肾小球系膜区为主的肾脏疾病,是全世界最常见的肾小球疾病.大量的证据表明CD4＋T细胞在IgA肾病中起着重要的作用.Treg细胞表达人叉头蛋白转录因子Foxp3,可通过直接接触或释放抗炎症细胞因子而抑制IgA肾病的发生发展.现就IgA肾病与Treg细胞关系的研究作一综述.

环孢素A对体外人系膜细胞cyclin E,cyclin D1,p27^(kip1)蛋白表达的影响

目的探讨环孢素A(CsA)对人系膜细胞增殖的抑制作用及细胞周期蛋白D1、E、p27kip1表达影响。方法人系膜细胞常规体外培养,分为实验组和对照组,实验组加入不同浓度的CsA(0.1,1,5μmol/L)干预。药物作用24,48,72 h后MTT比色法测定细胞增殖情况。药物作用48 h后采用流式细胞仪检测细胞周期。药物作用48 h后Western blot法检测细胞中cyc-lin D1、cyclin E、p27kip1蛋白质表达情况。结果 CsA对人系膜细胞具有时间、浓度依赖性抑制作用;且浓度依赖性阻滞细胞周期,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(P<0.05)。CsA浓度依赖性下调cyclin D1、cyclin E蛋白,上调p27kip1蛋白的表达(P<0.05)。结论 CsA通过下调cyclin D1、cyclin E蛋白,上调p27kip1蛋白的表达,调节细胞周期调控通路,阻滞细胞于G0/G1期,有效抑制人系膜细胞的增殖。