晚期糖基化终产物对心肌细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响及p38丝裂原活化蛋白激酶作用的研究

目的通过建立胰岛素抵抗模型,探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对SD大鼠乳鼠心肌细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的影响,以及p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在此过程中的作用。方法采用酶消化法原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,建立胰岛素抵抗模型,给予不同干预,分为胰岛素抵抗对照组、牛血清白蛋白(BSA)组、糖化白蛋白(AGE-BSA)组,p38MAPK抑制剂SB203580+AGE-BSA组,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法检测GLUT4和p38MAPK的蛋白及m RNA表达水平。结果胰岛素抵抗心肌细胞有GLUT4表达,其中对照组与BSA组比较差异无统计学意义(P>0.05),AGE-BSA可诱导GLUT4表达降低,且呈浓度依赖性,AGE-BSA组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。但在阻断p38MAPK途径后表达量明显上升(P<0.05),对照组与BSA组比较,p38MAPK磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05),AGE-BSA可导致p38MAPK磷酸化的增加,也呈浓度依赖性,AGE-BSA组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AGEs可诱导胰岛素抵抗心肌细胞GLUT4 m RNA和蛋白表达降低,此过程与p38-MAPK磷酸化增加有关。

晚期糖基化终产物对心肌细胞葡萄糖转运蛋白1表达的影响及机制研究

目的探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对心肌细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达的影响,以及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在此过程中的作用。方法采用酶消化法原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,建立胰岛素抵抗模型,给予不同干预,用实时定量聚合酶链反应(real-Time PCR)和蛋白印迹方法检测m RNA及GLUT1和p38MAPK的蛋白表达水平。结果胰岛素抵抗心肌细胞有GLU1表达,其中对照组与BSA组GLU1表达比较差异无统计学意义(P>0.05),糖化白蛋白AGE-BSA可诱导其GLU1表达降低,AGE-BSA组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。但在阻断p38MAPK途径后表达量明显上升(P<0.05),对照组与BSA组比较,p38MAPK磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05),AGE-BSA可导致p38MAPK磷酸化的增加,AGE-BSA组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖基化终产物AGEs可诱导胰岛素抵抗心肌细胞GLUT1 mRNA和蛋白表达降低,此过程与p38-MAPK磷酸化增加有关。