miR-155-5P在脓毒症急性肺损伤时调控肺泡巨噬细胞IL-6、MIP-2的表达对中性粒细胞迁移的影响

目的探讨脓毒症急性肺损伤(ALI)时miR-155-5P对肺泡巨噬(MH-S)细胞白介素6、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)表达的调控作用及中性粒细胞迁移的影响。方法培养小鼠MH-S细胞并将其分为对照组、脓毒症组和miR-155-5P抑制物组,miR-155-5P抑制物组预先通过miR-155-5P antagomir完成转染,采用脂多糖干预脓毒症组和miR-155-5P抑制物组12 h,应用RT-PCR检测3组MH-S细胞miR-155-5P、白介素6 mRNA和MIP-2 mRNA的表达,酶联免疫吸附实验检测细胞悬液中白介素6和MIP-2的浓度;再次将MH-S分为上述3组培养在transwell板的下室,CFSE荧光染料标记的中性粒细胞培养在上室,脂多糖干预后应用流式细胞术分别检测上室与下室细胞的荧光值,计算中性粒细胞的迁移率。结果脓毒症组MH-S细胞的miR-155-5P(8.04±0.65)、白介素6 mRNA(57.05±6.88)和MIP-2 mRNA(52.98±2.58)较对照组(1.00±0.00、1.00±0.00、1.00±0.00)表达明显上调(P<0.05);白介素6[(50.85±0.12)pg/ml]、MIP-2[(69.96±1.40)pg/ml]的浓度和中性粒细胞迁移率(64.36%)较对照组[(38.58±0.13)pg/ml、(56.00±0.29)pg/ml、30.98%]均显著增加(P<0.05)。而miR-155-5P抑制物组细胞的miR-155-5P表达(0.19±0.35)低于对照组(P<0.05),白介素6 mRNA(39.66±3.65)、MIP-2 mRNA(31.01±2.88)的表达及白介素6[(42.45±1.08)pg/ml]、MIP-2[(59.01±1.63)pg/ml]的浓度也高于对照组(P<0.05),而低于脓毒症组(P<0.05)。结论脓毒症ALI时,肺泡巨噬细胞miR-155-5P基因高度表达,促炎因子白介素6 mRNA、MIP-2mRNA的表达均明显上调,其促进白介素6、MIP-2的产生,使中性粒细胞大量趋化迁移至肺内,造成肺损伤;而抑制miR-155-5P的表达,可以抑制白介素6、MIP-2的产生,从而减少中性粒细胞的趋化迁移,起到肺保护作用。