期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
关节软骨组织低温保存方法的研究进展 被引量:2
1
作者 范学敏 卫小春 《中国骨科临床与基础研究杂志》 2012年第3期215-220,共6页
关节软骨组织的低温保存一直是国内外研究的热点,其最大的困难在于如何保持软骨细胞的存活率及其代谢活性,突破这一技术瓶颈将有助于提高关节软骨损伤的移植修复效果,并为组织细胞库的建立提供实验依据。该文阐述关节软骨组织低温保存... 关节软骨组织的低温保存一直是国内外研究的热点,其最大的困难在于如何保持软骨细胞的存活率及其代谢活性,突破这一技术瓶颈将有助于提高关节软骨损伤的移植修复效果,并为组织细胞库的建立提供实验依据。该文阐述关节软骨组织低温保存的原理及冷冻保护剂的作用机制,重点介绍关节软骨组织低温保存的主要技术——梯度降温法、程序降温法和玻璃化冻存法,并对关节软骨组织低温保存的前景进行展望。 展开更多
关键词 软骨 关节 低温保存 存活率 玻璃化 骨移植 移植 同种
下载PDF
玻璃化冻存对兔关节软骨细胞存活率及生物学活性的影响 被引量:2
2
作者 范学敏 李鹏翠 +1 位作者 丁娟 卫小春 《中国骨科临床与基础研究杂志》 2012年第4期275-280,共6页
目的探讨玻璃化冻存技术对兔关节软骨细胞存活率及生物学活性的影响。方法对兔关节软骨细胞进行玻璃化冻存法(A组)、程序性降温法(B组)及梯度降温法(C组)低温保存,以新鲜未冷冻的兔关节软骨细胞作为对照组(D组),采用流式细胞仪检测各组... 目的探讨玻璃化冻存技术对兔关节软骨细胞存活率及生物学活性的影响。方法对兔关节软骨细胞进行玻璃化冻存法(A组)、程序性降温法(B组)及梯度降温法(C组)低温保存,以新鲜未冷冻的兔关节软骨细胞作为对照组(D组),采用流式细胞仪检测各组兔关节软骨细胞存活率和凋亡率,通过改良Alcianblue染色沉淀法评估其生物活性改变。结果 A组兔关节软骨细胞存活率为(86.6±1.7)%,明显高于B组的(79.4±3.1)%以及C组的(62.1±8.4)%,差异有统计学意义(P<0.05);A组、C组的凋亡率[(7.9±3.2)%、(7.3±6.2)%]明显低于B组的(14.0±5.2)%,差异有统计学意义(P<0.05);A组上清液中糖胺多糖(GAG)浓度为(29.4±2.9)ng/mL,明显高于B组的(18.5±4.1)ng/mL以及C组的(19.4±6.3)ng/mL(P<0.05)。结论与传统程序性降温法、梯度降温法比较,玻璃化冻存法能显著提高冷冻保存复苏后兔关节软骨细胞的存活率,并能维持关节软骨细胞的生物活性,是一种较为理想的软骨细胞低温保存方法。 展开更多
关键词 软骨细胞 软骨 关节 低温保存 玻璃化 冷冻保护剂 细胞凋亡 葡糖氨基聚糖类
下载PDF
大鼠膝关节负重与非负重区软骨组织学对比分析
3
作者 边森 刘贵艳 +1 位作者 李凯 张国华 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2017年第6期-,共7页
目的观察大鼠膝关节软骨负重区与非负重区组织形态、基质中蛋白多糖成分和Ⅱ型胶原分布差异。方法 3月龄SD(Sprague-Dawley)大鼠8只,切取双膝关节,沿矢状面整体切片,采用HE染色、p H值1.0和2.5阿尔新蓝染色、番红O染色、阿尔新蓝-番红O... 目的观察大鼠膝关节软骨负重区与非负重区组织形态、基质中蛋白多糖成分和Ⅱ型胶原分布差异。方法 3月龄SD(Sprague-Dawley)大鼠8只,切取双膝关节,沿矢状面整体切片,采用HE染色、p H值1.0和2.5阿尔新蓝染色、番红O染色、阿尔新蓝-番红O复染观察软骨形态结构和基质蛋白多糖成分,并测量软骨厚度,免疫组化检测Ⅱ型胶原分布。分别观察负重区与非负重区软骨形态和基质染色差异,并利用图像分析系统,对基质成分染色深浅进行光密度定量,采用独立样本t检验进行统计分析。结果负重区与非负重区软骨厚度、细胞分布、形态结构均有较大差异。负重区软骨较非负重区明显增厚[胫骨平台(265±39)μm vs.(179±27)μm,t=5.128,P=0.000 2;股骨髁(219±33)μm vs.(132±21)μm,t=6.291,P<0.000 1],且软骨各层结构特征较非负重区更加明显。阿尔新蓝染色结果显示,负重区的非钙化层比非负重区染色更浅(胫骨平台0.073±0.013vs.0.354±0.034,t=21.83,P<0.000 1;股骨髁0.058±0.020 vs.0.131±0.022,t=6.945,P<0.000 1),而番红O深染(胫骨平台0.246±0.013 vs.0.158±0.034,t=6.838,P<0.000 1;股骨髁0.171±0.020vs.0.086±0.022,t=8.086,P<0.001),差异均有统计学意义,但上述两个区域钙化层的阿尔新蓝染色和番红O染色结果并无统计学差异。阿尔新蓝-番红O复合染色结果显示,负重区软骨的阿尔新蓝染色面积百分比明显少于非负重区[胫骨平台(19.3±5.1)%vs.(88.2±4.2)%,t=29.50,P<0.000 1;股骨髁(36.2±5.8)%vs.(69.5±7.1)%,t=10.27,P<0.000 1],而番红O染色面积百分比却大于非负重区[胫骨平台(72.6±8.2)%vs.(31.2±5.2)%,t=12.06,P<0.000 1;股骨髁(72.1±7.6)%vs.(26.1±8.1)%,t=11.71,P<0.000 1],差异均有统计学意义。负重区软骨非钙化层p H 2.5阿尔新蓝染色明显较p H 1.0阿尔新蓝染色加深。免疫组化未发现负重区与非负重区Ⅱ型胶原平均光密度存在统计学差异(胫骨平台0.033±0.005 vs.0.029±0.006,t=1.449,P=0.169 5;股骨髁0.031±0.009 vs.0.027±0.002,t=1.227,P=0.240 0)。结论胫骨和股骨髁负重区较非负重区厚度增加,软骨各层结构特征更加明显。负重区与非负重区比较,基质中糖胺多糖的含量明显增加,软骨透明质酸含量明显减少,硫酸软骨素和硫酸角质素含量明显增加,而Ⅱ型胶原含量并无差异。说明不同的受力环境可以造成软骨形态结构和基质成分差异,负重区软骨的形态结构更加适应于承受关节的力学作用。同时提示临床用来修复负重区软骨缺损的非负重区软骨缺乏适应负重区力学环境的组织结构,可能是骨软骨移植手术后移植物退化的重要因素。 展开更多
关键词 大鼠 关节软骨 负重 蛋白多糖 镶嵌式自体骨软骨移植
原文传递
癌相关成纤维细胞来源的外泌体在促骨肉瘤侵袭转移中作用的实验研究 被引量:1
4
作者 陈成龙 孙雪娇 +4 位作者 李志慧 孙晓娟 韩鹏飞 张龙 吕智 《中华解剖与临床杂志》 2019年第4期332-340,共9页
目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源的外泌体对骨肉瘤侵袭及转移的影响。方法利用人源骨肉瘤细胞株Saos-2采用差速贴壁法分离、培养CAFs,显微镜下观察CAFs的形态,免疫组织化学观察α-SMA蛋白表达对CAFs进行鉴定。培养CAFs,采用ExoQuick... 目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源的外泌体对骨肉瘤侵袭及转移的影响。方法利用人源骨肉瘤细胞株Saos-2采用差速贴壁法分离、培养CAFs,显微镜下观察CAFs的形态,免疫组织化学观察α-SMA蛋白表达对CAFs进行鉴定。培养CAFs,采用ExoQuick-TC外泌体提取试剂盒分离外泌体。通过透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测外泌体特异性标记蛋白β-actin、CD63表达情况对外泌体进行鉴定。培养人源骨肉瘤细胞株Saos-2,分为外泌体组和对照组,采用细胞划痕及Transwell小室实验观察外泌体对Saos-2细胞迁移和侵袭能力的影响。选取一级5周龄BALB/c-nu雌性裸鼠12只,按编号随机分为外泌体组和对照组,每组6只。两组均采用皮下移植成瘤法在裸鼠右侧背部皮下接种人骨肉瘤Saos-2细胞与Matrigel基质胶混合悬液,建立裸鼠骨肉瘤肿瘤模型。造模结束后即刻进行尾静脉注射:外泌体组每只裸鼠通过尾静脉注射浓度为0.1μg/μL的外泌体悬液30μL,对照组裸鼠尾静脉注射等量生理盐水,两组均1次/周,共注射6次。第1次注射后每日观察裸鼠成瘤情况,从裸鼠右侧背部皮下可触及肿块开始,测量两组裸鼠肿块的最长径和最长径的最大垂直短径,计算肿瘤体积,此后每周测量1次,共测量6次。完成最后一次测量后腹腔麻醉断椎法处死裸鼠,完整取出肿块并称重。取裸鼠肺组织进行切片HE染色观察两组裸鼠肺转移情况。结果显微镜下观察CAFs呈长梭形,排列杂乱,无方向性;细胞免疫组织化学染色结果显示:CAFs的α-SMA蛋白表达阳性,提示CAFs提取成功。电镜观察外泌体呈70~100 nm圆形或椭圆形膜性囊泡状结构;Western blot结果显示外泌体中CD63蛋白呈高表达,β-actin蛋白表达较弱,提示成功分离CAFs来源外泌体。细胞划痕实验、侵袭实验结果显示:外泌体组细胞迁移距离、迁移率、侵袭细胞数目分别为(0.19±0.02)mm、0.81%±0.11%、(53.67±5.69)个,均高于对照组的(0.81±0.11)mm、0.32%±0.11%、(31.67±8.08)个,差异均有统计学意义(t=6.209、6.209、3.856,P值均<0.01)。外泌体组和对照组12只裸鼠采用皮下移植成瘤法接种人骨肉瘤Saos-2细胞与Matrigel基质胶混合悬液,均造模成功,实验过程中无一例动物死亡。两组裸鼠均于第1次注射肿瘤细胞后1周触及肿块,肿瘤体积均随着时间的延长明显增大,差异均有统计学意义(F=49.428、8.477,P值均<0.05)。两组间比较,第1、2次测量肿瘤体积,差异均无统计学意义(P值均>0.05);而第3~6次测量肿瘤体积,外泌体组均大于对照组,差异均有统计学意义(t=4.697、4.825、3.516、2.706,P值均<0.05)。测量6次后处死裸鼠,剥除肿瘤,外泌体组肿瘤质量(1.62±0.29)g大于对照组(1.00±0.43)g,差异有统计学意义(t=2.929,P<0.05)。肺组织切片HE染色结果显示,两组裸鼠均发生肺转移,外泌体组肺组织转移灶数量为6.63(3,17)个,多于对照组的1.17(0,3)个,差异有统计学意义(W=36.000,P<0.01)。结论CAFs来源的外泌体可增加骨肉瘤细胞株Saos-2的迁移及侵袭能力,同时促进骨肉瘤的生长和肺转移的形成。 展开更多
关键词 骨肉瘤 外泌体 癌相关成纤维细胞 肺转移 肿瘤微环境
原文传递
动态拉伸对兔膝软骨细胞糖胺多糖合成的影响
5
作者 边森 刘贵艳 +3 位作者 李凯 卫小春 徐刚 邵越峰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期11-14,共4页
目的观察不同强度的循环动态拉伸(CTS)对原代培养的兔膝关节软骨细胞糖胺多糖(GAG)合成的影响。方法1个月龄新西兰兔6只,无菌手术切取双膝关节软骨,采用0.4% Pronase酶和0.025% Ⅱ型胶原酶消化分离得到关节软骨细胞,来源于同一... 目的观察不同强度的循环动态拉伸(CTS)对原代培养的兔膝关节软骨细胞糖胺多糖(GAG)合成的影响。方法1个月龄新西兰兔6只,无菌手术切取双膝关节软骨,采用0.4% Pronase酶和0.025% Ⅱ型胶原酶消化分离得到关节软骨细胞,来源于同一只兔的软骨细胞分为3部分,分别接种在3块BioFlex培养板上,通过Flexercell 5000系统对单层培养的兔膝软骨细胞施加CTS刺激,加载条件为0.3 Hz正弦波形,时长为6 h/d,加载强度分别为0%、5%、15%的CTS刺激。于加载后24、36、48和60 h用倒置显微镜观察细胞形态,并分别抽取上清用阿尔新蓝染色沉淀法测量GAG浓度。采用重复测量资料的单因素方差分析比较不同强度CTS刺激组上清液中GAG浓度的差异。结果细胞力学加载后可见周边部软骨细胞由多角形变为纺锤形,沿培养皿半径垂直方向排列。随拉伸强度的增加,上清中GAG浓度依次上升,各组总平均浓度分别为[(4.7±1.3)比(6.3±1.1)比(8.0±1.8) ng/ml],差异有统计学意义(F=15.970,P=0.000);同一时间点,随CTS拉伸强度的增大,上清液中GAG的含量逐渐增高,各时间点3组浓度分别为[24 h:(2.3±0.5)比(3.3±0.6)比(3.9±0.6) ng/ml;36 h:(4.0±0.7)比(4.6±0.8)比(6.8±0.2) ng/ml;48 h:(5.5±0.7)比(6.8±0.7)比(8.5±0.8) ng/ml;60 h:(6.9±1.2)比(10.8±1.3)比(13.0±1.1) ng/ml],且差异有统计学意义(F=6.062,P=0.036;F=16.720,P=0.004;F=12.570,P=0.007;F=19.790,P=0.002),同一采样时间采用组间LSD法两两比较差异均有统计学意义。随加载总时间增加,上清中GAG浓度逐渐增加,各组分别为[0% CTS组:(2.3±0.5)比(4.0±0.7)比(5.5±0.7)比(6.9±1.2) ng/ml;5% CTS组:(3.3±0.6)比(4.6±0.8)比(6.8±0.7)比(10.8±1.3) ng/ml;15% CTS组:(3.9±0.6)比(6.8±0.2)比(8.5±0.8)比(13.0±1.1) ng/ml],且差异有统计学意义(0% CTS组:F=4.640,P=0.037;5% CTS组:F=23.580,P=0.000;15% CTS组:F=9.638,P=0.005)。且加载总时间与加载强度之间存在交互效应,时间越长,加载组上清中GAG浓度越大。结论CTS可促进单层贴壁兔膝关节软骨细胞合成GAG,作用效果随拉伸强度和时间的增加而增大。 展开更多
关键词 软骨细胞 循环动态拉伸 糖胺多糖 关节软骨
原文传递
直接前入路与后外侧入路全髋关节置换临床疗效的Meta分析 被引量:4
6
作者 陈韬予 董政权 +5 位作者 王小健 韩鹏飞 张芝良 李鹏翠 魏垒 卫小春 《中华解剖与临床杂志》 2019年第2期157-164,共8页
目的比较经直接前入路(DAA)与后外侧入路(PLA)行全髋关节置换手术的临床疗效。方法在中国知网数据库、万方数据库、PubMed数据库、Cochrane数据库,以"全髋关节置换""直接前入路""后外侧入路"和"dire... 目的比较经直接前入路(DAA)与后外侧入路(PLA)行全髋关节置换手术的临床疗效。方法在中国知网数据库、万方数据库、PubMed数据库、Cochrane数据库,以"全髋关节置换""直接前入路""后外侧入路"和"direct anterolateral approach""posterolateral approach""total hip arthroplasty"为关键词,计算机检索2010年1月—2018年4月国内外已发表关于经DAA与PLA行全髋关节置换术的病例对照研究或随机对照试验的中英文文献,严格评价文献质量,并提取相关数据,运用RevMan 5.3软件对手术时间、术中出血量、住院时间、术后疼痛VAS、术后髋关节功能Harris评分(HHS),以及并发骨折、感染、脱位情况进行Meta分析。结果纳入14项研究共6 341例患者,其中经DAA手术3 282例,经PLA手术3 059例。3项随机对照试验Cochrane偏倚风险评估均为低风险,11项病例对照研究NOS评分,高质量10项、较高质量1项。Meta分析结果显示,经DAA较PLA平均手术时间长(WMD=17.26, 95%CI 7.22~27.30, P<0.05 ),平均术中出血量多(WMD=113.50, 95%CI-1.13~228.14, P=0.05),平均住院时间短(WMD=-0.56, 95%CI -0.94^-0.17, P<0.05),术后疼痛VAS低(WMD=2.01, 95%CI 0.74~3.28, P<0.05),术后髋关节功能恢复好(WMD=2.01, 95%CI 0.74~3.28, P<0.05),差异均有统计学意义;而术后并发骨折(OR=1.25, 95%CI 0.88~1.77, P>0.05)、感染(OR=0.77, 95%CI 0.21~2.79, P>0.05)、髋关节脱位(OR=0.68, 95%CI 0.40~1.18, P>0.05),经DAA和PLA比较差异均无统计学意义。结论经DAA与PLA行全髋关节置换术均能获得基本满意的临床效果,经DAA手术平均住院时间短,术后疼痛轻,髋关节功能恢复较好;而经PLA手术时间短,术中出血量少。 展开更多
关键词 关节成形术 置换 直接前入路 后外侧入路 META分析
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部