BAY11-7082对严重烧伤大鼠急性肺损伤及早期肺炎症反应的干预作用

目的探讨BAY11－7082对严重烧伤大鼠急性肺损伤及早期肺炎症反应的干预作用。方法（1）实验1。取12只SD大鼠，按随机数字表法分为正常对照组3只、烧伤组9只。正常对照组大鼠不行特殊处理；烧伤组大鼠背部造成30%体表总面积Ⅲ度烧伤，伤后即刻腹腔注射生理盐水50 mL/kg。烧伤组于伤后12、24、48 h分别取3只大鼠采集腹主动脉血并取肺组织，酶联免疫吸附测定法检测血清中白细胞介素1β（IL－1β）、IL－18含量，实时荧光定量反转录－聚合酶链反应（RT－PCR）法检测肺组织中IL－1β、IL－18 mRNA表达。正常对照组大鼠同前采样检测。（2）实验2。取18只SD大鼠，按随机数字表法分为正常对照组、单纯烧伤组、BAY11－7082干预组，每组6只。正常对照组大鼠不行特殊处理；单纯烧伤组和BAY11－7082干预组大鼠同实验1致伤，伤后即刻分别腹腔注射生理盐水、终质量浓度为8 mg/mL BAY11－7082溶液50 mL/kg。于实验1结果得出的最佳观察时间点收集烧伤各组大鼠肺组织及肺泡灌洗液，苏木素－伊红染色观察肺组织形态并进行肺组织病理损害评分，酶标仪检测肺组织中髓过氧化物酶（MPO）含量及肺泡灌洗液中总蛋白含量，蛋白质印迹法检测肺组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1和核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLRP3）的蛋白表达，实时荧光定量RT－PCR法检测肺组织中IL－1β、IL－18、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 mRNA表达。正常对照组大鼠同前采样检测。对数据行单因素方差分析、LSD－t检验。结果（1）烧伤组大鼠伤后12、24、48 h血清中IL－1β和IL－18含量显著高于正常对照组（t＝10.55、22.05、12.47、10.60、15.22、11.94，P〈0.01）。烧伤组大鼠伤后12、24、48 h肺组织中IL－1β和IL－18 mRNA表达量明显高于正常对照组（t＝3.62、7.19、5.28、3.20、12.62、7.31，P〈0.05或P〈0.01）。伤后24 h为后续实验最佳观察时间点。（2）伤后24 h，与单纯烧伤组比较，BAY11－7082干预组大鼠炎性细胞浸润及肺泡内红细胞渗出明显减少，肺间质水肿明显消退。单纯烧伤组大鼠肺组织病理损害评分为（9.00±1.00）分，显著高于正常对照组的（1.10±0.26）分（t＝13.23，P〈0.01）。BAY11－7082干预组大鼠肺组织病理损害评分为（4.93±0.70）分，虽仍高于正常对照组（t＝8.84，P〈0.01），但较单纯烧伤组明显降低（t＝5.76，P〈0.01）。伤后24 h，单纯烧伤组大鼠肺组织中MPO含量[（1.83±0.15）U/mg]及肺泡灌洗液中总蛋白含量[（1.39±0.20）mg/mL]均显著高于正常对照组[（0.51±0.10）U/mg、（0.44±0.05）mg/mL，t＝12.50、7.86，P〈0.01]，BAY11－7082干预组大鼠肺组织中MPO含量[（0.91±0.12）U/mg]及肺泡灌洗液中总蛋白含量[（0.60±0.10）mg/mL]显著低于单纯烧伤组（t＝8.36、6.06，P〈0.01）。伤后24 h，单纯烧伤组大鼠肺组织中NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1蛋白表达量分别为3.10±0.09、2.99±0.30，显著高于正常对照组的1.00、1.00（t＝9.06、11.28，P〈0.01）；BAY11－7082干预组大鼠肺组织中NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1蛋白表达量分别为1.13±0.08、1.81±0.11，显著低于单纯烧伤组（t＝7.24、3.91，P〈0.05或P〈0.01）。伤后24 h，单纯烧伤组大鼠肺组织中IL－1β、IL－18、NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1的mRNA表达量分别为5.0±0.4、3.32±0.21、3.54±0.42、6.3±1.0，明显高于正常对照组的1.0、1.00、1.00、1.0（t＝13.97、14.14、11.78、7.13，P〈0.01）；BAY11－7082干预组大鼠肺组织中IL－1β、IL－18、NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1的mRNA表达量（2.6±0.5、2.00±0.28、1.39±0.21、2.5±0.5）显著低于单纯烧伤组（t＝7.11、5.80、9.99、4.65，P〈0.05或P〈0.01）。 结论严重烧伤大鼠急性肺损伤早期使用BAY11－7082可通过抑制NLRP3，减少半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1的表达，显著降低IL－1β和IL－18的水平，同时减少肺组织中MPO含量及肺泡灌洗液中总蛋白含量，从而减轻肺炎症反应，减轻肺损伤。