鸢尾素通过自噬对棕榈酸诱导的INS-1细胞功能和凋亡的影响

目的:探讨鸢尾素对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的胰岛β细胞功能和凋亡的影响。方法:培养INS-1细胞,用不同浓度梯度的鸢尾素干预INS-1细胞,根据蛋白结果筛选出最佳鸢尾素干预浓度为1 500 ng/mL。然后将INS-1细胞分为正常组、PA组、PA+1 500 ng/mL鸢尾素组、PA+1 500 ng/mL鸢尾素+雷帕霉素组、PA+1 500 ng/mL鸢尾素+3-MA组。用3.3 mmol/L和16.7 mmol/L的葡萄糖浓度刺激检测干预后胰岛素的分泌水平,Western blot检测自噬相关蛋白p-mTOR、mTOR、p62、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ的蛋白水平,用mGFP-GFP-LC3腺病毒转染观察自噬流水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果采用SPSS 20.0软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,多组间差异比较采用单因素方差分析及Turkey HSD检验。结果:(1) PA组LC3Ⅱ/Ⅰ的比值较正常组增高(0.745±0.035 vs. 1.015±0.012,P=0.000),随着鸢尾素干预浓度增加,LC3Ⅱ/Ⅰ的水平较PA组逐渐升高且有统计学意义(I1组1.465±0.028,I2组2.269±0.063,I3组1.858±0.074,I4组2.355±0.074,均P=0.000),鸢尾素浓度为1 500 ng/mL时LC3Ⅱ/Ⅰ的水平最高。(2) PA组INS-1细胞上清液中胰岛素水平在3.3 mmol/L和16.7 mmol/L葡萄糖刺激下较正常组均下降[(0.447±0.067)ng/mL vs.(0.138±0.012)ng/mL,P=0.000;(0.625±0.041)ng/mL vs.(0.245±0.043)ng/mL,P=0.000],鸢尾素干预后胰岛素水平较PA组均升高[(0.138±0.012)ng/mL vs.(0.322±0.041)ng/mL,P=0.001;(0.245±0.043)ng/mL vs.(0.414±0.036)ng/mL,P=0.005]。(3)与正常组相比,PA干预细胞后,自噬体数量增加(2.33±1.53 vs.10.33±1.53,P=0.000),而自噬溶酶体数量无明显变化(2.33±1.53 vs. 3.33±1.53,P=0.939),鸢尾素干预后,自噬体数量和自噬溶酶体数量较PA组均升高(10.33±1.53 vs. 15.67±1.53,P=0.007;3.33±1.53 vs. 12.00±2.00,P=0.001)。(4)与正常组相比,PA干预后细胞凋亡率增加[(11.417±1.297)%vs.(46.507±0.525)%,P=0.000],鸢尾素干预后凋亡率降低[(46.507±0.525)%vs.(33.767±1.083)%,P=0.000]。结论:鸢尾素通过自噬改善PA诱导的INS-1细胞分泌功能和凋亡。

维生素D3补充联合规范化降糖方案对初诊2型糖尿病患者胰岛β细胞功能及大血管并发症的影响

目的检测维生素D3补充联合规范化降糖方案对2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)患者胰岛β细胞功能及大血管并发症的影响。方法将192例T2DM患者随机分为对照组与观察组各96例,两组均予规范化降糖方案,观察组在此基础上加用维生素D3补充治疗,6个月后比较两组治疗前后体测指标、糖脂代谢指标、胰岛β细胞功能及大血管并发症相关指标。结果治疗6个月后,两组BMI、SBP、TG、FBG、FINS、HbA1c、HOMA-IR较治疗前均降低,HOMA-β升高(P<0.05)。与对照组相比,治疗6个月后观察组血清25(OH)D升高,Vaspin、CRP水平降低(P<0.05),CIMT及其他指标差异无统计学意义,25(OH)D与FBG、FINS、Vaspin、CRP呈负相关,与1PH、ISI呈正相关(P<0.05)。结论维生素D3与T2DM及其大血管并发症密切相关,但尚未发现维生素D3补充可以进一步改善T2DM患者胰岛β细胞功能及其大血管并发症。