大黄素和小檗碱对高浓度瘦素作用下HepG2细胞瘦素受体mRNA表达的影响

目的:探讨大黄素、小檗碱改善非酒精性脂肪肝患者体内高瘦素水平的作用及机制.方法:用MTT法筛选大黄素、小檗碱作用于HepG2细胞实验浓度,在HepG2细胞中加入高浓度的瘦素(10-6mol/L)作为模型组,在模型组中分别加入大黄素、小檗碱及地塞米松,并设对照组进行比较.用RT-PCR检测细胞上瘦素长型受体及短型受体mRNA的表达水平.结果:模型组细胞上瘦素长型受体及短型受体mRNA的表达水平较对照组显著下调(P<0.01),大黄素、小檗碱及地塞米松组较模型组显著上调(P<0.01),较对照组无明显改变(P>0.05).结论:大黄素和小檗碱具有通过上调瘦素受体mRNA的表达来治疗高浓度瘦素诱导机体产生非酒精性脂肪肝的作用.

大黄素、小檗碱对HepG2细胞胰岛素抵抗的预防作用研究

目的:研究大黄素、小檗碱对HepG2细胞产生胰岛素抵抗的预防作用及机制。方法:首先用MTT法筛选大黄素、小檗碱作用于HepG2细胞的实验浓度,然后用软脂酸诱导HepG2细胞,同时分别加入大黄素、小檗碱干预,并设正常组、对照组进行比较,通过葡萄糖氧化酶法、蒽酮法、RT-PCR法,观察大黄素、小檗碱对HepG2细胞上糖代谢及瘦素长型受体、短型受体mRNA表达水平的影响。结果:对照组成为具有胰岛素抵抗的HepG2细胞,且细胞上瘦素长型及短型受体mRNA的表达水平较正常组显著下降(P<0.01);而大黄素、小檗碱组培养液中葡萄糖含量、细胞内糖原含量以及细胞上瘦素长型及短型受体mRNA的表达水平较正常组无明显改变(P>0.05)。结论:大黄素、小檗碱均能预防HepG2细胞产生胰岛素抵抗,这一作用与它们影响HepG2细胞上糖代谢及瘦素受体mRNA表达水平有关。

自然杀伤细胞抗肝癌的研究新进展

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,预后差,复发率高。免疫治疗已成为继手术、放疗、化疗后的第四种治疗模式,其中自然杀伤细胞可以在细胞、分子及基因水平抑制肿瘤转移及复发,在肝癌的免疫治疗中起关键性作用,在开展新的治疗模式以及提高肝癌患者生活质量方面具有很广阔的应用前景。

外源性吲哚胺2,3-双加氧酶与肝癌的免疫耐受

目的:探讨吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)参与肝癌免疫逃逸的机制。方法:混合培养HepG2细胞和T淋巴细胞,在有或无外源性IDO存在下,用RT-PCR检测细胞中IDOmRNA的表达,流式细胞仪分析混合反应体系中HepG2细胞的凋亡率,MTT检测T淋巴细胞抗HepG2细胞的细胞毒活性。结果:混合反应体系中,HepG2细胞表达IDOmRNA的水平随着IDO浓度的增高而无明显变化;在对照组及实验组(IDO浓度分别为0.05,0.5,5 mmol/L)中,HepG2细胞的凋亡率分别为(3.48±0.34)%,(3.32±0.35)%,(3.46±0.40)%,(2.75±0.26)%,T淋巴细胞的细胞毒活性分别为(17.36±1.24)%,(17.30±0.52)%,(17.48±1.08)%,(15.74±0.79)%。结论:外源性IDO能抑制外周T淋巴细胞发挥抗肝癌免疫作用,它可能参与了肿瘤免疫耐受。

血小板P选择素及CD40/CD40L在动脉粥样硬化中的研究进展

血小板是炎症反应的关键介质,活化的血小板可表达P选择素、CD40及CD40L,激活内皮细胞且促进白细胞的募集和活化,加速动脉粥样硬化病变。现就近年来血小板表面P选择素、CD40/CD40L在动脉粥样硬化中的促炎作用及其相关防治靶点的研究进展做一综述。

脂质体介导pcDNA3.1-IDO转染hepG_2细胞的初步研究

目的:建立脂质体介导pcDNA3.1-IDO转染人肝癌细胞株hepG2细胞的转染方法。方法:在大肠杆菌中扩增pcDNA3.1-IDO质粒,通过lipofectamineTM2000转染试剂将pcDNA3.1-IDO转入人肝癌细胞hepG2,同时设置空质粒转染组(pcDNA3.1-hepG2细胞)和空白对照组(hepG2细胞)。分别应用RT-PCR和Western blot方法检测吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)基因及IDO蛋白在hepG2细胞中的表达。结果:经RT-PCR和Western blot检测证实空质粒转染组和空白对照组hepG2细胞无IDO基因及蛋白的表达,而重组质粒组的hepG2细胞均表达IDO基因和蛋白。结论:通过脂质体介导成功地将pcDNA3.1-IDO转染入肝癌细胞株hepG2细胞。这为研究IDO基因奠定了基础。

核因子-кB与心力衰竭心功能分级关系的研究

目的探讨充血性心力衰竭(congestive heart failure,CHF)患者不同心功能分级与外周血单个核细胞(peripher-al blood mononuclear cells,PBMC)核因子-кB(NF-кB)表达的关系。方法选取75例心衰患者,并按心功能分为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ3个组,分别为33例、24例、18例和正常对照组15例。PBMC的NF-кB表达由免疫组化染色检测。两组资料差异采用t检验,心衰患者心功能与PBMC NF-кB表达的关系用相关分析。结果心衰组与正常对照组PBMC NF-кB的表达差异有统计学意义(P<0.01),心衰患者心功能分级与PBMC NF-кB的表达呈正相关(P<0.01)。结论心衰的程度越重,NF-кB表达越高。

大黄素、小檗碱对胰岛素抵抗HepG2细胞的影响

目的:研究大黄素、小檗碱对具有胰岛素抵抗的HepG2细胞的治疗作用及其机制。方法:用MTT法筛选大黄素、小檗碱作用于HepG2细胞的实验浓度,然后用游离脂肪酸诱导HepG2细胞使其成为具有胰岛素抵抗的细胞作为模型组,在模型组中分别给予大黄素、小檗碱、地塞米松进行干预,通过葡萄糖氧化酶、蒽酮法、RT-PCR法检测细胞上糖代谢及瘦素长型受体、短型受体mRNA的表达水平。结果:大黄素、小檗碱、地塞米松组培养液中葡萄糖含量及细胞内糖原含量较模型组明显改善,细胞上瘦素长型及短型受体mRNA的水平明显上调,较正常组无明显改变。结论:大黄素、小檗碱均能增加葡萄糖的消耗,增加细胞内糖原含量,上调瘦素受体mRNA的表达水平,表示它们可通过调节糖代谢及瘦素受体的表达水平来治疗胰岛素抵抗。