甘草酸苷联合艾司氯胺酮对小鼠围手术期神经认知障碍的影响及其机制

目的探讨甘草酸苷联合艾司氯胺酮通过调节海马区高迁移率族蛋白B1(HMGB1)信号通路对小鼠围手术期神经认知障碍(PND)的影响及相关机制。方法将小鼠分为空白组、PND组、甘草酸苷组、艾司氯胺酮组、甘草酸苷+艾司氯胺酮组,每组24只。本实验通过Morris水迷宫评估小鼠空间学习记忆能力,各组小鼠分别于术前1 d,术后1,3,7 d行定位航行实验记录逃避潜伏期,术后第7天行空间探索实验记录目标象限穿梭次数。ELISA法检测术前1 d,术后1,3,7 d各组小鼠海马区白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、HMGB1、Toll样受体4(TLR-4)、核因子κB(NF-κB)表达含量。免疫荧光实验检测空白组、PND组、甘草酸苷+艾司氯胺酮组术后第1天小鼠海马区HMGB1表达情况。结果各组术前1 d各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。Morris水迷宫结果显示:与空白组相比,其他组术后同时点逃避潜伏期均延长(P<0.05),术后第7天穿越平台次数均减少(P<0.05);与PND组相比,甘草酸苷组、艾司氯胺酮组和甘草酸苷+艾司氯胺酮组术后同时点逃避潜伏期缩短(P<0.05),术后第7天穿越平台次数增多(P<0.05);与甘草酸苷组和艾司氯胺酮组相比,甘草酸苷+艾司氯胺酮组术后同时点逃避潜伏期缩短(P<0.05),术后第7天穿越平台次数增多(P<0.05)。ELISA结果显示:与空白组相比,其余组术后同时点海马区IL-1β、TNF-α、HMGB1、TLR-4、NF-κB表达含量均明显升高(P<0.05);与PND组相比,甘草酸苷组、艾司氯胺酮组和甘草酸苷+艾司氯胺酮组术后同时点海马区IL-1β、TNF-α、HMGB1、TLR-4、NF-κB表达含量明显降低(P<0.05);与甘草酸苷组和艾司氯胺酮组相比,甘草酸苷+艾司氯胺酮组术后同时点海马区IL-1β、TNF-α、HMGB1、TLR-4、NF-κB表达含量明显降低(P<0.05)。免疫荧光结果显示:与空白组相比,PND组小鼠术后第1天海马CA1区及DG区HMGB1表达明显增多,且在海马CA1区及DG区均检测到HMGB1在细胞质中表达;与PND组相比,甘草酸苷+艾司氯胺酮组术后第1天小鼠海马CA1区及DG区HMGB1表达明显减少。结论甘草酸苷联合亚麻醉剂量艾司氯胺酮可改善小鼠围手术期神经认知功能及海马神经炎症,其机制可能与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路相关。

右美托咪定对老年脊柱患者术后认知功能及外泌体miR-29c表达水平的影响

目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对老年脊柱患者术后认知功能及外泌体miR-29C表达水平的影响。方法选取120例于本院行择期骨科脊柱手术的老年患者,按照随机数字表法分为DEX和对照组,各60例。DEX组患者麻醉前10 min给予DEX 0.8μg/(kg·h),术中DEX以0.5μg/(kg·h)的速率泵注,于手术结束前30 min停药;对照组泵注等量的生理盐水。对比两组术后认知功能障碍(postoperative cognitive dysfunction,POCD)的发生率和术前1 d、术后1 d、术后3 d血清外泌体miR-29c、S100-β蛋白及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达水平。于术前1 d和术后1 d对入选患者行蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA)评分,依据术后1 d的MoCA评分将所选患者分为POCD组和非POCD组,比较两组患者血清外泌体miR-29c、S100-β蛋白及NSE的表达水平。结果DEX组和对照组患者术后1 d的MoCA评分与术前1 d相比均明显下降(P<0.05);与对照组相比较,DEX组患者术后1 d的MoCA评分更高(P<0.05)。DEX组患者POCD发生率低于对照组(P<0.05),且术后1 d和术后3 d时血清S100-β蛋白、NSE和miR-29c的相对表达量也低于对照组(P<0.05)。POCD组患者术后1 d和术后3 d时血清S100-β蛋白、NSE和miR-29c的表达水平均显著高于非POCD组(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,术后1 d NSE、S100-β蛋白、外泌体miR-29c的表达水平预测老年患者术后发生认知功能障碍风险的AUC分别为0.852,0.856,0.893。结论DEX可以降低老年患者全麻下脊柱手术POCD的发生风险,同时降低其血清外泌体miR-29c的表达水平。

基于多个基因多态性的术后舒芬太尼镇痛效应

目的研究下肢骨折病人P2RX7(位点rs1718125)、COMT(位点rs4680)、OPRM1(位点rs1799971)、CYP3A4(位点rs2242480)、ABCB1(位点rs1045642)基因多态性对术后舒芬太尼镇痛消耗量影响,为临床镇痛提供指导。方法选择下肢骨折的手术病人100例,术前记录患者的性别、年龄、体质量指数(BMI)、手术部位等信息,术后使用舒芬太尼镇痛,记录术后12,24 h时患者的视觉模拟评分(VAS评分)及舒芬太尼消耗量。同时采取外周静脉血2 ml,检测患者P2RX7(rs1718125)、COMT(rs4680)、OPRM1(rs1799971)、CYP3A4(rs2242480)、ABCB1(rs1045642)的基因型,从而评估非遗传因素(性别、年龄、体质量指数、手术部位)和遗传因素对术后舒芬太尼消耗量的影响。结果非遗传因素性别、年龄、体质量指数(BMI)、手术部位对术后12,24 h的舒芬太尼消耗量皆无影响(P>0.05)。术后12,24 h,遗传因素P2RX7、COMT、CYP3A4、ABCB1的单核苷酸多态性野生型与突变型之间舒芬太尼消耗量差异有统计学意义(P<0.05);OPRM1的单核苷酸多态性对舒芬太尼消耗量差异无统计学意义(P>0.05)。结论P2RX7(rs1718125)、COMT(rs4680)、CYP3A4(rs2242480)和ABCB1(rs1045642)基因不同单核苷酸多态性(SNP)术后消耗的舒芬太尼量不同,有望为下肢骨折患者术后镇痛提供指导。

电针百会、神庭、足三里对胫骨骨折小鼠术后学习记忆能力的影响

目的探讨穴位电刺激对胫骨骨折内固定术后小鼠学习记忆能力、海马内α7nAChR表达及大脑炎症反应的影响。方法75只6月龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为5组,每组各15只:对照组、胫骨骨折组(模型组)、穴位电刺激+胫骨骨折组(电针组)、α7nAChR激动剂PNU282987+胫骨骨折组(PNU组)及穴位电刺激+α7nAChR拮抗剂MLA+胫骨骨折组(MLA+电针组)。75只小鼠参与水迷宫定位巡航训练1周后对模型组、电针组、PNU组和MLA+电针组小鼠做胫骨骨折内固定模型处理。造模后第1天开始对各组小鼠加用相应刺激条件,直至处死当天。分别于术前1 d,术后1,3,7 d分批处死小鼠,术前1 d,术后1,3 d每组各处死3只,术后7 d每组各处死6只。整个实验采用定位巡航实验和空间探索试验评估小鼠学习记忆能力,酶联免疫吸附试验法检测小鼠海马内IL-4、IL-10、IL-1β、TNF-α含量,免疫荧光实验检测小鼠海马内α7nAChR表达情况。结果定位航行实验显示模型组在术后1,3,7 d逃避潜伏期明显大于对照组(P<0.05),表明小鼠胫骨骨折内固定模型建立成功;术后1,3,7 d电针组逃避潜伏时间明显小于模型组(P<0.05)。空间探索实验显示术后7 d电针组穿越平台次数明显多于模型组(P<0.05)。ELISA实验结果显示电针组在术后1,3,7 d的IL-1β、TNF-α含量明显小于模型组(P<0.05);电针组术后1,3,7 d的IL-4、IL-10含量明显多于模型组(P<0.05)。免疫荧光实验结果显示电针组海马内α7nAChR含量明显多于模型组(P<0.05)。结论穴位电刺激可以增加海马内α7nAChR含量,减弱大脑炎症反应并且改善小鼠胫骨骨折术后的学习记忆能力。