刚地弓形虫垂直传播小鼠模型的建立

目的探讨建立刚地弓形虫稳定垂直传播小鼠模型的方法。方法将42只孕8dBALB/c小鼠随机分为(A-F组),正常对照A组(孕鼠经腹腔注射无菌PBS 0.2ml/只)和感染组(B^F)(每只小鼠经腹腔接种不同剂量的弓形虫速殖子10、20、40、80个/0.2ml)。观察并记录孕鼠的体重改变、行为反应、流产率与活胎率;孕18d时剖腹,取出胎鼠进行形态学观察。结果感染组小鼠出现倦怠、竖毛、弓背等异常反应,且随速殖子感染数量的增加异常反应程度逐渐严重;F组孕鼠死亡2只。感染组较对照组体重增加不明显,F组体重减轻;孕18d时D^F组体重与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。感染组出现流产、死胎等,F组存活孕鼠腹中无胎鼠。D^F组流产率与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);B^F组活胎率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。E^F组胎鼠体重、体长、尾长与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立刚地弓形虫垂直传播小鼠模型,BALB/c小鼠孕8d腹腔注射接种RH株弓形虫速殖子40个/(0.2ml·只)为适宜感染剂量。

先天性弓形虫感染胎鼠脑组织蛋白差异分析

目的检测先天性弓形虫感染胎鼠脑组织差异蛋白并分析其功能,为先天性弓形虫病的发生机制研究提供理论基础。方法选取9~10周龄BALB/c孕鼠20只,随机分为正常对照组和感染组,每组10只。于妊娠第10d,感染组每只小鼠腹腔注射经胰酶消化的弓形虫速殖子40个/0.2ml;正常对照组腹腔注射无菌PBS溶液0.2ml/只(0.01mol/L,pH 7.3)。于妊娠第20d处死孕鼠,取胎鼠脑组织,采用Bradford法测定蛋白含量;采用双向凝胶电泳分离胎鼠脑组织蛋白,运用ImageMaster 2D软件分析差异蛋白,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析差异蛋白点的肽指纹谱(PMF),运用Mascot软件在SWISS-PROT数据库中对差异蛋白进行比较与评判,运用David软件对差异蛋白进行生物信息学分析。结果两组胎鼠脑组织均分离出约500个蛋白点,经蛋白质胶图分析鉴定出显著差异蛋白点15个,分子质量单位(Mr)多分布于(8~48)×103之间,等电点(pI)在3~10之间。在弓形虫感染胎鼠脑组织低表达的15个差异蛋白点经过鉴定和功能分析,主要是以下6种:结蛋白,肌动蛋白,血清白蛋白,葡萄糖调节蛋白,蛋白质二硫键异构酶和膜联蛋白。结论弓形虫感染胎鼠脑组织中有6种差异蛋白低表达,弓形虫可能通过降低这些蛋白的表达量来影响胎鼠脑组织的正常结构、物质转运和调节功能等,从而引发先天性弓形虫脑病。