高产葡聚糖酶微生物的分离筛选

β-葡聚糖是饲料谷物中的主要成分之一,为了帮助动物摄取后更好的消化吸收,选择高产β-葡聚糖酶的微生物作为添加剂以提高饲料的利用率十分必要。从丁香树下土壤中分离具有产β-葡聚糖酶的微生物,通过DNS法测定其产酶活,筛选酶活较高的菌株,测定其生长曲线,并采用分子生物学方法对其进行初步鉴定。结果显示:分离得到3株高产β-葡聚糖酶的菌株,其中菌株D-1酶活力最高可以达到103.67 U·mL^(-1)。通过对该菌株的生长曲线测,得知其对数生长期在8~24 h。对其进行16S rRNA扩增并构建系统发育树,发现D-1菌株与芽孢杆菌Bacillus sp.同源性达到了99%以上,与蜡样芽孢杆菌聚为一个分支,确定该菌属于蜡样芽孢杆菌。综上,分离菌株可为高产β-葡聚糖酶微生物提供种质资源。

甘草多糖对小鼠肺组织炎症及氧化损伤的修复机制

【目的】探讨甘草多糖对慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠肺组织炎症和氧化损伤的修复作用.【方法】将30只小鼠随机分为对照组(C组)、致病组(COPD组)和治疗组(L+COPD组),通过烟熏法建立COPD小鼠模型,采用水提法制备甘草多糖,在治疗中观察小鼠生理体征变化并检测血清和肺组织中细胞因子和抗氧化指标.【结果】COPD小鼠在甘草多糖治疗下,精神好转,饮食与活动明显增加;L+COPD组小鼠促炎症因子IL-17、IL-6和TNF-α的表达显著降低(P<0.05),抑制炎症因子IL-10的表达极显著提高(P<0.01);T-SOD、GSH-Px和T-AOC的含量显著提高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05);小鼠肺组织和气管得到有效修复.【结论】50 mg/kg甘草多糖对COPD小鼠肺组织炎症和氧化损伤修复起到较好的治疗作用.

五味子醇提物对TNBS致小鼠肠道炎症的损伤修复作用

为研究五味子醇提物对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)致小鼠肠炎的治疗效果,本试验将18只健康的雄性小鼠随机分为对照组(C组)、致病组(TNBS组)和治疗组(S+TNBS组),采用TNBS法建立小鼠肠炎模型,对S+TNBS组小鼠进行为期10 d的五味子醇提物(1 g/mL,0.2 mL/只)治疗。结果显示:血清和肠组织中促炎症细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,S+TNBS组显著低于TNBS组(P<0.05),极显著高于C组(P<0.01),S+TNBS组抑制炎症细胞因子白细胞介素10(IL-10)的含量极显著高于TNBS组(P<0.01),显著高于C组(P<0.05);血清与肠组织中抗氧化指标总超氧化物歧化酶(T-SOD)的含量,S+TNBS组极显著高于C组和TNBS组(P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化力(T-AOC)的含量S+TNBS组极显著高于C组(P<0.01),显著高于TNBS组(P<0.05),S+TNBS组中丙二醛(MDA)的含量显著低于TNBS组(P<0.05),显著高于C组(P<0.05)。表明S+TNBS组小鼠促炎症细胞因子分泌降低,抑制炎症细胞因子分泌升高,抗氧化能力增强,小鼠剖检观察肠道损伤减轻。五味子醇提物在浓度为1 g/mL时对TNBS致小鼠肠炎的损伤修复起到较好的治疗作用。

玫瑰花提取物对砷胁迫下酵母细胞凋亡抑制的研究

本试验以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为材料,研究玫瑰花提取物(RE)对砷胁迫下酵母细胞生长和凋亡的影响。试验以抗坏血酸(Vc)溶液为标准抗氧化对照物,1.0 mmol/L亚砷酸钠(As)为酵母胁迫浓度,分别设置了酵母对照组、酵母+RE(1.5 g/L)培养组、酵母+Vc(0.1 g/L)培养组、酵母+As(1.0 mmol/L)培养组、酵母+As+RE培养组和酵母+As+Vc培养组。酵母细胞培养24 h后,利用噻唑兰(MTT)细胞增殖法、平板点样法、荧光素二乙酸/碘化丙锭(FDA/PI)染色法、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)细胞核染色法和Annexin V-FITC/PI细胞凋亡流式检测法测定了酵母细胞的生长增殖与凋亡。试验结果显示,RE有效地缓解了砷对酵母细胞的损伤,极显著提高了砷胁迫下酵母细胞的生长率和存活率(P<0.01),极显著抑制了砷胁迫下酵母细胞的凋亡(P<0.01)。结果证实,RE对砷胁迫酵母细胞的凋亡有显著抑制作用,在50%的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率下,其对砷胁迫下酵母细胞的凋亡抑制率显著高于Vc(P<0.05)。因此,RE作为天然植物提取物,因其绿色、无毒的作用机制,将在对抗重金属污染、提高机体抗氧化力、缓解氧化损伤等方面有着更广阔的应用前景。

硒对砷致雄性小鼠睾丸组织损伤的修复作用

为了研究硒对砷致雄性小鼠睾丸组织损伤的修复作用,试验选取雄性小鼠18只,随机分为3组,分别为:正常组(C组)、加砷组(砷的饮水质量分数为50 mg/kg,A组)和硒砷联合组(砷的饮水质量分数为50 mg/kg,硒的灌胃量0.5 mg/kg,A+Se组),测量小鼠和睾丸组织的质量,检测抗氧化指标以及睾丸的组织形态和细胞凋亡。结果表明,A组小鼠食欲下降,生长迟缓,出现严重掉毛现象;砷染毒小鼠经硒联合作用后,A+Se组小鼠饮食活动正常,生长发育状态良好,C组和A+Se组小鼠体质量显著高于A组小鼠,A+Se组小鼠睾丸组织质量显著高于A组;A+Se组小鼠血清和睾丸组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化力(T-AOC)的活性极显著高于A组,显著高于C组,A+Se组小鼠血清中丙二醛(MDA)含量显著高于C组,极显著低于A组;砷染毒并加硒的A+Se组,各级生精细胞的数量都较A组有所增加,形态结构也比较完整;A+Se组睾丸组织中的细胞凋亡数极显著低于A组,凋亡只发生于精原细胞,初级精母细胞和睾丸间质细胞没有发生细胞凋亡。硒对砷的毒性起到明显拮抗作用,能够有效修复砷致小鼠睾丸组织的损伤。

Box-Behnken法优化甘草多糖提取工艺及其体外抗氧化活性分析

本研究以传统炮制甘草为原材料,采用超声辅助水浴提取法,以粉碎粒径、液料比、超声温度和超声时间为考察因素,利用Box-Behnken响应面进行试验设计和曲面响应法对最佳甘草多糖提取条件进行优化,构建预测模型的二次多项式回归方程,并测定其体外抗氧化活性。结果表明,甘草多糖提取的最佳工艺条件为:粉碎粒径127μm,液料比19.32 mL/g,超声温度65℃,超声时间30.2 min,多糖得率为10.867%。甘草粗提取物对DPPH·和ABTS+·均具有不同程度的清除作用,两种不同自由基的清除率与多糖提取物浓度之间存在一定量效关系,其IC50值分别2.80 mg/mL和1.96 mg/mL。本研究建立的模型可对甘草多糖得率进行分析和预测,并为甘草资源的开发和利用提供依据。

茯苓多糖联合恩诺沙星体内外抗菌活性评价

通过体内外抑菌试验考察茯苓多糖和恩诺沙星联合抗菌的生物活性。采用二倍稀释法测定茯苓多糖联合恩诺沙星对浮游菌的最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC),MTT法检测茯苓多糖联合恩诺沙星对细菌生物膜(bacterial biofilm,BBF)的抑制作用,同时腹腔注射SA建立小鼠腹腔感染模型,并在此基础上,通过腹腔给药的方式,检测茯苓多糖联合恩诺沙星在体内抑制SA的效果。在体外抑制浮游菌的试验中,茯苓多糖联合恩诺沙星对鸡BSA的MIC为16μg/mL(以恩诺沙星计);茯苓多糖联合恩诺沙星对SA的MIC为8μg/mL(以恩诺沙星计);茯苓多糖联合恩诺沙星对E.coli的MIC为4μg/mL(以恩诺沙星计);在体外抑制细菌生物膜的试验中,茯苓多糖可以改善恩诺沙星清除细菌生物膜的能力;在治疗小鼠腹腔感染试验中,茯苓多糖可以使恩诺沙星抑制SA的活性增强。结果表明,茯苓多糖具有增强恩诺沙星抗菌能力的作用,有效减少恩诺沙星的使用剂量。

母源纳米硒对岢岚绒山羊后代睾丸发育的影响

为了研究母源纳米硒对后代羔羊睾丸发育的影响,在哺乳母羊日粮中添加0.5 mg/kg的纳米硒,120 d哺乳期结束后,采用原子荧光和可见光分光光度法、巴氏染色法、TUNEL法和Real-time PCR法,检测母羊与羔羊供试样品的硒含量、抗氧化性能、精子形态、睾丸组织凋亡和凋亡基因表达。结果显示:纳米硒添加组(S组)的母羊及羔羊血液及母乳硒含量均极显著高于正常饲喂组(C组)(P<0.01);C组硒含量排序为母羊血硒>初乳>羔羊血硒>常乳,S组中硒含量高低比较为初乳>母羊血硒>羔羊血硒>常乳;C组和S组母羊组织硒的沉积顺序均为肾脏>肝脏>心肌;C组羔羊组织中硒的沉积顺序是肾脏>肝脏≈睾丸>心肌,S组羔羊组织硒的沉积顺序为睾丸>肾脏>肝脏>心肌;S组睾丸组织发育显著优于C组(P<0.05),S组精子畸形率极显著降低(P<0.01);S组羔羊睾丸组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的抗氧化活性极显著高于C组(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)的活性显著提高(P<0.05),丙二醛(MDA)的浓度极显著降低(P<0.01);TUNEL检测S组羔羊睾丸组织细胞凋亡显著低于C组(P<0.05),促凋亡基因(Bax)的表达极显著降低(P<0.01)。结果表明:哺乳母羊日粮中添加纳米硒可以通过血乳屏障传递来提高后代公羔血液及睾丸组织的抗氧化力,促进睾丸组织发育,降低精子畸形率。