Linc-NeD125通过调控微小RNA-19b对缺氧/复氧诱导的心肌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探究上调长链非编码RNA(lncRNA)Linc-NeD125对缺氧/复氧心肌细胞增殖和凋亡的影响及相关分子机制。方法 采用缺氧/复氧诱导HCM细胞建立损伤模型,通过实时定量聚合酶链反应(RT-q PCR)技术检测缺氧/复氧诱导的HCM细胞Linc-NeD125表达水平。将阴性对照慢病毒和Linc-NeD125慢病毒分别感染缺氧/复氧诱导的HCM细胞,HCM细胞分为NC组和Linc-NeD125组。细胞计数(CCK-8)法和流式细胞术分别检测NC组和Linc-NeD125组HCM细胞的增殖水平和凋亡率。双荧光素酶报告基因实验检测Linc-NeD125与微小RNA(miR)-19b的靶向关系。RT-qPCR检测NC组和Linc-NeD125组HCM细胞中miR-19b表达水平。蛋白免疫印迹法检测NC组和Linc-NeD125组HCM细胞中细胞周期蛋白(Cdk2、Cyclin E)、抗凋亡蛋白(Bcl-XL、Mcl-1)以及促凋亡蛋白Bax的表达。结果 缺氧/复氧诱导HCM细胞中LincNeD125表达水平低于正常HCM细胞(P<0.01)。Linc-NeD125组HCM细胞中Linc-NeD125表达水平高于NC组(P<0.01)。与NC组相比,Linc-NeD125组HCM细胞的增殖水平升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实Linc-NeD125可与miR-19b靶向结合(P<0.01)。与NC组相比,Linc-NeD125组HCM细胞中miR-19b表达水平降低(P<0.01)。与NC组相比,Linc-NeD125组HCM细胞中细胞周期蛋白Cdk2、Cyclin E表达水平均升高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-XL、Mcl-1表达水平均升高(P<0.01),促凋亡蛋白Bax表达水平降低(P<0.01)。结论 上调Linc-NeD125能够增加缺氧/复氧诱导的心肌细胞增殖活性,抑制心肌细胞的凋亡,其分子机制与靶向调控miR-19b表达有关。

牡荆苷调控circRSF1对OxLDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响及分子机制

目的探讨牡荆苷对氧化低密度脂蛋白(OxLDL)诱导的血管内皮细胞(VEC)损伤的影响及分子机制。方法将人脐静脉VEC分为Con组、OxLDL组、OxLDL+牡荆苷低、中、高剂量组、OxLDL+pcDNA组、OxLDL+pcDNA-环状RNA重构和间距因子(circRSF1)组、OxLDL+牡荆苷+si-NC组、OxLDL+牡荆苷+si-circRSF1组;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞抑制率;流式细胞术检测VEC凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞中活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circRSF1表达水平。结果不同剂量牡荆苷处理后,OxLDL诱导的VEC抑制率、凋亡率明显降低,SOD活性明显增强,ROS水平、MDA含量明显降低,circRSF1明显高表达,呈明显剂量依赖性(P<0.05)。过表达circRSF1后,VEC抑制率和凋亡率明显降低,SOD活性明显增强,MDA含量和ROS水平明显降低(P<0.05)。抑制circRSF1可逆转牡荆苷对OxLDL诱导的VEC损伤的影响。结论牡荆苷通过调控circRSF1抑制OxLDL诱导的VEC损伤。